Modelli Embrionali - Progetto e
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Modelli embrionali PESCI UCCELLI Pesci Sviluppo di Zebrafish Primi Stadi di Sviluppo di Zebrafish Segmentazione in Zebrafish Uovo Telolecitico Segmentazione Meroblastica Discoidale Fertilizzazione Aumento Calcio Intracellulare Blastodisco Contrazione Citoscheletro actinico Il citoplasma privo di vitello viene spinto verso il polo animale Vitello Zigote con forma piriforme Segmentazione in Zebrafish –Immagini al Microscopio Elettronico Le prime 12 divisioni sono sincrone ad intervalli di 15 minuti Blastoderma Cellula di Vitello A partire dalla 10 divisione si ha MBT e le divisioni cellulari rallentano Nella Blastula si distinguono 3 popolazioni cellulari: 1. Strato sinciziale vitellino (YSL) 2. Strato di Rivestimento (EVL) 3. Cellule Profonde Strato Sinciziale del Vitello (YSL, yolk syncytial layer) 0 Si forma dalla fusione delle cellule al margine vegetativo del blastoderma con la sottostante cellula del vitello 0 In seguito a movimenti cellulari del blastoderma si distinguono YSL interno (sotto il blastoderma) e YSL esterno (davanti al margine del blastoderma) 0 YSL sarà importante per dirigere alcuni movimenti durante la gastrulazione Strato di Rivestimento (EVL, enveloping Layer) 0 È costituito dalle cellule più esterne del blastoderma che formano una lamina epiteliale monostratificata 0 EVL forma un rivestimento protettivo extraembrionale (periderma) che si distacca durante lo sviluppo successivo Cellule Profonde 0 Sono poste tra YSL e EVL 0 Daranno origine all’embrione vero e proprio Mappa presuntiva delle cellule profonde al termine del mescolamento Gastrulazione in Zebrafish La gastrulazione dei pesci inizia con l’epibolia delle cellule del blastoderma al di sopra del vitello Movimenti cellulari durante la gastrulazione Epibolia Espansione del blastoderma al di sopra del vitello Ispessimento del blastoderma Anello germinativo Ipoblasto Epiblasto Movimento sul lato dorsale dell’embrione Ispessimento localizzato Scudo embrionale Movimenti cellulari durante la gastrulazione A. B. C. D. E. Blastoderma – stadio 30% epibolia Formazione dell’Ipoblasto Immagine ingrandita della regione marginale Stadio 90% epibolia, presenza di mesoderma attorno al vitello, tra endoderma e ectoderma Gastrulazione completa Formazione degli assi in Zebrafish Lo scudo embrionale è l’organizzatore dell’embrione dei pesci Approfondimento: Shinya et al, 1999 Lo scudo embrionale regola la formazione dell’asse dorsoventrale La proteina Wnt8 ha un ruolo centrale nella determinazione dell’asse anteroposteriore Uccelli Origine di un nuovo organismo negli uccelli Fecondazione interna Uovo Telolecitico Segmentazione Meroblastica Discoidale Vitello Blastoderma Discoblastula dell’embrione di pollo Il blastoderma è costituito da 5-6 strati di cellule unite da giunzioni strette L’accumulo di liquido determina la formazione di una cavità tra blastoderma e vitello: la cavità sottogerminale Le cellule profonde della zona centrale si staccano e muoiono formando l’area pellucida dello spessore di una sola cellula Le cellule profonde che non si sono staccate dal blastoderma formano l’area opaca Tra le cellule dell’area pellucida e opaca si trova un sottile strato di cellule detto zona marginale Gastrulazione nell’embrione di pollo Formazione del blastoderma didermico Ipoblasto + Epiblasto La linea primitiva si forma nella regione marginale posteriore. Ispessimento dell’epiblasto Depressione dell’epiblasto Solco primitivo Il nodo di Hensen si presenta come un ispessimento della linea primitiva nella zona anteriore. Al centro del Nodo di Hensen si trova la fossetta primitiva, una depressione imbutiforme che permette il passaggio di cellule verso il blastocele Le cellule migrano e differeziano passando attraverso la linea primitiva Formazione dell’endoderma e del mesoderma La linea primitiva inizia a regredire e il nodo di Hensen assume una posizione più caudale. Si forma la notocorda Le cellule del mesoderma e dell’endoderma sono poste all’interno dell’embrione e l’epiblasto è costituito dall’ectoderma presuntivo Le cellule dell’ectoderma migrano e proliferano andando a circondare il vitello (epibolia) Determinazione degli assi nell’embrione di pollo ASSE DORSOVENTRALE ASSE ANTEROPOSTERIORE stabilito precocemente durante la segmentazione Il pH è fondamentale pH basico – albume – dorso pH acido – cavità subgerminale - ventre Lo stabilirsi dell’asse anteroposteriore è influenzato dalla forza di gravità
