Tecniche Molecolari

De Leo - Fasano - Ginelli – Biologia e Genetica, II Ed. – Capitolo 13
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Nucleic acid hybridization is a common approach for surveying gene
expression at the RNA level and can be used to provide whole genome
expression screens
Probe
Matches
Targets
Hybridization: Association of two complementary nucleic acid strands to
form double – stranded molecules, which can contain two DNA strands,
two RNA strands, or one DNA and one RNA strand
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Nucleic acid hybridization is a common approach for surveying gene
expression at the RNA level and can be used to provide whole genome
expression screens
Probe
Mismatches
Targets
Hybridization: Association of two complementary nucleic acid strands to
form double – stranded molecules, which can contain two DNA strands,
two RNA strands, or one DNA and one RNA strand
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Log[DNA]
Plateau
Lineare
Prodotto
variabile
Esponenzial
e
N°cicli
termici
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Termociclatori
Denaturazione del DNA
(94°C)
Ibridazione dei primers al bersaglio
(40°C – 60°C)
Sintesi del DNA
(72°C)
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Real Time PCR
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Biopsie
Analisi prenatale e Analisi preimpianto
Tracce di infezioni virali
Malattia mimima residua
Medicina forense
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There was a time when to amplify DNA,
You had to grow tons and tons of tiny cells.
Then along came a guy named Dr. Kary Mullis,
Said you can amplify in vitro just as well.
Just mix your template with a buffer and some primers,
Nucleotides and polymerases, too.
Denaturing, annealing and extending.
Well, it’s amazing what heating and cooling and heating will do.
PCR, when you need to detect mutations.
PCR, when you need to recombine.
PCR, when you need to find out who the daddy is.
PCR, when you need to solve a crime
http://www.youtube.com/watch?v=x5yPkxCLads
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