Dal DNA alle proteine Codoni dell’mRNA (9’) Ogni tripletta di basi (codone) specifica un aminoacido (o è un segnale di stop). Una proteina è una sequenza di amminoacidi. Vediamo ora attraverso quali passaggi si arriva a 0,34 nm 2 nm 3,4 nm sintetizzare una proteina partendo dal DNA. Il DNA è un doppio filamento avvolto ad elica, con un passo di 3,4 nm e distanza tra due basi di 0,34 nm visto che ci sono giusto 10 bp ogni giro (Watson e Crick, 1953), ma noi lo disegniamo dritto Le due emieliche hanno orientamento opposto: una va da 5’ a 3’ e l’altra da 3’ a 5’ . Solo uno dei due filamenti porta il codice genetico ed è detto filamento stampo. Coppia di basi (base peer, bp) 5’ Il filamento non codificante è usato solo durante la 5’ 5’ 3’ A C G A T G A A A T T G Forca di replicazione C 5’ Primer mRNA DNA elicasi Nucleolo G C T C A C A G A G 3’ T C T Ala A rRNA tRNA Pori nucleari fMet Arg Leu C G A fMet Arg Leu Ala Thr P fMet Leu Thr fMet Arg Leu Ala Arg Ala Amminoacido RNA di trasporto (o di trasduzione da nucleotidi ad amminoacidi) Anticodone Thr A Arg Leu Ala G A A G G C Proteina U fMet Leu CAA CAG Glutamina CGA CGG Arginina AUU AUC AUA AUG Isoleucina Metionina ACU ACC ACA ACG Treonina AAU AAC AAA AAG Asparagina Lisina AGU AGC AGA AGG Serina Arginina GUU GUC GUA GUG Valina GCU GCC GCA GCG Alanina GAU GAC UUA GAG Acido aspartico Glutamina GGU GGC GGA GGG Glicina G G C T A C T T T A A C fMet G C DNA polimerasi 3’ A 5’ Filamento di DNA non codificante G A G T A U G U C T C A G A G C T A C T T T A A C G C T C T U A C U U U A CCA CCG A CAU CAC Istidina G CGU CGC C G A G T C T C G A T G A A A T T G C G A G A A U G Poi la parte grande del ribosoma va a completare la parte piccola formando il complesso iniziale, nel quale verrà costruita la proteina. Sul ribosoma c’è una zona P e una zona A. Su queste due zone si posizionano due RNA di trasporto o tRNA, che sono i trasduttori dal linguaggio a nuclotidi a quello ad amminoacidi avendo da un lato un anticodone capace di riconoscere una tripletta e dall’altro lato l’amminoacido corrispondente a quella tripletta. La sintesi della proteina è detta traduzione e avviene così: una tRNA si posiziona in P (in genere a cominciare è una forma modificata di metionina detta f-metionina); quando sul sito A arriva una tRNA adatta, i due amminoacidi si legano tra loro e l’mRNA avanza di un passo portando in P ciò che prima era in A e liberando il tRNA che prima era in P. Poi si continua… 3’ Filamento stampo (codificante) di DNA Nucleo CUA CUG Prolina C T C A G A G C T A C T T T A A C G C T C T G La trascrizione inizia in un punto (origine della replicazione) con la separazione delle due eliche (la Y che 3’ si forma si chiama forca di replicazione) ad opera dell’enzima DNA elicasi che avanza lungo il DNA (la bolla è tenuta aperta da proteine destabilizzatrici e la tensione è allentata dagli enzimi topoisomerasi che tagliano e poi reincollano). Poi l’enzima DNA polimerasi accresce un nucleo originario di RNA (RNA primer) aggiungendo nucleosidi trifosfati al terminale 3’ (con perdita di due 5’ fosfati e sviluppo di energia). La trascrizione avviene dove c’è il DNA, cioè nel nucleo. L’mRNA esce da un poro nucleare e va a legarsi con la parte piccola di un ribosoma (che è composto da un secondo tipo di RNA, quello ribosomiale o rRNA, sintetizzato nel nucleolo). UGA UGG Stop Trp C 5’ UAA UAG Stop U U A G G G C U A A U C C A G A G G C U A U C G A C A G C C U C A U U A U U A U A A G G A C U U A A U G A C U G C A C U A C G A U G C C A A U U U G C C A C U U C A C U A A A A C U U A U A A G C G C G U G C G A G U G A G A G U G U U 3’ T La costruzione di una proteina comincia copiando il codice del DNA stampo sull’RNA messaggero (mRNA). Questa operazione passa da un linguaggio a nucleotidi ad un altro sempre a nucleotidi ed è perciò detta trascrizione. 3’ Serina A UAU UAC Tirosina G UGU UGC Cisteina C CCU CCC 3’ G A G T C T C G A T G A G UUA UUG Leucina UCA UCG Leucina T T T A A C G C T C T 3’ U C U U UUU UUC Fenilalanina C UCU UCC C U CUU CUC G A G T C T C G A T G A A A T T G C G A G A C duplicazione del DNA (che precede la duplicazione della cellula): i due filamenti si separano; i 2 filamenti mancanti sono sintetizzati, portando alla formazione di 2 DNA completi (ognuno con un filamento vecchio e uno nuovo) 5’ 5’ Ribosoma (costituito da 4 molecole di rRNA) L’mRNA trasporta l’informazione Il tRNA la traduce in amminoacidi L’rRNA del ribosoma assembla