Trainingper il SelfTestHIVMylan lntroduzione,epidemiologiae vie di trasmissione dellescimmie lf virusHfVprobabilmente emersetrail L92Oo e il 1930quandoilvirus dell'immunodeficienza (SlV)ha cambiatohost (organismo passando in Africa occidentale ospite) allaspecieumana dalloscimpanzé (Worobey2008).La trasmissione del SIVdallo scimpanzé all'uomosarebbeavvenutaquando,penetrando ad uccidere nellaforestatropicalein cercadi nuoveterre da coltivare,icacciatoriafricanicominciarono scimpanzé e ad utilizzarecome alimentola loro carne.È presumibile che il contattofra if sanguedí una scimmiae le ferite della cute dell'uomosia stato il meccanismo attraversoil quale il virus penetrato nell'organismo umanosi siamodificato e quindiadattatoal nuovoospite. (Zaire,ora Repubblica ll piùranticocampionedi sangueumano H|V-positivo è stato ritrovatoa Kinshasa Democratica di AIDSrisaleal 1981.Tra il mesedi del Congo)e risaleal 1959(Zhu1998).La primadescrizione a cinquegiovani ottobre del 1980 e maggiodel 1981,in tre diversiospedalidi LosAngelesin California, cariniichefino a quell'epocaera omosessuali venivadiagnostica una raraformadi polmoniteda Pneumocystis riconosciuta come malattiache colpivaprevalentemente bambiniaffetti da leucemialinfaticae soggetti sottopostia trapiantod'organo.Neglistessimesia New Yorke a SanFrancisco un raro tumore endoteliale (sarcomadi Kaposi)che colpisceprevalentemente soggettianziani,venivaanch'essodescrittoin giovani un quadro di omosessuali. Tutti i pazienti,sia con polmoniteche con sarcomadi Kaposipresentavano profondaed inspiegabile immunodepressione. Nel 1983nel laboratorio di virologiadell'lstitutoPasteurdi Parigie del NationalCancerInstitutedi Bethesda venivaisolatoper la primavoltadal sangueperiferico di un malatocon AIDSun retroviruscheavrebbepreso successivamente il nomedi HIV(humanimmunodeficiency virus). Si possonodistinguere due tipi di HIV:HIV-1e HIV-2.L'Hlv-Lè distribuitoin tutto il mondoed è responsabile in Africa della maggiorparte delle infezionidovute al virus. Invecel'HlV-2è confinato,principalmente e occidentale; casi più sporadicisono segnalatiin Spagna,Portogalloe Francia,in AmericaSettentrionale Meridionale scambiodi sangueinfettoe e in Corea.Entrambii tipi sonotrasmessi tramitecontattosessuale, dalla madre infettata al feto o al neonato,e sono agenti causalidi una sindromeda immunodeficienza acquisitaclinicamente identica.Tuttavia,la trasmissione di HIV-2sembraesseremeno efficienterispettoa q u e l l ad i H I V - 1 . OggiL'HlVrappresenta una minacciache riguardatutto il mondo,come testimonianole stime di UNAIDS aggiornate al 2015sullepersoneinfetteda HIV(fig.sotto) 2015 2010 Gbbal Asia and Pxific Eaetern and southern Africa Eastern Euope and central fuia L:tin Amerka and the Ceribbean Miridle Eart and North Afrke l3 3 million 1309 millron-3ó1 rnrllionl 4 / rnrllion [4|million-S5mrlton] 3ó 7 million {34 0 million-39 8 millioni 5 1 million 144 millioe5 9 rnillioni l/ 2 million l 1 ó 1 r n i l l r o n - ' 158m i l l i o n l lQ ù millioq [17 7 milliou20 5 millionl I 0 million [9500{'U-l l million] 1 5 million {1 4 million-1 7 millionl 1 Bmrllion I S m i l | o n2 1 m , l l i o n l 190000 | 150 Lr00-2400o0l [ 2 0 mrllioq /millrcn-23millicnl 230000 fl ó0000-330c0'll Westem ard <enFal Africe 6 3 million [52millron-77mrl[on] ó 5 mrllion [53mil|ron-78mrllionl Western end centrC Europe and NoÉh Arîerke 2 1 million ll 9 mrllion-23 millionl [2 2 millior2 2 4 million 7 rnillionl Epidemiologia in ltalia da HIVnel Diversetipologiedi indaginiepidemiologiche a delinearela dinamicadell'epidemia contribuiscono persone la con malattia nostro Paese:la sorveglianza dei casi di AIDS,che fornisceinformazionisulle conclamatae sui decessia essacorrelati;la sorveglianza delle nuove diagnosidi infezioneda HlV, che provvedea dare indicazioni persone attualmentel'infezionee, che contraggono sullecaratteristiche delle gruppidi popolazione infine,studidi prevalenza che fornisconouna fotografiasulladiffusione su particolari pervia iniettiva,donatoridi (donne gravidanza, dell'infezione da HIVin sottogruppi in consumatori di sostanze trasmessa, sangue,maschiche fannosessocon maschi,personecon una diagnosidi infezionesessualmente grosso un studio effettuato stranieri,carcerati)a diverso rischiodi contagio.Nel 201.2in ltalia è stato osservazionaletrasversale finalizzato a descrivere il profilo epidemiologico, socio-demografico, comportamentale, clinico,viroimmunologico dei pazienticon HlV. e terapeutico era in terapia fl numerototale di personeviventicon l'infezioneda HIVè stato pari a94.146;di queste,l'87,60/o antiretrovira le. La regionecon il numero maggioredi personeviventiinfette con l'HlV (siapersoneHIV positivesia persone (n. 9.655), (n. 29.508), affetteda AIDS)è statala Lombardia seguitadal Lazio(n.12.282)e dall'Emilia-Romagna mentrequellecon un numeroinferioresonostatela Valled'Aostae il Molise(n.L24e n.58, rispettivamente). e numerodi fn ftalia,nel2OL2,laprevalenza, calcolata comenumerototaledi personein caricoal numeratore USOINTERNO AD ESCLUSVO Mylan' Seeing is believing più bassa abitantiresidential denominatore, è statapari a 0,16 personeper 100 residenti.La prevalenza (figurasotto). (O,30%) stataregistrata in Molise(0,02%1, mentrequellapiù altain Lombardia Figura- Prevalenza dellepersoneviventicon l'HlVe con IAIDS (Der.|00residentii italiana.ll Delle94.L46personeviventicon HIVin ltalia,l7O,L%sonomaschiel'84,3%sonodi cittadinanza tra i50 ha un'età compresa 3,2%oha menodi 24anni,'l 63,5%ha un'etàcompresa tra i25 e i49 anni,tl 25,L% più frequenteè quellaeterosessua le (37,2%1, e i 59 anni e l'8,2%o ha più di 60 anni.Lamodalitàdi trasmissione per (lDU) con maschi che fanno sesso mentreiconsumatoridi sostanze via iniettiva sono 128,5%e i maschi (MSM)rappresenta no il 27,7%o. Perquantificare invecela quotadellepersoneinconsapevoli cioèHIVpositivema che non sono dell'infezione, possonoessereusativarimetodi,ognunodei ancorastatediagnosticate il lorosierostato e chenonconoscono quali porta a stimareuna diversaproporzione. pubblicatoha stimatoil numero Uno studiorecentemente soggettiinconsapevoli tra i 12.000e i L8.000casi.Cio portail numerototaledei soggetticon il dell'infezione virusHlV,consapevoli e non,intornoai 1.10.000 casiin ltalia. Vie ditrasmissione le secrezioni vaginali, qualiil sangue,il liquidospermatico, L'HlVè presentenei liquidibiologici dell'organismo, un fluido biologico contatto con il latte maternoe, in misuramolto limitata,la salivae il sudore.Pertanto,il tuttavia,varia secondola infetto può potenzialmente La probabilitàd'infezione, esserecausad'infezione. presente è tanto più il rischio d'infezione concentrazione nel fluidobiologico; di virus infatti,è evidenteche a un elevatoquantomaggioreè la caricavirale.Oltre allacaricavirale,esistonocomunquefattori associati maggiorerischiod'infezione,quali, per es., la presenzaconcomitantedi altre infezioni,ulceregenitali, sanguinamento e mestruazioni. Sulla base di questa conclusione, si può affermareche il virus viene principalmente trasmesso mediante: USOINTERNO AD ESCLUSVO Mylan' Seeing is believing (eterosessuale L. rapportisessualinon protetti con un partnersieropositivo o omosessuale) 2. condivisione di strumentiper iniezioni(es.siringhe) con un partnersieropositivo 3. trasmissione verticaleda madreHIV+al neonato(primadellanascitao duranteil parto;o successivamente, a causadell'allattamento al seno) per la maggiorparterappresentate rare. Tuttele altrevie di trasmissione, da casereport,sononotevolmente nei paesidovele donazioni di Tra questeci sonole trasmissioni a causadi trasfusioni di sangueo emoderivati per sanguenon sonoregolarmente sottopostia screening I'HlV. Estremamente rare sono le trasmissioni dovuteal contattocon sangueinfetto attraversoferite aperteo in cui la mucose,o la trasmissione di HIVdopo un morso(Bartholomew 2008).Tre casisonostati segnalati (Gaur2008).I grandicasemadri hannoinfettatoi loro neonatiprobabilmente tramite cibo pre-masticato quelloamericanodel CDC,che hannoindagatole altrevie di trasmissione dell'HlV, registries, in particolare di hannodimostrano chiaramente chei contattiquotidianidellavita di tutti i giorni,comead esempiol'utilizzo serviziigienicicomunio beredallostessobicchiere, non sonoin gradodi trasmettereI'HlV.I registridi casi effettuatiin ambitosanitario,che hannoanalizzato il contattodi saliva,urinao sangueinfettocon la pelle intatta,non hannorilevatounasolatrasmissione 1990). dell'HlV(Henderson USOINTERNO AD ESCLUSIVO Mylan' Seeing is believing Trainingper il SelfTestHIVMylan DIAGNOSTICA di anticorpispecifici(testdi screening), La diagnosidi infezionecronicada HIV-Lè basatasullarilevazione (testdi conferma). confermata da un test basatosu western-o immuno-blotting L'abitualetest HlV, effettuato dai laboratoridi analisi,è un test sierologicoimmunoenzimatico(ELISAo all'HlV gli anticorpiprodotticontrogli antigenivirali.Lasensibilità del test di screening MEIAo EIA):identifica positivo,deveessereconfermatoda un altro test basatosu WesternBlot (WB) superail99,9%.Un test ELISA esprimeconcertezza del virusnelsanguedi un individuo. che,se positivo, la presenza ll periododi formazionedegli anticorpianti-HlV(periodofinestra)può variareda un minimo di qualche pur risultando cheuna persona, settimanafino a 3 mesidopochesi è venutia contattocol virus.Ciosignifica e quindi gli anticorpi,può averegià contrattol'infezione negativaal test in quantonon ha ancorasviluppato puòtrasmettere il periodofinestra. ad altriil virus.ll test HIVva dunqueeseguitounavoltatrascorso la Oggiesistonotest combinati(COMBOTEST) che oltre a cercaregli anticorpirilevanocontemporaneamente presenza proteina,l'antigeneP24,checomparee aumentadi molto già dopo pochigiorni di una particolare l'avvenutocontatto.Per questotipo di test, il periodofinestrasi riduceulteriormentesino a 4/6 settimane. si lnoltrequestotipo di test può essereutilizzatonellefasiavanzatein cui la profondaimmunosoppressione accompagni alla possibileperditadegli anticorpi.Nei casi in cui non sia possibilebasarsisugli anticorpi che per la confermadi diagnosi. Tuttaviava considerato specifici, la rilevazione di acidinucleici vieneutilizzata test quantitatividisegnatiper il i test per la ricercadell'RNAviraledisponibiliin ltaliasono generalmente bassa.Quindi,in considerazione monitoraggio, non per la diagnosi, relativamente ed hannouna specificità positivi,il ricorsoroutinarioalladeterminazione HIVRNAper la diagnosi dellapossibilità di risultatifalsamente rimanendo "precoce"di infezioneda HIV in popolazionia bassaprevalenza e incidenzaè sconsigliato, in per Recentemente acuta/primaria. l'indicazione i a rischio sospetta infezione solo casidi esposizione e di ma il Italiasi sonoresidisponibili di HlV,approvatiper la diagnosi, test qualitativiper la rìcercadi acidinucleici loroutilizzoè ancoralimitato. degliacidi I test di confermacon westerno immuno-blotting, comeanchela rilevazione quelle di distinguere le infezioni da HIV-Lda da HIV-2. permettono ITESTRAPIDI ll test di screeningsalivare Da qualcheanno è disponibileun test a rispostarapida per anticorpianti-HlV-1/2,basatosu tecnica e di immunocromatografica, che consentedi averei risultatiin 20 minuti,Questotest, di terzagenerazione e HIV-2nellasaliva.ll test è tipo qualitativo, funzionarilevandola presenza di anticorpilgGe lgM anti-HlV-1 superiore sullearcategengivali costituitoda un supportosolidomonousocon una palettasterileda applicarsi proteina (peptidi Dopo Envelope). inferiore ed un'areadi reazionecontenenteantigeniHIV-1./2 della e lungo del fluidogengivale l'applicazione la palettavieneimmersain una soluzione checonsentela migrazione presenza il riconoscimento di anticorpianti-HlV, il supportosolidoverso l'area di reazione.In caso di viraledeterminaun complesso evidenziato dell'antigene come barrarossanellazonaT (Test).Una seconda in indicache il test è avvenutocorrettamente banda,che si devesempreformarenellazonaC (Controllo), quantosonostatievidenziati gli anticorpitotalicontenutinellasaliva. quandocomparesolo la bandanellazonaC. Significa che non ci sono ll test è NON REATTIVO o NEGATIVO anticorpicontrol'HlVnellasaliva. quandocompaionodue bandenellezoneT e C. Significa che sono presenti ll test è REATTIVO o POSITIVO anticorpicontro l'HlV nella salivache possonoindicarelo stato di infezioneda HlV. Per la diagnosi dell'infezioneè comunquerichiestoun test sul sanguecon metodicheEIISAe WesternBlot. gli anticorpi quandonon comparenessunabanda.Significa che non sonostati evidenziati ll test è INVALIDO del kit. In questo dellasalivaper una incorrettaapplicazione dellapalettao per un mancatofunzionamento casoil test su salivava ripetuto. ll test su salivaè sicuramenteaffidabile,ma ha una sensibilitàleggermenteinferiorerispettoal test da tradizionale sul sangue.Inoltrenon è un test quantitativoe la sua attendibilitàpuò essereinfluenzata particolari condizioni di secchezza del cavooraleo dall'averassuntocibio liquidinegliultimiL5 minuti. AUTOTESTMYTAN L'autotestHIV Mylan è un esame di rapido orientamentodiagnostico.Viene venduto come test singolo, soggettivo, di letturavisivae facileda usaree fornisceun risultatoveloce(in menodi 20 minuti).Deveessere impiegatocon un campionedi sanguecapillareappenaprelevato. È in gradodi rilevaregli anticorpisia antidefinitivose il rischiodi esposizione HIV-1che anti-HlV-2. Un risultatonegativonon può essereconsiderato piir recentead HIV risalea meno di tre mesiprima(periodofinestra),Un risultatopositivoottenutocon un test rapidodeve esserecomunqueconfermatoda un esamedi laboratorio(TestElisadi lV generazione Combotest). Non esisteun auto-testper l'HlV che sia affidabileal 7OO%. ottenererisultatifalsi positivi(un E' possibile come positivodal test) o campionerisultatonegativoper il marcatoretarget ma classificato erroneamente come erroneamente falsi negativi(un campionerisultatopositivoper il marcatoretarget ma classificato USOINTERNO MATERIALE ESCLUSIVO Mylan' Seeing is believing negativodal test). ll mancatorispettodelle regoledi conservazione e delle istruzionid'impiegopossono contribuire a far sìcheil risultatoottenutonon siacorretto. gli auto-testper l'HlV sono meno sensibilinel Rispettoagli esamidi laboratorio(Elisa- lV generazione), rilevamento dellenuoveinfezioni(infezioni avvenutenegliultimitre mesi).Infatti,alcunimarcatoricompaiono più tardi nel corso dell'infezione da HlV. I ritardi delle prime positivitàpossonovariarea secondadel (chesi riferisceal periododi HIV@ marcatoretargete del metodoutilizzato. ll periodofinestradell'autotest da essererilevabilida parte tempo necessario affinchési sviluppino anticorpianti-HlVin quantitàsufficiente affidabilesoltanto del test)può durarefino a tre mesi.Pertanto,un risultatonegativopuò essereconsiderato m e s i. n e lc a s oi n c u in o ns i s i av e r i f i c a troi s c h i o d i e s p o s i z i o naed H I Vn e l l ' a r cdoe g l u i ltimitre 2051 la sensibilità Perverificare e la specificità deltest sonostatieffettuatistudisu 503 persone(sensibilità)e 100% con persone(specificità) calcolata al è stata negliStatiUnitie nell'Unione Europea. Lasensibilità deltest all'HlVinclusinellostudiohanno da 99,I%ó a tOO%.Tutti i soggettisieropositivi un intervallodi confidenza al del test è statacalcolata falsinegativi. Laspecificità ottenutoun risultatocorretto.Non sonostatiosservati ha ottenutoun risultato 99,8%conun intervallodiconfidenza dal99,5alt00%.0,2%deisoggettisieronegativi positivi. errato,cioèlo 0,2%deirisultatieranofalsi dell'autotestHIV@da parte di personesenzacompetenzemediche Uno studio di fattibilitàsull'utilizzo il test e ha ottenutoun ha dimostratocheoltreil 99,2%dei partecipanti ha utilizzato correttamente specifiche risultatointerpretabilee oltre 198,I% lo ha interpretatocorrettamente.I risultatipositivisono stati correttamente nel 100%dei casi. interpretati Contenutodel KIT: iv - ido 5ac(hetto assofbente di umidita' r (da elknMe) o 3i3iilÍ",',.O roòé oo::: o:n -*-J della suDDorto próúerra @ Salvielltnò a drsrnletlànle!r, fÉ * L carza sterile Q USOINTERNO ESCLUSIVO MATERIALE Mylan' St'etng i s r' r : l i e v i n g Comesi esegue: FASE1 piana il supportodellaprovetta(G)su unasuperficie 1.. Appoggiare 2. Tiraredelicatamente iltappocontenente la soluzione tampone(C)per separarlo dal dispositivo di test (B) 3. Farloscivolare con un dito in fondoal supportodellaprovetta(G) FASE2 7. Lavarsile mani, preferibilmente con acqua calda,e asciugarle. 2. Aprirei sacchetticontenentila salviettina disinfettante ( H )e l a g a r z as t e r i l e( t ) . (H)sullapuntadel 3. Strofinarela salviettina disinfettante dito e aspettare chesi asciughi. Seeing is believing 4 . Togliereil cappuccio (D).Appoggiare trasparente dal bisturidi sicurezza l'estremitàrossadel bisturi sullapuntadel dito e spingere condecisione versoil bassoper perforarela cuteconl'ago. 5 . Stringeredelicatamente il dito per formareuna primagocciagrandedi sangue.Rimuovere la goccia con la garzasterile(l). 6. Senzapremeretroppo,stringeredelicatamente il dito ancorauna voltaper formareun'altragocciadi sanguegrande. 7. Conil dispositivo di test (B)direttoversoil bassocomeindicato quanrtadidi lato (angolodi90'), toccarela gocciadi sanguecon la punta necessarrasangue quando punta del dispositivofino a l'estremità a si sarà riempitadi sangue. FASE3 L. Tenendoil dispositivo di test (B) con la puntaversoíl basso, inserirlosaldamente nel supporto(G)in modo da perforarela m e m b r a n da i a l l u m i n i do e lt a p p od e l l as o l u z i o nt ea m p o n e( C ) 2. Verificarela comparsadi una macchia rosa che dovrebbe cominciarea esserevisibilemeno di un minuto dopo che il dispositivo ditest e iltappo con la soluzione sonostatiinseriti l'unonell'altro. 3. Applicare il cerotto(E)al dito. Sela macchiarosanoncompareentroun minuto,spingere con (B) per inserirlo maggiordecisionesul dispositivodi test completamente. ll dispositivo di test deveesseretenutodritto fino al completamento dellaFase4. CONDT(ISIONE SPINGERE VERSO lt EASSO r.0stNTrRtItt(AlTARt3 Votrt I T tl Ma(fl[a f(Iiit ii *À FASE4 USOINTERNO ESCLUSIVO MATERIALE Mylan' Seeing is believing 1. Controllare iltempoe aspettare15 minutiprimadi leggereil risultato. Non attenderepiù di 20 minuti per leggereil risultato FASE5 Letturadel risultato (Negativo):Comparsadi L riga: riga di AUTO-TEST NON REATTIVO controllo.Questarigapuòesserechiarao scura AUTO-TESTREATTIVO(Positivo): Comparsadi 2 righe: riga di controlloe rigadi test.Ledue righepossonoesserel'unapiù chiarao piirscuradell'altra. +-t0irikul"t0-+ {- lf \l -} riga,o soltanto il risultatoè invalido(nessuna Seil risultatonon assomiglia a nessuno degliesempiprecedenti, possibile da trarre conclusioni Non riga,la funzionato. è I rigadel test),Questosignificache il test non ha questorisultatoe sarànecessarìo ripetereil test. I NTERPRETAZION E DEL RISUTTATODELL'AUTOTEST MYLAN TESTNEGATIVO. Se il risultatoè negativoe non sono avvenutepratichea rischioo esposizioniaccidentali eseguireun negliultimitre mesi,significache la personache ha usatoiltest non è infetta.Non è necessario USOINTERNO ESCLUSIVO MATERIALE Mylan' Seeing is believing qualcheerrorenell'esecuzione esamedi laboratorio di conferma, a menoche non si ritengadi avercommesso del test o di averneinterpretato il risultatoin manierasbagliata. Se il risultatoè negativoma negliultimitre mesisonostatesvoltepratichea rischiodi esposizione ad HlV,il pertantodi sottoporsia risultatodeltest non è considerato affidabile a causadel periodofinestra.Siconsiglia (Combotest). puo un test Elisadi lV generazione HIV falso negativonei soggetti ll risultatodell'autotest essere con infezioneda HIVche assumonola terapiaantiretrovirale e con caricaviralenon rilevabile. Questopuò produzione replicazione virale esseredovutoal calo della di anticorpianti-HlVcausatodall'inibizione della indottadallaterapiaantiretrovirale. L'autotestHIVnon deveessereutilizzato su soggettiin trattamentocon antiretrovi ralipercontrollarel'efficacia dellaterapia. TESTPOSITIVO. Un risultatopositivosignificache il soggettoè probabilmenteHIVpositivo,non significa necessariamente HIVinfatti cheuna personaabbiacontrattol'infezione da HlV.Tuttii risultatidell'autotest pressoun laboratorio Seil risultato devonoessereconfermatimediantetest Elisadi lV generazione di analisi. dell'auto-test è positivo, è essenziale consultiil medicoo un centroper la gestionedell'HlV.È cheil paziente per non infettareil propriopartner. inoltreessenziale cheil soggettoprendafin da subitole precauzioni USOINTERNO ESCLUSIVO MATERIALE Mylan' Seeing is believing