Osservazioni al microscopio ottico e a fluorescenza di cellule e
tessuti
JC-1
•MTS
Saggio di vitalità
cellulare colorimetrico
che sfrutta la riduzione
del composto mts,
attraverso enzimi
presenti nelle cellule
vive. Questo comporta
la formazione di un
prodotto colorato la cui
intensità è proporzionale
alla concentrazione di
cellule vitali.
•MTS
Saggio trypan blue
Cellula
morta
Saggio per valutare la
differenza fra cellule
vive e cellule
morte, in quanto il
colorante (trypan blue)
penetra esclusivamente
nelle cellule morte che
hanno la membrana
sfaldata.
•Sezioni di cervello di topo
Colorazione dei nuclei in
sezioni di cervello di topo
con ematossilina che da ai
nuclei una colorazione più
intensa ed eosina che
colora con una gradazione
minore il citoplasma.
Realizzato da :
- Francesco Lipani
- Daniele Rubino
controllo
H2O2
Attraverso la visione al microscopio
a fluorescenza notiamo come le cellule
vengano danneggiate dopo un trattamento
con acqua ossigenata per 20 minuti.
Le cellule non trattate hanno una
colorazione rossa (controllo), al contrario
di quelle trattare con H2O2 che
acquisiscono la sonda JC-1 assumendo
una colorazione verde. Ciò avviene
perché l’acqua ossigenata produce stress
ossidativo sulle cellule invertendo il
potenziale di membrana, aprendo i pori
del mitocondrio permettendo l’ingresso
JC-1
•Hoechst
Dopo lo stress ossidativo
indotto dall’esposizione delle cellule
ad H2O2. Le cellule vengono fissate
e poi trattate con Hoechst che
mostra
la differenza di forma
tra i nuclei sani e i nuclei
danneggiati, i quali risultano
condensati
in seguito a un processo di morte
cellulare.
Cellule non
trattate
Cellule
trattate
