Biotecnologie Riproduttive
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Biotecnologie Riproduttive: Transgenesi e Clonazione animale Corrado Spadafora Istituto Superiore di Sanità, Rome Pietre miliari nella transgenesi 1974: R. Jaenisch and B. Mintz: “Simian Virus 40 sequences in DNA of healthy adult mice derived from preimplantation blastocyst injected with viral DNA”. PNAS 71, 1250-54 1980: Gordon JW et al.: “Genetic transformation of mouse embryo by microinjection of purified DNA” PNAS 77, 7380-84 1981: Gordon JW and Ruddle FH “Integration and stable germ line transmission of genes injected in mouse pronuclei ” Science 214, 1244-46 Requisiti di un animale transgenico Il transgene deve essere: -integrato in ogni sua singola cellula (non deve essere distribuito a ’’mosaico’’ -correttamente espresso nelle cellule bersaglio -capace di indurre modificazioni fenotipiche nelle cellule in cui è espresso -trasmesso dagli animali fondatori alla progenie in modo mendeliano -biologicamente attivo nelle generazioni successsive Costruzione di topi transgenici mediante microiniezione di DNA Costruzione di topi transgenici mediante vettori retrovirali Costruzione di topi transgenici con cellule staminali (ES) geneticamente manipolate Costruzione di topi transgenici mediante trasferimento nucleare Gli spermatozoi maturi di topo internalizzano molecole di DNA esogeno DAPI FISH Acrosome Nucleus Merge Transgenesi mediata da spermatozoi TransgenICSI Testis-mediated gene transfer Knock-out genico mediante ricombinazione omologa Neoplastic diseases Neurological and neuromuscular disorders Immunological and haematological disorders Diseases of bone, skin and connective tissue Metabolic and hormomonal diseases Animali transgenici come bioreattori Produzione di proteine biologicamente secrezione nei fluidi corporei: 9 Latte 9 sangue 9 urine attive e loro Animali transgenici come bioreattori Produzione di emoglobina umana in maiali transgenici, ottenuti microiniettando geni D e E umani nel pronucleo dello zigote: la globina prodotta nel maiale è indistinguibile da quella umana Produzione di hGH nella vescica di topi transgenici e rilascio nell’urina. Si utilizza un costrutto in cui il gene per hGH è controllato dal promotore del gene per le uroplachine, un gruppo di proteine espresse selettivamente nell’epitelio vescicale Clonazione di una pecora mediante trasferimento nucleare
![mutazioni genetiche [al DNA] effetti evolutivi [fetali] effetti tardivi](http://s1.studylibit.com/store/data/004205334_1-d8ada56ee9f5184276979f04a9a248a9-300x300.png)
