Biologia Molecolare ed Eredità (Biologia) Genetica e Tecniche

Biologia Molecolare ed Eredità (Biologia)
Genetica e Tecniche Biomolecolari in Campo Alimentare (Biologia della Nutrizione)
Cenni storici. Il DNA come materiale genetico (esp. Griffith, Avery e Hershey/Chase).
Modello di Watson e Crick della struttura del DNA.
Struttura del DNA, tautomerizzazione ed ionizzazione della basi, forme alternative A, B, Z.
Parametri per definire variazioni locali della struttura del DNA. Denaturazione del DNA ed effetto
ipocromico.
Struttura dell'RNA. Il supeavvolgimento del DNA (concetti generali, superavvolgimento positivo e
negativo, il numero di legame, tecniche per lo studio del superavvoligimento).
Chimica della sintesi del DNA, modelli per la replicazione del DNA ed esperimento di Meselson e
Stahl. Polimerasi I , II e III di E. coli e loro meccanismo d'azione (sito catalitico). Proteine associate
al DNA (primasi, elicasi, topoisomerasi, SSB, DNA polimerasi) e ruolo di queste nella replicazione
del DNA in E. coli. Origini di replicazione (oriC di E. coli e ARS di lievito). Replicazione di
ColE1, D-loop e Rolling Circle. Metilazione del DNA e replicazione. Replicazione del DNA nel
lievito (ruolo delle proteine ORC, Cdc6, Cdt1, Mcm2-7, CdK e Ddk).
Esperimenti di K. Mullis, meccanismo della PCR, la Taq polimerasi, scelta dei primers e specificità
della PCR. Principali applicazioni della PCR.
Il codice genetico (generalità), esperimenti che hanno portato alla delucidazione del codice (esp. di
Nirenberg), uso del codice, le aminoacil-tRNA sintetasi, mutazioni missenso, nonsenso e
frameshift, tRNA soppressori.
La Trascrizione (generalità), promotori batterici ed eucariotici, tecniche quali Primer extension e
footprinting, la RNA polimerasi batterica. Il fattore sigma 70 e fattori alternativi. Elongazione e
terminazione della trascrizione (terminatori intrinseci e Rho dipendenti). Mutazioni polari.
Introduzione allo splicing (cenni storici, generalità, il paradosso C). Il rimescolamento degli esoni e
teorie evolutive, la chimica dello splicing, lo spliceosoma (fattori, reazione e affidabilità dello
splicing), introni del gruppo I e II, splicing alternativo costitutivo e regolato.
Principali tecniche del DNA ricombinante (solo Biol. Mol. ed Ered.)