CURRICULUM VITAE ET STUDIORUM RITA PULIMENO ________________________________________________________________________________ ESPERIENZE PROFESSIONALI Da 04/2007 Collaboratrice professionale presso l’azienda di ricerca Biotecgen S.r.l. 01/2004-01/2006 Vincitrice di una Borsa di studio presso il Laboratorio di Microbiologia Molecolare e Biotecnologie (LA.M.M.B.), Dipartimento di Biologia Molecolare, Università degli Studi di Siena. Il progetto della borsa prevedeva lo studio dell’espressione dei recettori Toll-like in cellule THP1 stimolate con cellule di Streptococcus gordonii. 2004 Membro effettivo del comitato per la didattica del nuovo ordinamento, Corso di Laurea Specialistica interfacoltà in Biotecnologie per la salute umana, Università degli Studi di Siena. 2002 Internato presso il Laboratorio di Microbiologia Molecolare e Biotecnologie (LA.M.M.B.), Dipartimento di Biologia Molecolare, Università degli Studi di Siena. ISTRUZIONE E FORMAZIONE 01/2007-03/2007 Tirocinio teorico-pratico presso il Laboratorio Analisi Cliniche “Bioclinical”. Il progetto del tirocinio prevedeva l’approfondimento di analisi cliniche. 2006 Abilitazione all’esercizio della professione di Biologo. 05/2006-07/2006 Tirocino pratico presso il Laboratorio analisi “Ce.T.R.A.”. Il progetto del tirocinio prevedeva l’approfondimento di analisi HACCP 2005 1 Laurea specialistica in Biotecnologie per la salute umana, curriculum farmaceutico, conseguita presso l’Università degli Studi di Siena, titolo della discussione: “Analisi dell’espressione genica dei recettori “Toll-like” tramite PCR “Real-Time” quantitativa”, con la votazione di 110/110 e lode. 03/2003-09/2003 Tirocinio teorico-pratico presso il Dipartimento di Scienze e Tecnologie Biologiche ed Ambientali, Università degli Studi di Lecce. Il progetto del tirocinio prevedeva l’analisi molecolare del gene rpoB in ceppi di Actinomadura. 2002 Laurea triennale in Biotecnologie conseguita presso l’Università degli Studi di Siena, discutendo la tesi dal titolo: “Metodi per la manipolazione genetica dello Streptococcus pneumoniae”, con la votazione di 107/110. 1998 Diploma di Maturità Professionale di Tecnico Chimico-Biologico conseguito presso l’Istituto Professionale per l’Industria e l’Artigianato “G. Martinez” di Galatina, con punteggio 45/60. COMPETENZE TECNICHE Manipolazione genetica di ceppi batterici patogeni. Mutagenesi di ceppi virulenti e quindi capsulati di Streptococcus pneumoniae mediante PCR e trasformazione. Produzione di costrutti genetici per la delezione, la sostituzione (anche singoli nucleotidi) e la fusione genica, tramite PCR gene SOEing (gene splicing by overlap extension). Trasformazione in vitro di cellule pre-competenti, stimolate con CSP (competence stimulating peptide) sintetici, utilizzando i DNA lineari ottenuti tramite PCR gene SOEing. Selezione dei ceppi ricombinanti attraverso PCR. Modelli di infezione murina. Inoculo intranasale (modello di polmonite) di Streptococcus pneumoniae e relativi mutanti isogenici, in topi outbred MF1 e inbred CBA/Jico. Valutazione del quadro clinico, della situazione istopatologica e della conta batterica negli organi infettati. Caratterizzazione di elementi genetici. 2 Caratterizzazione di elementi genetici, veicolanti geni di resistenza antibiotica, tramite sequenziamento; caratterizzazione dei loro siti di integrazione nel cromosoma batterico tramite PCR inversa. Studio della trasferibilità degli elementi attraverso esperimenti di trasformazione e coniugazione in vitro. Mutagenesi degli elementi genetici previo trasferimento in Streptococcus pneumoniae. Colture cellulari. Colture di linee cellulari in sospensione (THP1) e in adesione (HeLa). Colture primarie di cellule prelevate da organi linfoidi di topo. Stimolazione di cellule con batteri patogeni e non quali lo Streptococcus gordonii, lo Staphilococcus aureus, l’Escherichia coli, lo Streptococcus pneumoniae. Purificazione dell’mRNA e Real Time PCR quantitativa Purificazione dell’mRNA da colture cellulari previa stimolazione con diverse concentrazioni batteriche. Purificazione dell’mRNA da organi (polmone e milza) prelevati da topi infettati. Quantificazione dell’mRNA di geni di interesse tramite RT-PCR "Real-Time" con gli strumenti LIGHT CYCLER e OPTICON. Analisi HACCP Analisi chimica delle acque tramite tecniche di titolazione e utilizzo di fotometro a fiamma e spettrofotometro. Analisi chimica degli alimenti per la valutazione dei valori nutrizionali. Analisi batteriologica di alimenti e acque tramite l’utilizzo di terreni selettivi. PUBBLICAZIONI ED ABSTRACT? Vigliotta G, Tredici SM, Damiano F, Montinaro MR, Pulimeno R, Di Summa R, Massardo DR, Gnoni GV, Alifano P. Natural merodiploidy involving duplicated rpoB alleles affects secondary metabolism in a producer actinomycete. Mol Microbiol. 2005 Jan; 55(2):396-412. Ciabattini A, Cuppone AM, Pulimento R, Iannelli F, Pozzi G, Medaglioni D. Stimulation of Human Monocytes with the Gram-Positive Vaccine Vector Streptococcus gordonii. Clinical and Vaccine Immunology. 2006 Sept; 13(9):1037–1043. Vigliotta G, Tredici SM, Damiano F, Montinaro MR, Pulimeno R, Di Summa R, Massardo DR, Gnoni GV, Alifano P. Natural merodiploidy involving duplicated rpoB alleles affects secondary metabolism in a producer actinomycete. Congresso Cortona Procarioti, 31/03/2005-1/04/2005. 3 CONGRESSI 2002 Decimo Congresso Nazionale SIMMOC, Siena, 19-21/06/2002. 2004 Symposium “ Immuno Responses in Inflamed Tissue”, Miltenyi Biotec, Centro Ricerche CHIRON, Siena 5/11/2004. 2004 Convegno “Cortona procarioti”, Cortona, 31/03/2005-1/04/2005. 4