Monociti plasmacitoidi/cellule dendritiche plasmacitoidi. Cellule del
annuncio pubblicitario
© Springer-Verlag 2002 Pathologica (2002) 94:163-175 EDITORIALE F. Facchetti · W. Vermi Monociti plasmacitoidi/cellule dendritiche plasmacitoidi. Cellule del sistema immunitario a ponte fra l’immunità innata e l’immunità acquisita Plasmacytoid monocytes and dendritic cells link innate and acquired immunity Riassunto I monociti plasmacitoidi (PM), originariamente descritti dai patologi come cellule localizzate nell’area interfollicolare dei linfonodi umani, rappresentano una popolazione cellulare emergente nel panorama del sistema immunitario. I PM circolano tra sangue periferico, organi linfoidi e siti effettori dell’infiammazione, utilizzando meccanismi di migrazione specifici; essi risultano facilmente riconoscibili sulla base delle caratteristiche morfologiche e di un fenotipo distintivo (CD3–, CD11c–, CD14–, CD20–, CD36+, CD56–, CD68+, CD123+, BDCA2+). Recentemente, è stato dimostrato che i PM producono elevate quantità di interferone di tipo I e corrispondono alle cellule “naturalmente” produttrici di interferone nell’organismo umano (natural interferon producing cells), già da tempo note. In aggiunta, i PM o i loro precursori si possono differenziare in vitro in cellule dendritiche, suggerendo una loro partecipazione nella stimolazione T-linfoide antigene-specifica. Globalmente, questi dati suggeriscono un rilevante ruolo dei PM nel sistema immunitario, come cellule poste a ponte fra l’immunità innata e quella adattativa. I PM sembrano infatti essere cruciali nella patogenesi di differenti malattie umane immuno-mediate, quali infezioni virali e disordini autoimmuni, e sono coinvolti nel controllo immunologico di alcuni tumori. Il dibattito relativo alla linea d’origine dei PM rimane ancora irrisolto, sebbene la frequente associazione fra espansioni simil-tumorali di PM e leucemie mielo-monocitiche, nonché la dimostrata identità citogenetica fra le due popolazioni cellulari in alcuni casi, sembrano avvalorare un più stretto rapporto dei PM con la linea mieloide. F. Facchetti () • W. Vermi Servizio di Anatomia Patologica 2, Spedali Civili, Università degli Studi di Brescia, I-25124 Brescia e-mail: [email protected] Tel.: +39-030-3995426 Fax: +39-030-3995053 Parole chiave Plasmacitoide • Monocita • Dendritica • Immunità • Interferone Key words Plasmacytoid • Monocyte • Dendritic cell • Immunity • Interferon Premessa Nel 1958, Lennert identifica una nuova cellula nei linfonodi umani che definisce “linfoblasto” [1]. Negli anni successivi, tale cellula è oggetto di studio da parte di ematopatologi, che ne caratterizzano estensivamente gli aspetti morfologici e fenotipici, documentano il suo coinvolgimento in alcune condizioni patologiche, senza tuttavia riuscire a svelarne in forma sostanziale le funzioni, né a identificarne definitivamente la linea di appartenenza. Ne è testimonianza la varietà di termini che via via vengono utilizzati per identificarla, quali plasmacellula T-associata [2], cellula T plasmacitoide [3, 4], cellula plasmacitoide della zona T [5] e monocita plasmacitoide [6]. Dalla seconda metà degli anni ’90, diversi laboratori di immunologia e di immunopatologia hanno rivolto una particolare attenzione a questa popolazione cellulare, da loro precedentemente ignorata. I risultati di questi studi hanno portato alla identificazione di aspetti funzionali estremamente interessanti, sintetizzabili nella capacità di produrre alti livelli di interferone alfa e nella potenzialità differenziativa in cellule dendritiche. Il “linfoblasto” di Lennert ha così iniziato a svelare il suo volto enigmatico e il suo possibile ruolo in diverse importanti condizioni patologiche umane. Nei paragrafi che seguono verranno illustrati gli aspetti più rilevanti di questa popolazione cellulare, che d’ora in avanti definiremo con il doppio acronimo PM (plasmacytoid monocyte) e PDC (plasmacytoid dendritic cell), in relazione alla terminologia correntemente utilizzata rispettivamente in ambito ematopatologico e immunologico. 164 F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi PM/PDC: identificazione di un “nuovo” elemento cellulare nell’ambito del sistema immunitario Nei tessuti i PM/PDC mostrano peculiari caratteristiche morfologiche [1, 3, 7-9] e fenotipiche (Tab. 1) [6, 10-15] che ne facilitano l’identificazione: si caratterizzano per una taglia lievemente superiore a quella di un linfocito, mostrano citoplasma relativamente ampio e ben demarcato, eosinofilo su preparati colorati con ematossilina-eosina e debolmente basofilo con Giemsa. Il nucleo appare tondo o ovale, talora indentato, centrale o lievemente eccentrico, con cromatina finemente distribuita associata ad uno o due piccoli nucleoli (Fig. 1a, b). I PM/PDC si possono osservare sia come elementi singoli e sparsi che come aggregati nodulari: in questo caso la presenza di corpi apoptotici e di macrofagi con corpi tingibili è tipica e l’insieme può simulare un centro germinativo. La caratteristica ultrastrutturale che giustifica pienamente l’attributo “plasmacitoide” è costituita da un ricco ergastoplasma, con cisterne non dilatate, distribuite parallelamente alla membrana plasmatica [7, 8, 16]. I PM/PDC sono presenti in tutti gli organi linfoidi primari e secondari. Nel timo la presenza di PM/PDC è stata solo recentemente evidenziata; essi si localizzano prevalentemente nella midollare in stretta associazione con popolazioni di cellule dendritiche interdigitate [17, 18]. Vari Autori hanno dimostrato la presenza di precursori di PM/PDC nel midollo osseo, dove essi rappresentano una minima frazione (0.8%) delle cellule non mature [19-21]. Dal midollo osseo, i PM/PDC (o precursori) possono essere mobilizzati nel sangue periferico, utilizzando G-CSF e Flt3 [22-24]. In condi- Tabella 1 Fenotipo dei PM/PDC Marcatori Cluster di differenziazione CD1 CD2 CD3 CD4 CD5 CD7 CD8 CD10 CD11a CD11b CD11c CD13 CD14 CD15 CD16 CD19 CD20 CD21 CD23 CD25 CD27 CD28 CD30 CD31 CD32 CD33 CD34 CD35 CD36 ° CD38 CD40 CD43 CD44 PM/PDC – – (+)1 – + – (+)1 – (+)1 – – + – – (+)2 – (+)2 – – (+)3 – – – – – – – – – + +6 – (+)2 – – + – + + + Marcatori PM/PDC CD45RA CD45RB CD45R0 CD49e CD56 CD57 CD62L CD64 CD65 CD68 °° CD71 CD74 CD80 CD83 CD86 CD95 CD103 CD123 ° CD125 CD128 CDw150 CD161 CD162 CD206 CD207 CD208 CD209 + + Recettori per chemochine CXCR1 CXCR2 CXCR3 CXCR4 CXCR5 – 4+ 6 – (+)1 – 4+ 4 – – Marcatori CCR1 CCR2 CCR3 CCR4 CCR5 CCR6 CCR7 PM/PDC –/+ 6 4 4+ 6 4– 6 –/+ 6 4 4+ 6 – 4 6 4+ 6 4 6 4 6 + + + – – 4–/+ 4 4–/+ 6 – + – Toll-like receptor TLR1 TLR2 TLR3 TLR4 TLR5 TLR6 TLR7 TLR8 TLR9 + – – – – – + – + 4 6 4+ 6 – 4– 6 4 6 4+ 6 – – 4– 5 4– 5 4 5 4 5 4 4– 6 –/+ 6 4+ 6 4+ 6 – 4 6 Miscellanea BDCA2 ° + CLA/Heca452 °° + 4+ 6 E-caderina Elastasi – 4+ 6 FceRI HLA-ABC + HLADR + HLADP + HLADQ + Lisozima – LAT (linker for activation of T cells) – Mieloperossidasi – TCR-AB – TCR-GD – I dati sono in primo luogo riferiti a studi in situ pubblicati [10-11, 15] e osservazioni personali non pubblicate. I marcatori seguiti dal simbolo °/°° sono particolarmente utili per l’identificazione di PM/PDC su tessuti congelati (°) o inclusi in paraffina (°°). +, positivo; –, negativo; –/+, bassa espressione; 1 positività in una frazione (sottopopolazione?) di PM/PDC, non confermata su tessuto; 2 espressione minima, specie riscontrata dopo differenziazione in vitro; 3 positività dopo digestione con neuraminidasi; 4 di membrana in PM/PDC circolanti, citoplasmatica in PM/PDC tissutali; 5 CD206, 207, 208 e 209 riconoscono rispettivamente antigeni di sottopopolazioni di cellule dendritiche rappresentati da recettore del mannosio, langerina, DCLAMP e DCSIGN; 6 dati riportati da Galibert [15], ma non testati in studi in situ F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi a 165 b Fig. 1a, b Aspetti morfologici dei PM/PDC in un linfonodo reattivo. Le sezioni sono colorate con ematossilina-eosina e mostrano diversi aggregati di PM/PDC (asterischi) nel parenchima linfonodale, dove è anche presente un follicolo secondario (CG); il dettaglio citologico dei PM/PDC è mostrato in b: si notino i numerosi corpi apoptotici, che sono spesso presenti negli aggregati zioni normali, PM/PDC circolanti [19, 25-29] rappresentano una minima percentuale delle cellule mononucleate (sempre inferiore all’1%). La loro identificazione si basa sull’assenza di marcatori di linea cellulare specifica (lin–), quali CD3, CD19, CD20, CD11c, CD14, CD16 e CD56, e sulla espressione di alcuni altri marcatori che ne facilitano la selezione positiva (CD4, HLADR, ILT3, CD62L, BDCA2, CD68, CD123). La sede naturale dei PM/PDC è rappresentata dai linfonodi periferici, dove occupano l’area interposta ai noduli T e l’area interfollicolare. In questa sede, essi sono sempre in stretta vicinanza con le venule epitelioidi (HEV) [7, 30] e contraggono stretto contatto con diverse popolazioni linfoidi T e B, nonché con cellule dendritiche immature e mature (cellule dendritiche interdigitate), costantemente presenti in quelle aree. Riconoscibili in quantità molto variabili in tutti i linfonodi, i PM/PDC sono particolarmente abbondanti in quelli superficiali di individui giovani [7], specie in condizioni di iperplasia corticale e/o paracorticale; possono essere estremamente numerosi nelle tonsille palatine e faringee, soprattutto in campioni ottenuti durante le stagioni fredde (osservazione personale). I PM/PDC sono stati identificati anche in linfonodi fetali [19], così come nel sangue da cordone ombelicale [28, 31]. È interessante osservare che accumuli di queste cellule sono stati dimostrati in linfonodi con vario grado di alterazione strutturale e deficit selettivo di popolazioni B o T, in corso di varie forme di immunodeficienza primitiva [32]. Nella milza esse sono rare e si localizzano nelle cuffie periarteriolari T-linfoidi o al confine con la zona marginale [10]. In conclusione, i PM/PDC sono una popolazione cellulare costitutiva dei tessuti linfoidi e del sangue periferico. I dati sopracitati confermano la loro appartenenza alla linea ematopoietica e suggeriscono un ruolo dinamico nella re- golazione della risposta immunitaria, mediante attivo ricircolo fra sangue periferico e organi linfoidi, come indicato dalla tipica localizzazione nell’area del “traffico” linfonodale. La presenza di PM/PDC nel sangue ombelicale e nei linfonodi fetali suggerisce che tali cellule possono migrare agli organi linfoidi secondari, in assenza di una risposta infiammatoria, suggerendo un loro ruolo funzionale anche in condizioni di assenza di stimolo antigenico o comunque “germ-free”. Meccanismi di migrazione dal sangue periferico ai tessuti linfoidi Il traffico cellulare fra sangue periferico, organi linfoidi secondari e tessuti extra-linfoidi è regolato dall’espressione di molecole di superficie, che interagiscono con i loro ligandi espressi a livello endoteliale. I PM/PDC del sangue periferico mostrano intensa positività di membrana per L-selectina (CD62L) [19, 25], molecola critica nel reclutamento cellulare dal circolo ematico agli organi linfoidi secondari, attraverso le HEVs. Curiosamente, una volta nei tessuti linfoidi, PM/PDC internalizzano CD62L, che perde pertanto la sua funzione recettoriale. Più recentemente, è stata analizzata l’espressione di recettori per chemochine, molecole chiave nella migrazione leucocitaria, nei PM/PDC del sangue periferico [14]: essi esprimono alti livelli di CCR2, CCR5, CCR7, CXCR3 e CXCR4 e risultano debolmente positivi per CCR4 e CXCR2. La maggior parte di questi recettori tuttavia è risultata “non funzionale” in termini di risposta migratoria verso la corrispondente chemochina, ad eccezione di CXCR4 e, in condizioni di attivazione, di CCR7. I PM/PDC risultano pertanto responsivi a chemo- 166 F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi chine tipicamente espresse nel microambiente linfonodale (stromal-derived factor 1, SDF-1; ligando di CXCR4; Epstein-Barr virus-induced molecule 1, ELC, e secondary lymphoid organ chemokine, SLC; ligandi di CCR7). I dati suggeriscono un homing preferenziale dei PM/PDC a livello dei linfonodi via CD62L e SDF-1/CXCR4, in condizioni indipendenti dall’infiammazione, e un trattenimento in tale microambiente via ELC-SLC/CCR7 dopo attivazione. Non si esclude che in condizioni patologiche alcuni recettori per chemochine vengano resi funzionalmente operativi nel reclutamento dei PM/PDC in siti infiammatori. Ai fini di una ulteriore comprensione dei meccanismi di migrazione in vivo, si rende pertanto necessario lo studio di espressione di tali molecole in PM/PDC direttamente negli organi linfoidi e in condizioni infiammatorie extranodali. Produzione di interferone alfa (a-IFN) Fig. 2 I PM/PDC producono livelli elevati di α-IFN, come dimostrato anche dalla intensa immunoreattività per tale citochina (sezione criostatica) I dati morfologici e ultrastrutturali indicano chiaramente che i PM/PDC sono cellule con funzione secretiva e la possibilità di purificarli e mantenerli in coltura ha permesso di sciogliere almeno in parte l’enigma sui loro prodotti di secrezione. Isolati dal sangue o dai tessuti, i PM/PDC vanno incontro rapidamente ad apoptosi; questo fenomeno è completamente bloccato dall’aggiunta di interleuchina 3 (IL3), una citochina importante nel mantenimento della proliferazione e nell’induzione della differenziazione delle cellule emopoietiche [33]. La sensibilità dei PM/PDC a IL3 è mediata dalla loro intensa espressione del recettore alfa di IL3 (CD123), che pertanto risulta essere la citochina chiave per la loro sopravvivenza [34]. In vitro PM/PDC sintetizzano elevate quantità di interferone di tipo I o interferone alfa (αIFN) (ad eccezione delle altre forme di interferone di tipo I, quali β e ω); la secrezione di α-IFN è indotta da diversi stimoli, quali virus (HHV, HIV, adenovirus) [25, 35-38], batteri (Stafilococco aureo) [39], citochine [25], sequenze ipometilate di DNA batterico (CpG ODN) [40-43] e siero di pazienti affetti da Lupus eritematoso sistemico [44, 45]. La sintesi di α-IFN è comprovata in vivo dalla intensa immunoreattività citoplasmatica con anticorpi anti-α-IFN (Fig. 2), nonché dalla positività dei PM/PDC per MxA, proteina indotta da α-IFN e considerata affidabile indice della produzione degli interferoni di tipo I [46]. Sebbene l’α-IFN sia prodotto da diverse popolazioni leucocitarie, è stato dimostrato che i PM/PDC sono in assoluto i maggiori produttori di tale citochina [25, 38, 47]. In questo modo, si è svelato un altro enigma dell’immunologia e cioè la natura cellulare della popolazione del sangue periferico nota come natural interferon producing cells (NIPC) [48], la cui distribuzione tissutale e le cui caratteristiche morfologiche e fenotipiche, in vivo, sono rimaste per lungo tempo elusive [49]. Va tuttavia sottolineato che i PM/PDC probabilmente non costituiscono l’intera popolazione di NIPC nell’uomo [15, 50]. L’α-IFN è una citochina chiave dell’immunità di tipo naturale o innato, dotata di attività antivirale, anti-proliferativa e immunomodulatoria [51-53]. Nelle prime fasi di risposta a una infezione virale, α-IFN è in grado di proteggere le cellule dall’effetto citopatico virale ed attiva elementi cellulari adibiti all’immunità naturale, quali cellule natural killer e macrofagi. La sua attività immunomodulatoria è di tipo pleiotropico e consiste nella regolazione di altre cellule (cellule dendritiche, linfociti T e B), successivamente implicate nella risposta immunologica di tipo adattativo. L’uso di α-IFN in corso di infezioni virali croniche, quali l’epatite B e C, è spesso coronato dal successo terapeutico con eliminazione definitiva dell’agente infettivo. Similmente, l’importanza di α-IFN come fattore anti-proliferativo è ben documentata dal suo utilizzo nella cura di diverse neoplasie [54]. È interessante notare che i PM/PDC mostrano spiccata positività citoplasmatica per α-IFN (Fig. 2) e MxA, anche in condizioni reattive “usuali”; poiché anche in vitro in condizioni di non attivazione i PM/PDC esprimono elevati livelli di MxA, si può ipotizzare che nei PM/PDC esista un livello basale di MxA costitutivo o indotto in modo autocrino via α-IFN, con finalità protettiva nei confronti di un eventuale danno citopatico virale [47]. Recentemente è stata individuata una proteina chiave nella regolazione della produzione di α-IFN nei PM/PDC, definita BDCA2 (blood dendritic cell antigen). BDCA2 risulta selettivamente espresso sui PM/PDC circolanti e tissutali, con una specificità superiore ad altri marcatori [12]. Si è osservato che l’attivazione di questo recettore con l’anticorpo specifico induce una drastica riduzione della produzione di αIFN nei PM/PDC, indotta da diversi stimoli [13]. Ciò suggerisce un ruolo chiave del ligando naturale di BDCA2, tuttora sconosciuto, nella regolazione di produzione di αIFN in vivo. F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi Una nuova sottopopolazione di cellule dendritiche Le cellule dendritiche (DCs) rappresentano la popolazione con attività di presentazione dell’antigene più evoluta [5557]. Esse mostrano peculiari aspetti morfo-funzionali che correlano con il loro stadio maturativo. In particolare, le DCs immature si localizzano nelle sedi di ingresso antigenico (cellule di Langerhans intraepiteliali e cellule dendritiche interstiziali dermiche), sono caratterizzate da spiccata attività di fagocitosi e scarsa attività immunostimolatoria. Una volta incontrato l’antigene, esse migrano ai tessuti linfoidi e contemporaneamente vanno incontro a maturazione, caratterizzata da espressione di molecole co-stimolatorie (HLADR di membrana, CD80, CD83, CD86, DCLAMP/CD208), produzione di elevate quantità di interleuchina 12 (IL12) e acquisizione di forte capacità di stimolazione dei linfociti T naive. Nell’uomo, il precursore diretto delle cellule dendritiche tissutali è ritenuta essere una cellula circolante a morfologia dendritica esprimente CD11c, definita cellula dendritica mieloide (MDC) [58, 59]; inoltre, è stato possibile generare in vitro cellule dendritiche con le caratteristiche delle equivalenti popolazioni tissutali, partendo da precursori CD34+ o CD14+ [60]. La prima dimostrazione che elementi del sangue periferico, con fenotipo simile a quello dei PM/PDC, possono differenziare in vitro in potenti cellule con funzione di antigenpresenting cells risale alla prima metà degli anni novanta [27]. Lavori successivi hanno direttamente confermato la capacità dei PM/PDC di differenziare in DCs a seguito di diversi stimoli, quali virus, IL-3 e CD40L, CpG ODN [34, 40, 43, 47]. In particolare, le DCs ottenute da PM/PDC del sangue periferico o estratti da tonsille e timo esprimono molecole di adesione e co-stimolatorie tipiche delle DCs mature, producono IL12 e sono in grado di stimolare i linfociti T allogenici naive [40, 43, 47]. È sulla scorta di queste osservazioni che il nuovo termine plasmacytoid dendritic cell è stato coniato per identificare questa nuova sottopopolazione di DCs umane [47]. Esistono sostanziali differenze fra le MDC e le PDC, che ne suggeriscono un possibile diverso ruolo funzionale e forse una diversa origine [58]. Esse comprendono innanzi tutto il profilo fenotipico, inclusivo di recettori per chemochine; in secondo luogo, la capacità fagocitica appare del tutto limitata nei PM/PDC e trova in parte spiegazione nella mancata espressione di recettori specifici per la fagocitosi, quali il recettore per il mannosio e i recettori per la frazione Fc delle immunoglobuline. Profonde differenze esistono anche nell’espressione dei cosiddetti toll-like receptor (TLR), un complesso di molecole recentemente identificate e coinvolte nel riconoscimento di agenti microbici e dei loro prodotti; infine, anche il tipo di risposta immunologica indotta da MDC e PDC sembra differente, essendo tipicamente di tipo Th1 per le prime, alternativamente Th1 o Th2 per le seconde, a seconda delle condizioni microambientali [47, 61]. 167 Se è ormai definitivamente accettato che le cellule plasmacitoidi circolanti e tissutali possano trasformarsi in vitro in cellule dendritiche, esistono ancora aspetti controversi sulla possibilità che tale fenomeno si realizzi in vivo. Infatti, nei tessuti linfoidi è possibile osservare elementi CD123+ BDCA2+ a morfologia dendritica, ma essi risultano estremamente rari rispetto ai PM/PDC con tradizionale morfologia tondo-ovale ben nota ai patologi. Inoltre, la co-espressione di molecole co-stimolatorie, documentata sulle PDCs in vitro, è riconoscibile solo in un numero molto limitato di PM/PDC nei tessuti, ad indicarne una minima, ancorchè presente, attivazione tissutale [47] (Fig. 3). Tuttavia, al di là di questi aspetti ancora irrisolti, se i PM/PDC che noi osserviamo nei tessuti rappresentano i precursori di una sottopopolazione funzionale di DCs, allora altre differenze sono evidenti fra MDC e PDC. Infatti, le prime sono localizzate nelle aree di ingresso di antigeni esogeni nei tessuti periferici, come MDC immature, e nei tessuti linfoidi, come MDC mature (cellule dendritiche interdigitate); le seconde, al contrario, si trovano strategicamente distribuite, indipendentemente dal loro stato di attivazione, nei siti di entrata degli antigeni nei tessuti linfoidi e di incontro di questi con i linfociti circolanti, in stretta coabitazione con linfociti T e B ricircolanti. È possibile che le differenze descritte fra le due popolazioni di DCs riflettano un ruolo immunoregolatore diverso per diversi stimoli, oppure indichino attività di reciproco controllo inibitorio o stimolatorio, nell’ambito di una fine modulazione della risposta immunitaria [35, 50]. Fig. 3 Una doppia immunofluorescenza per CD123 (rosso) e DCLAMP (verde) mostra numerosi CD123+ PM/PDC presenti in vicinanza di una venula epitelioide, anch’essa CD123 positiva; non vi è co-espressione di DCLAMP da parte dei PM/PDC, ad indicare che, nei tessuti, tali cellule non esprimono marcatori di maturazione di cellule dendritiche. Le cellule DCLAMP positive rappresentano cellule dendritiche interdigitate 168 PM/PDC in condizioni patologiche Uno spiccato incremento di PM/PDC nei linfonodi è osservabile in condizioni di tipo infiammatorio, quali linfoadeniti granulomatose [62] a genesi infettiva (tubercolosi, toxoplasmosi) e non (sarcoidosi), e in peculiari condizioni clinico-patologiche associate a linfoadenopatia, quali la malattia di Kikuchi [63-67] e la malattia di Castleman jalino-vascolare [68, 69]. In queste due ultime forme, la ricchezza di PM/PDC assume anche un significato diagnostico istopatologico. Sempre a livello linfonodale è stata riportata la presenza di nidi di PM/PDC in associazione a neoplasie epiteliali [70], processi linfoproliferativi [71] e malattie mieloproliferative, queste ultime discusse più avanti con maggiore dettaglio. In tessuti extra-nodali, i dati sulla presenza di PM/PDC sono limitati a condizioni infiammatorie della cute quali pseudolinfomi [72, 73] e, specialmente, casi di infiltrato linfocitario di Jessner [74, 75] (vedi oltre). In tutte queste condizioni, la popolazione di PM/PDC è stata investigata su tessuto senza l’ausilio dei più recenti marcatori che meglio ne illustrano lo stato funzionale; allo stesso modo, mancano dati funzionali in vitro relativi sia alla componente PM/PDC circolante che a quella tissutale. Possiamo concludere che, allo stato attuale, possono essere suggerite solo ipotesi speculative relativamente al ruolo patogenetico dei PM/PDC nelle diverse condizioni nelle quali vengono osservati, sebbene alcuni modelli, qui di seguito riportati, abbiano iniziato a fornire una chiave interpretativa. Risposta ai patogeni: ruolo nella infezione da HIV L’osservazione che i PM/PDC sono estremamente abbondanti nei tessuti adenoidei, soprattutto nelle stagioni invernali, quando più frequenti risultano le infezioni virali all’albero respiratorio, suggerisce un possibile ruolo nei meccanismi locali di difesa antivirale. Una prova definitiva del ruolo dei PM/PDC nelle infezioni è recentemente emersa in diversi studi effettuati in pazienti con infezione da HIV, nei quali il numero dei PM/PDC circolanti e i livelli sierici di α-IFN sono inversamente correlati con la carica virale e con lo stadio della malattia e sono predittivi dell’evoluzione clinica, in termini di probabilità di insorgenza di infezioni da opportunisti e sviluppo di neoplasie [76, 77]. I PM/PDC esprimono gran parte dei recettori identificati come mediatori dell’internalizzazione dell’HIV, quali CD4, CCR5 e CXCR4 ed è stato dimostrato che i PM/PDC timici sono permissivi all’infezione produttiva del virus [37]. Abbiamo inoltre osservato uno stretto rapporto topografico, nell’area del traffico linfonodale, fra i PM/PDC e cellule dendritiche esprimenti DCSIGN, una proteina legante HIV e ritenuta chiave nel meccanismo della trasmissione intercellulare dell’infezione [78-80]. In conclusione, oltre a un ruolo antiHIV α-IFN mediato, è assai probabile che i PM/PDC tissu- F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi tali possano rappresentare il serbatoio naturale oppure il carrier transitorio del virus, prima della infezione definitiva dei linfociti T CD4+. L’attività dei PM/PDC, nei confronti di patogeni, non sembra limitata esclusivamente ai virus. Molto recentemente, i meccanismi dell’immunità innata hanno trovato una nuova chiave interpretativa nella scoperta dei toll-like receptors (TLR), una famiglia di recettori di membrana coinvolti nel riconoscimento di specifiche sequenze proteiche o nucleotidiche di origine microbica, fondamentali per l’immediata e, in molti casi, sufficiente risposta dell’ospite per limitare o eradicare una infezione [81, 82]. I PM/PDC del sangue periferico esprimono TLR9, grazie al quale sono in grado di riconoscere sequenze di DNA batterico non metilate (CpGODN) [42, 43, 83]. L’ingaggio di TLR9 è in grado di modulare tutte le principali funzioni dei PM/PDC, quali il mantenimento della loro sopravvivenza, l’induzione selettiva della loro maturazione e l’attivazione della produzione di IL12 e di α-IFN, nonché l’espressione di CCR7. Questi dati indicano che i PM/PDC hanno tutte le caratteristiche per rispondere a infezioni microbiche nei confronti di gruppi di patogeni, non esclusivamente virali, che condividono affinità molecolari. Autoimmunità Uno stimolo antigenico non sempre conduce ad una risposta immunologica finalizzata all’eliminazione del patogeno. In determinate condizioni, si può instaurare uno stato di iperattivazione immunologica con risposta di tipo autoimmunitario nei confronti del “self ”. Il lupus eritematoso sistemico (LES) rappresenta il prototipo di risposta immunologica abnorme, che si traduce in malattia autoimmune con danno multiorgano. Numerose evidenze indirette e, più recentemente, dirette suggeriscono l’esistenza di un legame patogenetico fra PM/PDC e LES [84]. Già da tempo in letteratura è stato documentato che il siero di pazienti affetti da LES in fase attiva contiene elevati livelli di α-IFN, mentre le NIPC circolanti sono ridotte [50, 85]. Un rapporto fra α-IFN e LES è d’altra parte documentato dall’osservazione che la terapia cronica con α-IFN può determinare lo sviluppo di varie manifestazioni di autoimmunità, inclusi quadri di LES [86, 87]. Più recentemente, è stato identificato un fattore circolante solubile in pazienti con LES attivo, che è in grado di indurre attivazione dei PM/PDC, con successiva produzione di alti livelli di α-IFN [44]. L’apparente paradosso della riduzione del numero di PM/PDC del sangue periferico [88] e dell’aumento di α-IFN in pazienti con LES è facilmente spiegato dal reclutamento di tali cellule nei siti lesionali cutanei [89] (Fig. 4). È interessante notare come la condizione nota come infiltrato linfocitario benigno di Jessner, dove accumuli di PM/PDC sono spesso osservabili [74, 75], rappresenti secondo alcuni Autori una variante di lupus eritematoso. Il ruolo patogenetico giocato dai PM/PDC nel LES [84], potrebbe avere alcune analogie con quello della malattia di F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi Fig. 4 Aggregato di PM/PDC nel derma, in un caso di lupus eritematoso cutaneo Kikuchi-Fujimoto (MKF). La MKF è caratterizzata da sintomi sistemici, linfoadenopatia cervicale, leucopenia e fugaci rash cutanei. Nella maggior parte dei casi, tale condizione mostra risoluzione spontanea nell’arco di alcuni mesi; tuttavia una percentuale minima di pazienti sviluppano un LES conclamato [90] e diversi Autori hanno considerato la MKF e il LES strettamente correlati [90-92]. Accumuli esuberanti di PM/PDC nei linfonodi e, occasionalmente, nella cute rappresentano una caratteristica tipica e diagnostica della MKF [64, 66, 93]; è interessante notare che, nei rari casi in cui sono stati analizzati linfonodi in pazienti con LES, si sono osservate modificazioni del tutto simili alla MKF [94, 95]. Se LES e MKF rappresentano manifestazioni di uno stesso processo, dove il comune denominatore è rappresentato dall’accumulo tissutale di PM/PDC, si può ipotizzare che nel LES il danno d’organo divenga critico nel mantenimento di una costante produzione di α-IFN da parte dei PM/PDC, mentre nella MKF il circuito patogenetico risulterebbe limitato ad una iniziale risposta a un ipotetico patogeno. In aggiunta, potrebbe essere interessante valutare l’eventuale differente ruolo giocato, in tali condizioni, da meccanismi naturali inibitori della sintesi di α-IFN, quali BDCA2 e ligando. Immunità antitumorale Lo studio della risposta immunitaria anti-tumorale, negli anni più recenti, si è focalizzato sui meccanismi di riconoscimento di antigeni tumore-associati e sul ruolo svolto dalle cellule presentanti l’antigene, prime fra tutte le DCs [96]. Anche se il perfezionamento di metodi di estrazione di DCs autologhe e della loro stimolazione ex-vivo con antigeni tumorali ha permesso l’avvio dei primi trial clinici di immunoterapia, rimangono ancora irrisolti numerosi quesiti sui meccanismi che in vivo rendono il naturale pro- 169 cesso di riconoscimento antigenico tumorale limitato o del tutto inefficace. Per questo motivo, studi in situ delle popolazioni immunocompetenti appaiono importanti e necessari. Una delle prime evidenze di un possibile ruolo dei PM/PDC nel contesto dell’immunità antitumorale risale all’osservazione che linfonodi metastatici drenanti neoplasie epiteliali della mammella contengono prominenti aggregati di PM/PDC [70]. Più recentemente, Zou e coll. [97] hanno documentato la presenza di PM/PDC in casi di carcinoma dell’ovaio, dimostrando un loro reclutamento e coinvolgimento diretto sia nel tessuto tumorale che nel liquido ascitico. I PM/PDC, in tale contesto, esprimevano α-IFN e MxA e risultavano attratti chemotatticamente da SDF-1 prodotto dalle cellule neoplastiche. Tale chemochina è risultata responsabile non solo della migrazione dei PM/PDC nel sito tumorale, ma anche della loro protezione dall’apoptosi indotta da interleuchina 10 secreta dai macrofagi intratumorali. Infine, questo studio ha evidenziato un difetto funzionale dei PM/PDC nella stimolazione dei linfociti T isolati dal tumore, suggerendo un meccanismo di “escape tumorale” PM/PDC indotto. Il melanoma della cute rappresenta uno dei modelli più analizzati dal punto di vista della risposta immunologica anti-tumorale. I PM/PDC isolati dal sangue periferico risultano in grado di stimolare una popolazione di linfociti T-citotossici specifica nei confronti di antigeni melanoma-associati e di favorirne la migrazione nel sito del tumore primitivo (osservazione personale). Uno studio parallelo in vivo ha dimostrato che i PM/PDC sono effettivamente presenti non solo in numero significativo nei linfonodi sentinella, ma anche nelle lesioni primitive e nelle metastasi (osservazione personale). In tale ambito, i PM/PDC sono associati a una popolazione di cellule dendritiche mieloidi, con le quali si localizzano soprattutto alla periferia dei nidi neoplastici e condividono un fenotipo prevalentemente immaturo. In aggiunta, la produzione di α-IFN da parte di PM/PDC appare verosimilmente limitata, come indicato dal basso numero di cellule MxA positive osservate nel microambiente peritumorale. Infine, i linfociti T associati al tumore mostrano un fenotipo prevalentemente di tipo naive e la produzione di interleuchina 12, indice di attivazione della popolazione di DCs, appare molto limitata. Tutti questi dati sembrano indicare che nel microambiente tumorale esistono meccanismi in grado di limitare la funzione immunostimolatoria dei PM/PDC e di altre cellule dendritiche. PM/PDC: un’origine ancora controversa L’origine dei PM/PDC è stata a lungo dibattuta e anche i dati più recenti non hanno definitivamente risolto l’enigma se tali cellule siano da accorpare alla linea linfoide piuttosto che alla linea mielo-monocitica [15] (Tab. 2). 170 F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi Tabella 2 Ipotesi ontogenetiche dei PM/PDC Origine linfoide Origine mielo-monocitica PMs/PDCs esprimono bassi livelli di M-CSFR ed in coltura con MCSF non differenziano in macrofagi PMs/PDCs generati da precursori mieloidi CD34+/M-CSFR+ in presenza di IL3 Una frazione di PMs/PDCs esprime alti livelli di trascritti linfoidi T (pre-catena alfa del TCR) e B (Spi-B; pre-lambda).Tali cellule tuttavia non sono in grado di differenziare in linfociti T in FTOC Espressione di alcuni marcatori mielo-monocitici (CD31, CD36, CD68 e CD68R, ILT3, CD123) L’espressione ectopica di due geni Id2 e Id3 in cellule CD34+ inibisce lo sviluppo di linfociti B, T ed anche di PM/PDC, ma non di cellule mieloidi Espressione in vitro, oltre che di CD4, di alcuni marcatori linfoidi (CD2, CD5,CD7) in una frazione di PM/PDC. Tale espressione non è tuttavia dimostrabile su tessuto Espressione transitoria di marcatori mieloidi in coltura (CD11c, CD13, CD33) Fenotipo “mieloide” della controparte murina dei PM/PDC umani Identificazione di identiche anomalie citogenetiche in cellule leucemiche (leucemie mieloidi acute) e cellule dendritiche mieloidi e plasmacitoidi circolanti. Associazione fra malattie mieloproliferative (specie leucemie mielo-monocitiche) e accumuli patologici di PM/PDC nei linfonodi e altri tessuti, con identificazione di identiche anomalie citogenetiche in alcuni casi M-CSF, monocyte-colony stimulating factor; M-CSFR, monocyte-colony stimulating factor receptor; TCR, T cell receptor; FTOC, fetal thymus organ culture Uno degli argomenti più suggestivi per una stretta relazione con la linea mielo-monocitica è costituito dall’osservazione di casi di malattia mieloproliferativa associata ad accumuli massivi di PM/PDC sia nei tessuti linfoidi che, occasionalmente, nel midollo osseo, milza, cute e anche nel sangue periferico (Tab. 3) [4, 5, 98-106]. In larga parte, si tratta di processi mieloproliferativi acuti o cronici di tipo mielo-monocitico o monocitico, insorgenti in individui anziani, che si manifestano con linfoadenopatia ed epato-splenomegalia. L’insorgenza di linfoadenopatia è solitamente simultanea all’identificazione della patologia mieloproliferativa. L’evoluzione della malattia è, nella maggior parte dei casi, rapidamente infausta e in genere determinata più dalla progressione dell’emopatia di base che da una espansione progressiva dei PM/PDC tissutali o circolanti. Le ipotesi proposte per spiegare questa curiosa associazione hanno considerato la possibilità che l’espansione patologica di PM/PDC rappresenti una esagerata reazione alla neoplasia mieloide, oppure che i due processi siano di natura neoplastica, ma del tutto indipendenti fra di loro, oppure infine che essi rappresentino la differenziazione divergente di un unico processo [104]. Sul piano morfologico, sebbene i PM/PDC osservati in queste condizioni mostrino solo minima atipia cellulare e non presentino significativa attività proliferativa, la loro marcata espansione nel linfonodo, spesso con estensione al tessuto extranodale (Fig. 5) e la manifestazione di alcune aberrazioni fenotipiche ne hanno suggerito indirettamente la natura neoplastica [10]. Più recentemente, la presenza di identiche anomalie citogenetiche nelle due popolazioni cellulari è stata osservata in casi di mielodisplasia [107, 108] e in un caso di leucosi acuta mieloide [106], indicando inequivocabilmente la natura neoplastica dei PM/PDC e suggerendo uno stretto rapporto ontogenetico fra le due popolazioni tumorali. È interessante notare che Mohty e coll. hanno recente- Fig. 5 Linfonodo, in un caso di leucemia mieloide acuta associata a massiva espansione di PM/PDC nel linfonodo (caso 11, Tab. 3): gli asterischi indicano i numerosi aggregati di PM/PDCV immersi in una cellularità diffusa, rappresentata da blasti leucemici mente dimostrato come, in diversi casi di leucosi mieloide, anche i “normali” PM/PDC circolanti, così come le DCs di origine mieloide, condividono con le cellule neoplastiche simili anomalie citogenetiche [109]. Una rara forma di neoplasia a cellule CD4+CD56+ CD123+ è stata recentemente descritta da Chaperot e coll.; caratterizzata da massivo coinvolgimento midollare con lesioni nodali ed extranodali e da alti valori di cellule atipiche circolanti, essa è stata considerata rappresentare una manifestazione leucemica di PM/PDC; il significato di questa entità e il suo rapporto con le altre forme sopra citate di accumulo patologico di PM/PDC in malattie mieloproliferative è tutta- F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi 171 Tabella 3 Caratteristiche dei casi di accumulo patologico nodale ed extranodale di PM/PDC associati a processo mieloproliferativo Caso Pubblicazione Età/ sesso E S LN 1. Müller-Hermelink [4] 65/M + + 2. Prasthofer [98] 86/M + + + – – – – CML 3. Beiske [99] 74/M nr nr + + – + – AMML (FAB-M4) 4. Facchetti [100] 75/M + + + – – – – CMML Ph– 16 mesi 5. Koo [101] 58/F + + + – – – – MFI e CML Ph– 28 mesi 6. Harris [5] 64/F + + + – + + + CMML Ph– 7 anni 7. Thomas [102] 6/F + + + – – – – CMD-NOS nr 8. Baddoura [103] 58/M + + + – + – – IMF >> AML (FAB-M3) nr 8. Baddoura [104] 73/M – – + – – – – AmoL (M5) nr 9. Fontana [105] 63/F + + + – + – – CMD-NOS >> AMML (M4) 14 mesi 10. Facchetti [106] 24/M + + – + + – – CMML (MDS) >> AMML (FAB-M4) 8 mesi 11. Facchetti [106] 50/M + + + + + – – AML 7– 11 mesi 12. Facchetti [106] 58/M – + + + + – – CMML-MP 20q– 84 mesi 13. Facchetti [106] 65/M – + – + + – – CMML-NOS >> AMML (FAB-M4) 2 mesi 14. Facchetti [106] 86/M nr nr nr – + – – AmoL (FAB-M5) 3 mesi 15. Facchetti [106] 80/M + + + + + – – MP/MDS (?) >> AMML (FAB-M4) 43 mesi 16. Facchetti [106] 62/F – – + – + – – AmoL (FAB-M5) + Localizzazioni extranodali di PM/PDC CU MO ML SP – – – – Mielopatia associata ed evoluzione Citogenetica AMML (FAB-M4) Sopravvivenza 7 mesi Ph– (50xy) 3 settimane 15 mesi 45,XX,der(7) t(7;12)(p12;q11) nr E, epatomegalia; S, splenomegalia; LN, linfoadenopatia; CU, cute; MO, midollo osseo; ML, milza; SP, sangue periferico; AMML, leucemia acuta mielomonocitica; CML, leucemia mieloide cronica; CMML, leucemia mielomonocitica cronica; IMF, mielofibrosi idiomatica; AML, leucemia mieloide acuta; AmoL, leucemia monocitica acuta; CMD-NOS, disordine mieloproliferativo cronico, non altrimenti definibile; MDS, mielodisplasia; nr, non rilevato via difficile da stabilire, specie in mancanza di una documentazione istologica delle lesioni [110]. È innegabile che il problema della ontogenesi di PM/PDC rimane ancora irrisolto. È interessante l’ipotesi recentemente proposta da Galibert [15], il quale non esclude che la natura dei PM/PDC sia in realtà eterogenea e che tale popolazione cellulare possa avere origine da linee differenziative differenti, o rappresentare una linea differenziativa a sé stante (dendritica?), oppure ancora andare incontro in vivo a un processo di cell-fate conversion da un citotipo linfoide a uno mieloide [111]. Conclusioni Le recenti acquisizioni sui PM/PDC pongono tale popolazione in una luce funzionale del tutto nuova, nell’ambito dei tessuti linfoidi dove i patologi sono abituati a riconoscerli. Il loro ruolo di elementi a ponte fra l’immunità di tipo innato (specie come cellule producenti α-IFN) e l’immunità di tipo acquisito (specie come precursori di cellule dendritiche) li vede potenzialmente coinvolti nella prima linea di difesa contro patogeni e neoplasie. Il rovescio della medaglia potrebbe essere costituito da condizioni di iperreattività, che trovano nelle malattie autoimmuni il loro esempio più caratteristico. La possibilità di reclutare i PM/PDC in vivo o di generarli da precursori in vitro, associata alla conoscenza di meccanismi regolatori della loro funzione, apre nuove prospettive sul loro possibile impiego in terapia [112, 113]. La recente identificazione del modello murino dei PM/PDC [36, 114] renderà possibile definire ulteriormente le funzioni di queste cellule in sistemi in vivo. Per il patologo si aprono nuove prospettive di studio dei PM/PDC in diversi campi della patologia, che risulteranno fondamentali per la valutazione del loro reale significato nelle malattie. 172 Ringraziamenti Gli Autori ringraziano Marco Colonna e Marina Cella (Washington University, St Louis, MO, USA) per il continuo stimolo nello studio dei PM/PDC, Glauco Frizzera (Cornell University, New York, NY, USA), Giovannino Massarelli (Università di Sassari) e Pierluigi Chiodera (Clinica S. Anna, Brescia) per il prezioso contributo di casistica, Silvana Festa e Anna Galletti per la collaborazione tecnica. Summary Plasmacytoid monocytes (PM), originally described by pathologists as cells occurring in the interfollicular area of human lymph nodes, are emerging cells in the scenario of the immune system. PM normally circulate between peripheral blood, lymphoid organs and sites of inflammation using specific migratory pathways and signalling; PM are easily recognizable on the basis of their distinctive morphology and phenotype (CD3–, CD11c–, CD14–, CD20–, CD36+, CD56–, CD68+, CD123+, BDCA2+). Recently it has been shown that PM produce high levels of type I interferon, thus corresponding to natural interferon-producing cells. Furthermore, PM or their precursors may differentiate in vitro towards a new subset of dendritic cells, supporting a function in antigen-dependent T cell priming. Taken together, these data suggest PM play a relevant role in the immune system, linking innate and acquired immunities. In fact, PM seem to be crucial in the pathogenesis of different immune-mediated human diseases including viral infections and autoimmune disorders, and to be involved in the immune control of some malignant neoplasms. The issue concerning the cell lineage of PM remains unresolved, but the frequent association between a tumoral expansion of PM and myelo-monocytic leukemia, together with cytogenetic identity between the two cell populations identified in rare cases, corroborates the myeloid origin of PM. Bibliografia 1. Lennert K, Remmele W (1958) Karyometrische Untersuchungen an Lymphknotenzellen des Menschen: I. Mitt. Germinoblasten, Lymphoblasten und Lymphozyten. Acta Haematol (Basel) 19:99-113 2. Lennert K, Kaiserling E, Muller-Hermelink HK (1975) T-associated plasma-cells. Lancet 1:1031-1032 3. Vollenweider R, Lennert K (1983) Plasmacytoid T-cell clusters in non-specific lymphadenitis. Virchows Arch 44:1-14 4. Müller-Hermelink HK, Steinmann G, Stein H, Lennert K (1983) Malignant lymphoma of plasmacytoid T cells. Morphologic and immunologic studies characterizing a special type of T-cell. Am J Surg Pathol 7:849-862 5. Harris NL, Demirjian Z (1991) Plasmacytoid T-zone cell proliferation in a patient with chronic myelomonocytic leukemia: histologic and immunohistologic characterization. Am J Surg Pathol 15:87-95 6. Facchetti F, de Wolf-Peeters C, Mason DY et al (1988) Plasmacytoid T cells. Immunohistochemical evidence for their monocyte/macrophage origin. Am J Pathol 133:15-21 F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi 7. Facchetti F, De Wolf-Peeters C, van den Oord JJ et al (1988) Plasmacytoid T cells: a cell population normally present in the reactive lymph node. An immunohistochemical and electronmicroscopic study. Hum Pathol 19:1085-1092 8. Müller-Hermelink HK, Kaiserling E, Lennert K (1973) Pseudofollikuläre Nester von Plasmazellen (eines besonderen Typs?) in der paracorticalen Pulpa menschlicher Lymphknoten. Virchows Arch (Cell Pathol) 14:47-56 9. Kaiserling E, Lennert K (1974) [Interdigitating reticulum cell in the human lymph node. A specific cell of the thymus dependent region (author’s transl)]. Virchows Arch B Cell Pathol 16:51-61 10. Facchetti F, De-Wolf-Peeters C (1991) The plasmacytoid monocyte (the so-called plasmacytoid T-cell). An enigmatic cell of the human lymphoid tissue. Biotest Bulletin 4:225-240 11. Facchetti F, Candiago E, Vermi W (1999) Plasmacytoid monocytes express IL3-receptor alpha and differentiate into dendritic cells. Histopathology 35:88-89 12. Dzionek A, Fuchs A, Schmidt P et al (2000) BDCA-2, BDCA-3, and BDCA-4: three markers for distinct subsets of dendritic cells in human peripheral blood. J Immunol 165:60376046 13. Dzionek A, Sohma J, Nagafune M et al (2001) BDCA-2, a novel plasmacytoid dendritic cell cell-specific type II C-type lectin, mediates antigen-capture and is a potent inhibitor of interferon-alpha/beta induction. J Exp Med 194:18231834 14. Penna G, Sozzani S, Adorini L (2001) Cutting edge: selective usage of chemokine receptors by plasmacytoid dendritic cells. J Immunol 167:1862-1866 15. Galibert L, Maliszewski CR, Vandenabeele S (2001) Plasmacytoid monocytes/T cells: a dendritic cell lineage? Semin Immunol 13:283-289 16. Lennert K, Schwarze EW, Kruger G (1981) Lymphknotenveranderungen durch Virusinfektionen. Lymph node lesions caused by virus infections. Verh Dtsch Ges Pathol 65:151-171 17. Bendriss-Vermare N, Barthelemy C, Durand I et al (2001) Human thymus contains IFN-alpha-producing CD11c(–), myeloid CD11c(+), and mature interdigitating dendritic cells. J Clin Invest 107:835-844 18. Schmitt C, Fohrer H, Beaudet S et al (2000) Identification of mature and immature human thymic dendritic cells that differentially express HLA-DR and interleukin-3 receptor in vivo. J Leukoc Biol 68:836-844 19. Olweus J, BitMansour A, Warnke R et al (1997) Dendritic cell ontogeny: a human dendritic cell lineage of myeloid origin. Proc Natl Acad Sci U S A 94:12551-12556 20. Waller EK, Rosenthal H, Jones TW et al (2001) Larger numbers of CD4 (bright) dendritic cells in donor bone marrow are associated with increased relapse after allogeneic bone marrow transplantation. Blood 97:2948-2956 21. Blom B, Ho S, Antonenko S, Liu YJ (2000) Generation of interferon alpha-producing predendritic cell (Pre-DC)2 from human CD34(+) hematopoietic stem cells. J Exp Med 192:1785-1796 22. Pulendran B, Banchereau J, Burkeholder S et al (2000) Flt3ligand and granulocyte colony-stimulating factor mobilize distinct human dendritic cell subsets in vivo. J Immunol 165:566-572 23. Bjorck P (2001) Isolation and characterization of plasmacytoid dendritic cells from Flt3 ligand and granulocyte-ma- F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. 41. crophage colony-stimulating factor-treated mice. Blood 98:3520-3526 Maraskovsky E, Daro E, Roux E et al (2000) In vivo generation of human dendritic cell subsets by Flt3 ligand. Blood 96:878-884 Cella M, Jarrossay D, Facchetti F et al (1999) Plasmacytoid monocytes migrate to inflamed lymph nodes and produce large amounts of type I interferon. Nat Med 5:919-923 Kohrgruber N, Halanek N, Groger M et al (1999) Survival, maturation, and function of CD11c– and CD11c+ peripheral blood dendritic cells are differentially regulated by cytokines. J Immunol 163:3250-3259 O’Doherty U, Peng M, Gezelter S et al (1994) Human blood contains two subsets of dendritic cells, one immunologically mature and the other immature. Immunology 82:487-493 Sorg RV, Kogler G, Wernet P (1999) Identification of cord blood dendritic cells as an immature CD11c– population. Blood 93:2302-2307 Strobl H, Scheinecker C, Riedl E et al (1998) Identification of CD68+lin– peripheral blood cells with dendritic precursor characteristics. J Immunol 161:740-748 Facchetti F, de Wolf-Peeters C, van den Oord JJ et al (1989) Anti-high endothelial venule monoclonal antibody HECA452 recognizes plasmacytoid T cells and delineates an “extranodular” compartment in the reactive lymph node. Immunol Lett 20:277-281 Georgelas A, Schibler K (2000) Characterization of myeloid and lymphoid subsets in dendritic cells derived from cord blood and adult blood. Exp Hematol 28:1499 Facchetti F, Blanzuoli L, Ungari M et al (1998) Lymph node pathology in primary combined immunodeficiency diseases. Springer Semin Immunopathol 19:459-478 COPE COPE (1999) IL3. http://www.copewithcytokines.de/ copecgi?3244 Grouard G, Rissoan MC, Filgueira L et al (1997) The enigmatic plasmacytoid T cells develop into dendritic cells with interleukin (IL)-3 and CD40-ligand. J Exp Med 185:11011111 Zou W, Borvak J, Wei S et al (2001) Reciprocal regulation of plasmacytoid dendritic cells and monocytes during viral infection. Eur J Immunol 31:3833-3839 Nakano H, Yanagita M, Gunn MD (2001) CD11c(+)B220(+) Gr-1(+) cells in mouse lymph nodes and spleen display characteristics of plasmacytoid dendritic cells. J Exp Med 194:1171-1178 Keir ME, Stoddart CA, Linquist-Stepps V et al (2002) IFNalpha secretion by type 2 predendritic cells up-regulates MHC class I in the HIV-1-infected thymus. J Immunol 168:325-331 Kadowaki N, Antonenko S, Lau JY, Liu YJ (2000) Natural interferon alpha/beta-producing cells link innate and adaptive immunity. J Exp Med 192:219-226 Svensson H, Cederblad B, Lindahl M, Alm G (1996) Stimulation of natural interferon-alpha/beta-producing cells by Staphylococcus aureus. J Interferon Cytokine Res 16:7-16 Bauer M, Redecke V, Ellwart JW et al (2001) Bacterial cpgdna triggers activation and maturation of human cd11c(–), cd123(+) dendritic cells. J Immunol 166:5000-5007 Kadowaki N, Antonenko S, Liu YJ (2001) Distinct CpG DNA and polyinosinic-polycytidylic acid double-stranded RNA, respectively, stimulate CD11c– type 2 dendritic cell precursors and CD11c+ dendritic cells to produce type I IFN. J Immunol 166:2291-2295 173 42. Kadowaki N, Ho S, Antonenko S (2001) Subsets of human dendritic cell precursors express different toll-like receptors and respond to different microbial antigens. J Exp Med 194:863-870 43. Krug A, Towarowski A, Britsch S et al (2001) Toll-like receptor expression reveals CpG DNA as a unique microbial stimulus for plasmacytoid dendritic cells which synergizes with CD40 ligand to induce high amounts of IL-12. Eur J Immunol 31:3026-3037 44. Vallin H, Blomberg S, Alm GV et al (1999) Patients with systemic lupus erythematosus (SLE) have a circulating inducer of interferon-alpha (IFN-alpha) production acting on leucocytes resembling immature dendritic cells. Clin Exp Immunol 115:196-202 45. Vallin H, Perers A, Alm GV, Ronnblom L (1999) Anti-doublestranded DNA antibodies and immunostimulatory plasmid DNA in combination mimic the endogenous IFN-alpha inducer in systemic lupus erythematosus. J Immunol 163:63066313 46. COPE COPE (1999) MxA. http://www.copewithcytokines.de/ copecgi?004415 47. Cella M, Facchetti F, Lanzavecchia A, Colonna M (2000) Plasmacytoid dendritic cells activated by influenza virus and CD40L drive a potent Th1 polarization. Nat Immunol 1:305310 48. Siegal FP, Kadowaki N, Shodell M et al (1999) The nature of the principal type 1 interferon-producing cells in human blood [see comments]. Science 284:1835-1837 49. Fitzgerald-Bocarsly P (1993) Human natural interferon-alpha producing cells. Pharmacol Ther 60:39-62 50. Blanco P, Palucka AK, Gill M et al (2001) Induction of dendritic cell differentiation by IFN-alpha in systemic lupus erythematosus. Science 294:1540-1543. 51. Gutterman JU (1994) Cytokine therapeutics: lessons from interferon alpha. Proc Natl Acad Sci USA 91:1198-1205 52. De Maeyer E, De Maeyer-Guignard J (1998) Type I interferons. Int Rev Immunol 17:53-73 53. Sangfelt O, Erickson S, Castro J et al (1999) Molecular mechanisms underlying interferon-alpha-induced G0/G1 arrest: CKI-mediated regulation of G1 Cdk-complexes and activation of pocket proteins. Oncogene 18:2798-2810 54. COPE COPE (1999) aINF. http://www.copewithcytokines.de/ copecgi?003158: 55. Steinman RM (1991) The dendritic cell system and its role in immunogenicity. Annu Rev Immunol 9:271-296 56. Steinman RM, Inaba K, Turley S et al (1999) Antigen capture, processing, and presentation by dendritic cells: recent cell biological studies. Hum Immunol 60:562-567 57. Banchereau J, Steinman RM (1998) Dendritic cells and the control of immunity. Nature 392:245-252 58. Liu YJ (2001) Dendritic cell subsets and lineages, and their functions in innate and adaptive immunity. Cell 106:259-262 59. Cella M, Sallusto F, Lanzavecchia A (1997) Origin, maturation and antigen presenting function of dendritic cells. Curr Opin Immunol 9:10-16 60. Caux C, Vanbervliet B, Massacrier C et al (1996) CD34+ hematopoietic progenitors from human cord blood differentiate along two independent dendritic cell pathways in response to GM-CSF+TNF alpha. J Exp Med 184:695-706 61. Liu YJ, Kadowaki N, Rissoan MC, Soumelis V (2000) T cell activation and polarization by DC1 and DC2. Curr Top Microbiol Immunol 251:149-159 174 62. Facchetti F, De Wolf-Peters C, Marocolo D, De Vos R (1991) Plasmacytoid monocytes in granulomatous lymphadenitis and in histiocytic necrotizing lymphadenitis. Sarcoidosis 8:170171 63. Pileri S, Kikuchi M, Helbron D, Lennert K (1982) Histiocytic necrotizing lymphadenitis without granulocytic infiltration. Virchows Arch A Pathol Anat Histol 395:257-271 64. Tsang WY, Chan JK, Ng CS (1994) Kikuchi’s lymphadenitis. A morphologic analysis of 75 cases with special reference to unusual features. Am J Surg Pathol 18:219-231 65. Rivano MT, Falini B, Stein H et al (1987) Histiocytic necrotizing lymphadenitis without granulocytic infiltration (Kikuchi’s lymphadenitis). Morphological and immunohistochemical study of eight cases. Histopathology 11:1013-1027 66. Facchetti F, De Wolf Peeters C, Van Den Oord JJ et al (1989) Plasmacytoid monocytes (so-called plasmacytoid T-cells) in Kikuchi’s lymphadenitis. An immunohistologic study. Am J Clin Pathol 92:42-50 67. Hansmann ML, Kikuchi M, Wacker HH et al (1992) Immunohistochemical monitoring of plasmacytoid cells in lymph node sections of Kikuchi-Fujimoto disease by a new pan-macrophage antibody Ki-M1P. Hum Pathol 23:676-680 68. Harris NL, Bhan AK (1987) “Plasmacytoid T cells” in Castleman’s disease. Immunohistologic phenotype. Am J Surg Pathol 11:109-113 69. Danon AD, Krishnan J, Frizzera G (1993) Morpho-immunophenotypic diversity of Castleman’s disease, hyaline-vascular type: with emphasis on a stroma-rich variant and a new pathogenetic hypothesis. Virchows Arch A Pathol Anat Histopathol 423:369-382 70. Horny HP, Feller AC, Horst HA, Lennert K (1987) Immunocytology of plasmacytoid T cells: marker analysis indicates a unique phenotype of this enigmatic cell. Hum Pathol 18:28-32 71. Facchetti F, De Wolf-Peeters C, van den Oord JJ, Desmet VJ (1989) Plasmacytoid monocytes (so-called plasmacytoid T cells) in Hodgkin’s disease. J Pathol 158:57-65 72. Facchetti F, De Wolf-Peeters C, Van den Oord JJ, Desmet VJ (1988) Plasmacytoid T cells in a case of lymphocytic infiltration of skin. A component of the skin-associated lymphoid tissue? J Pathol 155:295-300 73. Eckert F, Schmid U (1989) Identification of plasmacytoid T cells in lymphoid hyperplasia of the skin. Arch Dermatol 125:1518-1524 74. Facchetti F, Boden G, De Wolf Peeters C et al (1990) Plasmacytoid monocytes in Jessner’s lymphocytic infiltration of the skin. Am J Dermatopath 12:363-369 75. Toonstra J, van der Putte SC (1991) Plasmacytoid monocytes in Jessner’s lymphocytic infiltration of the skin. A valuable clue for the diagnosis. Am J Dermatopathol 13:321-328 76. Feldman S, Stein D, Amrute S et al (2001) Decreased interferon-alpha production in HIV-infected patients correlates with numerical and functional deficiencies in circulating type 2 dendritic cell precursors. Clin Immunol 101:201-210 77. Donaghy H, Pozniak A, Gazzard B et al (2001) Loss of blood CD11c(+) myeloid and CD11c(–) plasmacytoid dendritic cells in patients with HIV-1 infection correlates with HIV-1 RNA virus load. Blood 98:2574-2576 78. Geijtenbeek TB, Kwon DS, Torensma R et al (2000) DC-SIGN, a dendritic cell-specific HIV-1-binding protein that enhances trans-infection of T cells. Cell 100:587-597 F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi 79. Pohlmann S, Baribaud F, Lee B et al (2001) DC-SIGN interactions with human immunodeficiency virus type 1 and 2 and simian immunodeficiency virus. J Virol 75:4664-4672 80. Pohlmann S, Soilleux EJ, Baribaud F et al (2001) DC-SIGNR, a DC-SIGN homologue expressed in endothelial cells, binds to human and simian immunodeficiency viruses and activates infection in trans. Proc Natl Acad Sci U S A 98:26702675 81. Underhill DM, Ozinsky A (2002) Toll-like receptors: key mediators of microbe detection. Curr Opin Immunol 14:103-110 82. Aderem A, Ulevitch RJ (2000) Toll-like receptors in the induction of the innate immune response. Nature 406:782-787 83. Jarrossay D, Napolitani G, Colonna M et al (2001) Specialization and complementarity in microbial molecule recognition by human myeloid and plasmacytoid dendritic cells. Eur J Immunol 31:3388-3393 84. Ronnblom L, Alm GV (2001) A pivotal role for the natural interferon alpha-producing cells (plasmacytoid dendritic cells) in the pathogenesis of lupus. J Exp Med 194:F59-63 85. Bengtsson AA, Sturfelt G, Truedsson L (2000) Activation of type I interferon system in systemic lupus erythematosus correlates with disease activity but not with antiretroviral antibodies. Lupus 9:664-671 86. Dumoulin FL, Leifeld L, Sauerbruch T, Spengler U (1999) Autoimmunity induced by interferon-alpha therapy for chronic viral hepatitis. Biomed Pharmacother 53:242-254 87. Morris LF, Lemak NA, Arnett FC Jr. et al (1996) Systemic lupus erythematosus diagnosed during interferon alfa therapy. South Med J 89:810-814 88. Cederblad B, Blomberg S, Vallin H (1998) Patients with systemic lupus erythematosus have reduced numbers of circulating natural interferon-alpha- producing cells. J Autoimmun 11:465-470 89. Farkas L, Beiske K, Lund-Johansen F et al (2001) Plasmacytoid dendritic cells (natural interferon-alpha/beta-producing cells) accumulate in cutaneous lupus erythematosus lesions. Am J Pathol 159:237-243 90. Chen YH, Lan JL (1998) Kikuchi disease in systemic lupus erythematosus: clinical features and literature review. J Microbiol Immunol Infect 31:187-192 91. Tumiati B, Bellelli A, Portioli I, Prandi S (1991) Kikuchi’s disease in systemic lupus erythematosus: an independent or dependent event? Clin Rheumatol 10:90-93 92. Komocsi A, Tovari E, Pajor L, Czirjak L (2001) Histiocytic necrotizing lymphadenitis preceding systemic lupus erythematosus. J Eur Acad Dermatol Venereol 15:476-480 93. Facchetti F, Marocolo D, Morassi ML et al (1991) Cutaneous Kikuchi’s disease. Am J Surg Pathol 15:1012-1014 94. Pileri SA, Facchetti F, Ascani S et al (2001) Myeloperoxidase expression by histiocytes in Kikuchi’s and Kikuchi-like lymphadenopathy. Am J Pathol 159:915-924 95. Kuo TT (1995) Kikuchi’s disease (histiocytic necrotizing lymphadenitis). A clinicopathologic study of 79 cases with an analysis of histologic subtypes, immunohistology, and DNA ploidy. Am J Surg Pathol 19:798-809 96. Fong L, Engleman EG (2000) Dendritic cells in cancer immunotherapy. Annu Rev Immunol 18:245-273 97. Zou W, Machelon V, Coulomb-L’Hermin A et al (2001) Stromal-derived factor-1 in human tumors recruits and alters the function of plasmacytoid precursor dendritic cells. Nat Med 7:1339-1346 98. Prasthofer EF, Prchal JT, Grizzle WE, Grossi CE (1985) F. Facchetti, W. Vermi: Monociti plasmacitoidi 99. 100. 101. 102. 103. 104. 105. Plasmacytoid-T-cell lymphoma associated with chronic myeloproliferative disorder. Am J Surg Pathol 9:380-387 Beiske K, Langholm R, Godal T, Marton PF (1986) T-zone lymphoma with predominance of ‘plasmacytoid T-cells’ associated with myelomonocytic leukaemia – a distinct clinicopathological entity. J Pathol 150:247-255 Facchetti F, De Wolf-Peeters C, Kennes C et al (1990) Leukemia-associated lymph node infiltrates of plasmacytoid monocytes (so-called plasmacytoid T-cells). Evidence for two distinct histological and immunophenotypical patterns. Am J Surg Pathol 14:101-112 Koo CH, Mason DY, Miller R et al (1990) Additional evidence that “plasmacytoid T-cell lymphoma” associated with chronic myeloproliferative disorders is of macrophage/monocyte origin. Am J Clin Pathol 93:822-827 Thomas JO, Beiske K, Hann I et al (1991) Immunohistological diagnosis of ‘plasmacytoid T cell lymphoma’ in paraffin wax sections. J Clin Pathol 44:632-635 Baddoura FK, Chan WC, Caldwell CW et al (1991) Plasmacytoid acute T-cell lymphoma/leukemia. Am J Clin Pathol 96:287-288 Baddoura FK, Hanson C, Chan WC (1992) Plasmacytoid monocyte proliferation associated with myeloproliferative disorders. Cancer 69:1457-1467 Fontana P, Facchetti F, Fiaccavento S (1997) Fine-needle aspiration cytologic findings in a case of lymph node tumor of plasmacytoid monocytes. Diagn Cytopathol 17:57-60 175 106. Facchetti F, Vergoni F, Rossi E et al (2002) Neoplastic nature of nodal plasmacytoid monocytes associated with acute myeloid leukemia. Mod Pathol 15:239A 107. Mongkonsritragoon W, Letendre L, Qian J, Li CY (1998) Nodular lesions of monocytic component in myelodysplastic syndrome. Am J Clin Pathol 110:154-162 108. Ferry JA, Harris NL (1999) Plasmacytoid monocytes? Am J Clin Pathol 111:569 109. Mohty M, Jarrossay D, Lafage-Pochitaloff M et al (2001) Circulating blood dendritic cells from myeloid leukemia patients display quantitative and cytogenetic abnormalities as well as functional impairment. Blood 98:37503756 110. Chaperot L, Bendriss N, Manches O et al (2001) Identification of a leukemic counterpart of the plasmacytoid dendritic cells. Blood 97:3210-3217 111. Kondo M, Scherer DC, Miyamoto T et al (2000) Cell-fate conversion of lymphoid-committed progenitors by instructive actions of cytokines. Nature 407:383-386 112. Liu YJ, Blom B (2000) Introduction: TH2-inducing DC2 for immunotherapy [comment]. Blood 95:2482-2483 113. Manz GM (2001) Plasmacytoid dendritic cells: ready to be tested in vivo. Blood 98:3503 114. Asselin-Paturel C, Boonstra A, Dalod M (2001) Mouse type I IFN-producing cells are immature APCs with plasmacytoid morphology. Nat Immunol 2:1144-1150
