Dogma centrale DNA RNA PROTEINE • Il DNA è un lungo polimero lineare che contiene l’informazione genetica. • L’informazione genetica è contenuta nell’ordine lineare dei nucleotidi. • Si trova nel nucleo delle cellule eucariotiche sotto forma di cromatina o di cromosomi. • Il contenuto di DNA di una cellula e l’informazione in esso contenuta rappresenta il genoma della cellula I nucleotidi sono i monomeri che costituiscono gli acidi nucleici Lo zucchero può essere: • Ribosio nell’RNA • Desossiribosio nel DNA Basi azotate DNA Timina Citosina Guanina Adenina RNA Uracile Citosina Guanina Adenina Appaiamento delle basi nel DNA La struttura del DNA permette la trasmissione dell’informazione genetica nelle diverse cellule di un organismo e nelle successive generazioni La struttura del DNA permette la trasmissione dell’informazione genetica nelle diverse cellule di un organismo e nelle successive generazioni •Duplicazione •Divisione cellulare Classes of eukaryotic cellular RNAs • ribosomal RNA (rRNA) 18S (small subunit) 28S (large subunit) 5.8S (large subunit) 5S (large subunit) • transfer RNA (tRNA) • messenger RNA (mRNA) • heterogeneous nuclear RNA (hnRNA) (precursors of mRNA) • small nuclear RNA (snRNA) U1, U2, U3, U4, U5, U6, U7, U8, U9, U10... • small cytoplasmic RNA (scRNA) 7SL RNA What are the enzymes responsible for the synthesis of these RNAs? The human RNA polymerases Polymerase Location Product RNA polymerase I nucleolus 18S, 28S, 5.8S rRNA RNA polymerase II nucleoplasm hnRNA/mRNA, U1, U2, U4, U5 snRNA RNA polymerase III nucleoplasm mitochondrial RNA polymerase mitochondrion tRNA, 5S RNA, U6 snRNA, 7SL RNA all mitochondrial RNA • TTCAGGAAATGACCCCTTTGCCCCGTCTGAAGGTAGTGCAGAGGCTGCACCTGAGCTGGACCTCTTTGCAATGAAGCC ACCTGAGACCAGTGTTCCTGTAGTTACCCCTACAGCTAGCACAGCCCCTCCGGTTCCCGCAACTGCTCCTTCTCCTGCT CCTGCCGTTGCAGCTGCTGCTGCTGCCACTACTGCTGCCACCGCCGCTGCCACCACCACTACCACCACCTCCGCTGCC ACCGCCACCACTGCTCCTCCTGCTCTAGATATCTTTGGTGATTTATTTGAGTCCACTCCTGAAGTTGCTGCAGCGCCTA AGCCAGATGCTGCTCCTAGCATAGACCTGTTTAGTACAGATGCTTTCTCCTCTCCACCACAAGGGGCCTCTCCTGTGCC TGAGAGTTCTCTCACTGCTGACCTCTTATCTGTGGATGCATTTGCAGCACCATCTCCTGCAACCACTGCCTCGCCAGCA AAGGTGGATTCTTCAGGTGTCATAGACCTTTTTGGGGATGCATTTGGAAGTAGCGCTTCTGAACCCCAACCTGCATCTC AGGCTGCTTCTAGTTCATCAGCATCGGCAGACCTACTAGCTGGATTTGGGGGTTCTTTCATGGCGCCTTCCCCATCTCC AGTGACTCCAGCTCAGAATAACCTGCTACAGCCCAATTTTGAGGCAGCTTTTGGGACAACGCCTTCAACTTCCAGCAGC AGCTCCTTTGATCCATCAGTGTTTGATGGTCTAGGTGATCTTTTGATGCCAACCATGGCACCAGCTGGGCAGCCTGCAC CTGTCTCAATGGTACCACCCAGTCCTGCAATGGCAGCCAGCAAAGCCCTTGGAAGTGATCTTGATTCATCTCTTGCCAG CTTAGTAGGCAATCTTGGAATTTCTGGTACCACAACAAAAAAGGGAGATCTTCAGTGGAATGCTGGAGAGAAAAAGTTG ACTGGTGGAGCCAACTGGCAGCCTAAAGTAGCTCCAGCAACCTGGTCAGCAGGCGTTCCACCAAGTGCACCTTTGCAA GGAGCTGTACCTCCAACCAGTTCAGTTCCTCCTGTTGCCGGGGCCCCATCGGTTGGACAACCTGGAGCAGGATTTGGA ATGCCTCCTGCTGGGACAGGCATGCCCATGATGCCTCAGCAGCCGGTCATGTTTGCACAGCCCATGATGAGGCCCCC CTTTGGAGCTGCCGCTGTACCTGGCACGCAGCTTTCTCCAAGCCCTACACCTGCCAGTCAGAGTCCCAAGAAACCTCC AGCAAAGGACCCATTAGCGGATCTTAACATCAAGGATTTCTTGTAAACAATTTAAGCTGCAATATTTGTGACTGAATAGG AAAATAAATGAGTTTGGAGACTTCAAATAA TAAGATTGATGCTGAGTTTCAAAGGGAGCCACCAGTACCAAACCCAATACTTA TAA CTCATAACTTCTCTTCCAAAATGTGTAACACAGCCGTGAAAGTGAACATTAGGAATATGTACTACCTTAGCTGTTATCCC TACTCTTGAAATTGTAGTGTATTTGGATTATTTGTGTATTGTACGATGTAAACAATGAATGGATGTTACTGATGCCGTTAG TGCTTTTTTGGACTTCACCTGAGGACAGATGATGCAGCTGTTGTGTGGCGAGCTATTTGGAAAGACGTCTGTGTTTTTG AAGGTTTCAATGTACATATAACTTTTGAACAAACCCCAAACTCTTCCCATAAATTATCTTTTCTTCTGTATCTCTGTTACAA GCGTAGTGTGATAATACCAGATAATAAGGAAAACACTCATAAATATACAAAACTTTTTCAGTGTGGAGTACATTTTTCCAA TCACAGGAACTTCAACTGTTGTGAGAAATGTTTATTTTTGTGGCACTGTATATGTTAAGAAATTTTATTTTAAAAAATATAA AGGTTAACGTCCATAATAAATACTTCTCTTTGAAGCTACCTTATCAAGAACGAAAAATCGTATGGGAAGAATCCCCTATTT ATCACTGCTATATTAAAATATATATATTTTAATTATATTTGACAGGTTTTGCATCTAAATTGACCTATTTATTCATTCTTGAT TAAATGCACTGAAAAGTAAAGGGTCTGTTTGTGTCATGTTCATGAAAATGCGGTTAGAGAGGTGCTATTCAAGTGATTCT GAAGGCACCCCAAGGTATATCTGTAATTTAAAGATTACTGCAAATATCTTTACTTTACTGTGGGTTTTTAGTACATCTGTT AATTTAGTGTTTCTTTGTGTGTTTTGTAGACTAGTGTTCTTCCATCCTTCAACTGAGCTCAAAGTAGGTTTTGTTGTAACA TTGTGATTAGGATTTAAACTAATTCAGAGAATTGTATCTTTTACTGTACATACTGTATTCTTTAAGTTTTAATTTGTTGTCAT ACTGTCTGTGCTGATGGCTTGGCTTAAGATTTTGATGCATAAATGAGGTCACTGTTGATCAGTGTTGCTAGTAGCTTGG CAGCTCTTCATAAAAGCATATTGGGTTGGAAAGGTGTTTGCCTATTTTTCAAATTATTTAATAGATGTATGGTACCATTTA AAAGTGGTTGTATCTGAATTTACTGTGGGGATAACATACACTGTAATGGGGAAAAATTACCTAAAACCAATTTCAAAATG GCTTTCTTTGTATTTCAGTTTAAAAACCCAGTGCATGTACGCCCTCTGAGATGCAATAAACACCTTGAACAAAG 3*109 150*106 1-5*106 La cromatina La cromatina è una costruzione sovramolecolare costituita dalle molecole di DNA genomico e da due diverse classi di proteine Le proteine della cromatina sono: • Gli istoni • Proteine non istoniche Gli istoni • Sono presenti nel nucleo in quantità quantità pressochè pressochè uguale a quella del DNA • Sono proteine ricche di carica elettrica positiva perché perché ricche di aminoacidi basici (lisina (lisina e arginina) arginina) • Possono essere suddivise in 5 classi Classi di istoni H1 – H2A – H2B – H3 – H4 Le quattro classi di istoni H2A – H2B – H3 – H4 sono tra le proteine più conservate dal punto di vista evolutivo: la loro sequenza aminoacidica è estremamente simile in tutti gli esseri viventi L’unità base della cromatina è il nucleosoma. E’ costituito da DNA avvolto attorno ad un ottamero di istoni Gli istoni che costituiscono il nucleosoma sono: 2H2A – 2H2B – 2H3 – 2H4 Il nucleo del nucleosoma è costituito da 146 bp di DNA. Due nucleosomi consecutivi sono riuniti dall’istone H1 Il compattamento del DNA nel nucleosoma produce una fibra di cromatina di circa 10 nm di diametro. La cromatina è ulteriormente condensata a formare una fibra di 30 nm di diametro. L’organizzazione base della cromatina è una struttura a collana di perle Un segmento di DNA della lunghezza di 140 bp si avvolge attorno ad ogni ottamero di istoni (la perla), formandovi circa due giri che aderiscono stabilmente alla superficie dell’ dell’ottamero mediante legami ionici La molecola di DNA (il filo) si estende con continuità continuità per tutta la sua lunghezza da un nucleosoma all’ all’altro, lasciando tra loro un tratto di collegamento di circa 60 bp La presenza dell’ dell’istone H1 dà dà origine ad una struttura più più compatta di 30nm (Fibra di 30 nm) DNA PACKAGING Chromatin structure is hyerarchic Eterocromatina struttura più compatta – DNA inattivo Eucromatina struttura più rilassata – DNA attivo GENE ACTIVATOR PROTEIN Covalent histone modifications Braccio corto (p) Braccio lungo (q)