Sistema FlashGel

Sistema FlashGel®
Lonza Rockland, Inc.
www.lonza.com
[email protected]
Supporto scientifico: 00 32 87 321 611
Servizio clienti: 0039 0363 45710
Rockland, ME 04841
Indice
Informazioni sulla sicurezza
2
Pulizia e smaltimento
4
Specifiche
4
Guida rapida al sistema FlashGel®
6
Istruzioni per il sistema FlashGel® per DNA
10
Istruzioni per il sistema FlashGel® per RNA
19
Istruzioni per il sistema di recupero FlashGel®
25
Informazioni per gli ordinativi del sistema FlashGel®
33
Informazioni sulla garanzia e la responsabilità
35
Informazioni sulla licenza e sul marchio
36
1
Sistema FlashGel®
Importanti informazioni sulla sicurezza
Simboli di sicurezza
I seguenti simboli hanno lo scopo di allertare l’utilizzatore su
importanti requisiti operativi, manutentivi e/o di garanzia o
sull’esposizione a possibili pericoli.
ATTENZIONE: Tensione pericolosa
Il contatto può causare decesso e lesioni gravi
Porre attenzione nella messa in funzione di questo sistema in quanto
può sviluppare una tensione e corrente sufficienti a produrre una
scossa letale. Per evitare rischi di lesione, il sistema va messo in
funzione da personale adeguatamente addestrato e sempre in
conformità alle istruzioni fornite.
Prima di accendere l’alimentazione CC, controllare che il cavo nero
sia collegato al terminale negativo e che il cavo rosso sia collegato al
terminale positivo. Non toccare il dock o la cassetta FlashGel®
mentre è accesa l'alta tensione. Non riempire i pozzetti, aggiungere
campioni o estrarre bande mentre i cavi dell’alta tensione sono
collegati all’alimentazione.
La mancata osservanza di queste istruzioni può portare a rischi
personali e/o per il laboratorio e a rendere nulla la garanzia.
Spegnere sempre la fonte di alimentazione CC prima di togliere le
cassette dal dock. Per la massima sicurezza, mettere sempre in
funzione il sistema in un’area isolata, non frequentata e non
2
accessibile a personale non autorizzato. Non mettere mai in funzione
apparecchiatura rotta o danneggiata.
Precauzioni
Per la visualizzazione dei frammenti, il dock FlashGel® utilizza la
tecnologia del transilluminatore Dark Reader® (Clare Chemical
Research, Inc.). È sicuro visualizzare le cassette sul dock illuminato
senza protezione della luce UV. Accendere la luce solo dopo che la
cassetta è al suo posto. Non guardare direttamente nella luce.
ATTENZIONE. Usare la maschera FlashGel® per bloccare la luce
dalla seconda fila dei pozzetti quando vengono usate le cassette di
recupero a doppia fila o FlashGel®.
Indossare guanti, camici e occhiali di sicurezza quando si
manipolano le cassette FlashGel® . Il gel ed la soluzione tampone
nelle cassette FlashGel® contengono un gel di acidi nucleici
proprietario che è un potenziale mutageno. Attenersi alle normative
locali e nazionali in vigore per la manipolazione e smaltimento di
questi materiali.
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione non invertire gli elettrodi per far correre il campione in
senso inverso.
Condizioni operative del dock FlashGel®
Limiti massimi
Unità elettroforesi: 300 V CC alta tensione, ingresso CC
potenza 15 watt
corrente 50 mA
Luce del dock: 18 V CC bassa tensione, ingresso CC
Condizioni ambientali
Condizioni operative:
• Temperatura: 15°C-35°C
• Umidità: 15%-85% umidità relativa, senza condensa
Conservazione e condizioni per il trasporto (FlashGel® Dock)
• Temperatura: 2°C-60°C
• Umidità: 15%-85% umidità relativa, senza condensa
3
Pulizia e smaltimento
Procedura di pulizia
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione, non pulire il dock mentre è collegato all’alimentazione ad
alta tensione.
Pulire il dock FlashGel® con un panno imbevuto in acqua o soluzione
detergente delicata. Non immergerlo!
Smaltimento
Il colorante presente nelle cassette FlashGel® è un potenziale mutageno.
Attenersi alle normative locali e nazionali in vigore per lo smaltimento di
questi materiali.
Specifiche
Range di separazione:
cassette di DNA 1,2%:
più lunghi)
cassette di DNA 2,2%:
cassette di RNA 1,2%:
cassette recupero 1,2%:
50 bp – 4 kb (fino a 10 kb con tempi di corsa
10 bp – 1 kb
0,5 kb – 9 kb
50 bp – 4 kb
Conservazione delle cassette:
Cassette di DNA:
18°C-26°C per 5 mesi dalla data di fabbricazione
Cassette di RNA:
Inviare una richiesta
Cassette di recupero:
18°C-26°C per 5 mesi dalla data di fabbricazione
Volume del pozzetto:
12 + 1 pozzetti:
Non superare i 5 μl di
campione/pozzetto
16 + 1 pozzetti:
Non superare i 5 μl di
campione/pozzetto
8 + 1 pozzetti:
Non superare i 12 μl di
campione/pozzetto
Dimensione del gel:
70 mm (Lungh.) x 84 mm (Largh.) x 2 mm (Alt.)
Dimensione cassetta:
115 mm (Lungh.) x 107 mm (Largh.) x 17 mm (Alt.)
4
Dimensione del dock:
134 mm (Lungh.) x 120 mm (Largh.) x 54 mm (Alt.)
Contenuto della cassetta
Gel di agarosio, colorante e soluzione tampone
Valori nominali dell’apparecchiatura
Ingresso elettroforesi (CC ad alta tensione):
Tensione: 300 V CC
Potenza: 15 W
Corrente: 50 mA
Ingresso luce del dock (CC a bassa tensione):
Tensione: 18 V CC
Corrente: 1,11 A
Ingresso trasformatore della luce del dock (tensione linea CA):
Tensione: 100-240 VCA, 50-60 Hz
Corrente: 1,0 A
Collegamenti elettrici:
Alta tensione (elettroforesi): spinotti a banana retraibili e schermati
Bassa tensione (luce): Jack da 2,1 x 5,5 x 14 mm
Alimentazione a bassa
tensione per la luce di
visualizzazione
Dock FlashGel®
Cavi ad alta tensione
per elettroforesi
Interruttore
della luce
Jack a bassa
Supporto scientifico: 800-521-0390
[email protected]
5
Guida rapida al sistema FlashGel®
Punti importanti
• Non superare il volume di campione di 5 μl per linea per 12 + 1
pozzetti e di 16 + 1 cassette di pozzetti; o il volume di 12 μl per
linea per 8 + 1 cassette di pozzetti.
• Le concentrazioni di campione ottimali sono circa 1/5 della
tipica concentrazione di banda di un gel di bromuro di etidio.
•
Per risultati ottimali lavare i pozzetti del campione con acqua
prima di caricarli e usare il colorante di caricamento FlashGel®
Loading Dye, i marcatori FlashGel® Markers ed il tampone di
recupero FlashGel® Recovery Buffer.
•
Quando si effettuano corse su cassette a doppia fila usare la
maschera FlashGel®.
• Quando si recuperano i campioni, usare i vetri di
visualizzazione FlashGel®.
Istruzioni
1. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9) per la preparazione del
campione e le condizioni di corsa consigliate.
2. Togliere i sigilli bianchi del pozzetto dalla cassetta. Non togliere i
sigilli trasparenti di sfiato laterali.
3. Lavare i pozzetti del campione con acqua distillata o deionizzata.
Inclinare la cassetta per spostare il liquido in eccesso sul bordo e
tamponare assorbendo con un panno privo di pilucchi. Non
tamponare direttamente i pozzetti.
®
4. Inserire la cassetta nel dock. Inserire la maschera FlashGel
nella linea centrale dei pozzetti del campione se si utilizzano le
cassette a doppia linea o le cassette di recupero.
5. Caricare i campioni. I campioni da recuperare vanno caricati nei
pozzetti dei campioni della linea superiore.
6
6. Inserire i cavi di alta tensione, accendere l’alimentazione e
impostare la tensione consigliata.
7. Inserire l’alimentazione a bassa tensione e accendere la luce.
8. Se si utilizzano cassette di DNA e RNA standard, eseguire la
corsa per il tempo consigliato o fino a quando è completata la
separazione dei frammenti desiderati. Se si utilizzano cassette di
recupero, eseguire e osservare la migrazione del campione;
prima che il campione desiderato raggiunga i pozzetti di recupero
(2a -linea) arrestare la corsa e disconnettere i cavi di alta tensione
(completare i passi 9 – 13).
9. Eliminare per assorbimento la soluzione tampone in eccesso dal/i
pozzetto/i di recupero e aggiungere 20 μl di tampone di recupero
FlashGel® Recovery Buffer.
®
10. Togliere la maschera FlashGel , collegare di nuovo i cavi di
tensione e riavviare l’alimentazione. Per osservare la migrazione
di banda usare gli occhiali di visualizzazione FlashGel®.
11. Quando la banda di interesse è migrata verso il centro del
pozzetto di recupero, spegnere l’alimentazione e scollegare i cavi
di tensione. Usare una pipetta per rimuovere con cura il tampone
di recupero (contenente il DNA) dal pozzetto di recupero.
12. Se necessario, il processo (aggiunta di soluzione tampone di
recupero, elettroforesi, recupero) può essere ripetuto per
aumentare il recupero di carichi di DNA più elevati.
®
13. Fotografare utilizzando la fotocamera FlashGel o un’altra
fotocamera standard e il transilluminatore.
7
Tabella 1 – Preparazione consigliata del campione e condizioni della
corsa
Cassette di DNA
Cassette di RNA
Range di
separazione
1,2%: 50 bp – 10 kb
2,2%: 10 bp – 1 kb
La separazione di
frammenti > 4 kb verrà
migliorata facendo delle
corse più lunghe ad una
tensione più bassa
1,2%: 0,5 kb – 9 kb
Preparazione del
campione
Per risultati ottimali,
diluire i campioni di DNA
nel colorante di
caricamento 1X
FlashGel® Loading Dye
Campioni denaturati
di DNA: Preparare i
campioni in
soluzione tampone
di campione di
formaldeide al 50%
e acqua priva di
RNasi; denaturare
per 5 minuti a 65°C.
Singola fila: 275 V per 27 minuti
Campioni di RNA
nativi: Utilizzare il
colorante di
caricamento
FlashGel® Loading
Dye
I livelli ottimali di
carico dell’RNA
variano in base al
campione di RNA;
per risultati ottimali
non superare 200
ng/banda in un
carico di 5 μl
Singola fila: 225 V
per 4-8 minuti
Doppia fila: 275 V per 25 minuti
Doppia fila: 225 V
per 3-5 minuti
Concentrazioni del I livelli di carico ottimali
campione e limiti di del DNA sono 5-20
ng/banda in un carico di
rilevamento
5 μl; per risultati ottimali
non superare 20
ng/banda
Tensione e tempo
della corsa
8
Cassette di
recupero
1,2%: 50 bp – 10 kb
La separazione di
frammenti > 4 kb
verrà migliorata
facendo delle corse
più lunghe ad una
tensione più bassa
Per risultati ottimali,
diluire i campioni di
DNA nel colorante di
caricamento 1X
FlashGel® Loading
Dye
I livelli di carico
ottimali del DNA sono
50-500 ng/banda in
volumi fino a 12 μl
275 V per il tempo
necessario alle
bande di elettroforesi
per raggiungere i
pozzetti di recupero
varia in base alla
dimensione dei
frammenti da 3+
minuti
Tempo massimo
della corsa: 12-14
minuti
Concentrazione e
volume recuperati
Marker
raccomandati
Cassette di DNA
Cassette di RNA
N/A
N/A
cassette 1,2%: Marker
per DNA FlashGel® 100
bp–4 kb
Marker per RNA
FlashGel® 0.5 kb–9
kb
Cassette di
recupero
I recuperi del
campione sono in
genere dell’ 80-90%,
in base al frammento
I volumi di recupero
in genere sono di 1550 μl
Marker per DNA
FlashGel® 100 bp-3
kb
FlashGel®
QuantLadder
100 bp-3 kb
cassette 2,2%: Marker
per DNA FlashGel® 50
bp - 1,5 kb
Cassette a doppia fila:
Marker per DNA
FlashGel® 100 bp - 3 kb
9
Istruzioni per il sistema FlashGel® per DNA
Introduzione
Il sistema FlashGel® è indicato per la separazione e l’analisi rapida
del DNA.
Cassette di DNA FlashGel®:
• Dimensionamento e quantizzazione di PCR o frammenti di
restrizione da 10 bp – 10 kb
• Conferma dell’amplificazione PCR
La separazione di frammenti di DNA può essere monitorata in tempo
reale sul banco di laboratorio senza l’uso dell’illuminazione UV.
I frammenti separati con il sistema FlashGel® possono essere
fotografati con la fotocamera FlashGel® o altri sistemi standard di
documentazione.
Le cassette di DNA FlashGel® non sono consigliate per il recupero.
Utilizzare le cassette di recupero FlashGel® (pagina 25) per il DNA
da recuperare.
Informazioni importanti
Condizioni della corsa e risoluzione
Il sistema FlashGel® è progettato per una separazione rapida, ad alta
tensione di frammenti da 10 bp a 10 kb. Le corse nelle cassette
possono essere effettuate a tensioni più basse per tempi più lunghi
per migliorare la separazione dei frammenti > 4 kb (pagina 18).
Monitorare la corsa e ottimizzare le condizioni. I frammenti
correranno più velocemente su un dock caldo. Se necessario
ridurre il tempo della corsa o abbassare la tensione. Consultare la
tabella 1 (pag. 8-9) per le condizioni di corsa consigliate.
Visualizzazione di bande sul dock FlashGel®
Le bande di DNA e del marker saranno visibili sul dock illuminato alla
tipica illuminazione di laboratorio. Il grado di visibilità può variare in
base all’intensità complessiva della luce nel laboratorio. Le bande si
possono visualizzare meglio osservandole direttamente sul dock in
uno spazio che riduca al minimo l’intensità della luce e il riflesso.
In alternativa, la separazione di banda può essere visualizzata su uno
schermo di computer con l’ausilio di una fotocamera FlashGel® .
10
Per garantire un’idonea visibilità di un marker per la visualizzazione
della corsa sul dock, usare i marker per DNA FlashGel® oppure i
FlashGel® QuantLadders. Consultare la tabella 2 (pag. 14) e la figura
2 (pag. 16) per maggiori informazioni sulle concentrazioni di DNA
visibili alle varie condizioni.
Le bande di DNA sono visibili sul dock durante tutta la corsa.
Colorante di caricamento e marker
Il sistema FlashGel® è compatibile con i coloranti di caricamento di
gel e marker standard. Il colorante blu di bromofenolo non migra
nelle cassette FlashGel® ; tuttavia si possono usare i campioni
contenenti blu di bromofenolo in quanto la migrazione dei campioni
non ne è influenzata. Per risultati ottimali, usare il colorante di
caricamento FlashGel® Loading Dye ed i marker FlashGel® o
FlashGel® QuantLadder.
Preparazione del gel per la corsa
Per ottenere risultati ottimali, usare una pipetta di travaso o un
flacone da spruzzo per lavare i pozzetti con acqua distillata o
deionizzata prima di caricare i campioni o i marker. Questo
assicurerà un’adeguata umidità nei pozzetti. Lavare i pozzetti, quindi
inclinare la cassetta e usare un panno privo di pilucchi o un piccolo
pezzo di carta assorbente per eliminare l’eccesso di liquido dalla
cassetta. Non tamponare direttamente i pozzetti.
Livelli di sensibilità del DNA
Il sistema FlashGel® utilizza una colorazione esclusiva che è 5-20
volte più sensibile della colorazione di bromuro di etidio. In generale,
usare concentrazioni di DNA per banda di 1/5 di quelle normalmente
usate per il rilevamento del bromuro di etidio.
Le concentrazioni ottimali di caricamento nelle cassette FlashGel®
sono di 5-10 ng di DNA per banda. Concentrazioni inferiori ai 5 ng
per banda potrebbero non essere visibili sul dock; anche se
concentrazioni inferiori a 0,10 ng per banda possono essere
visualizzate utilizzando sistemi di rilevazione dati e foto di gel. Il limite
massimo di visualizzazione è di 80 ng di DNA per banda; tuttavia,
concentrazioni superiori ai 20 ng per banda possono risultare in una
visualizzazione distorta della banda stessa. Le concentrazioni di
DNA da caricare possono essere regolate per fornire immagini
ottimali a seconda del sistema di analisi di immagine utilizzato.
11
A causa della sensibilità del sistema FlashGel®, la maggior parte dei
campioni di DNA va diluita ed il volume di carico per pozzetto non
deve superare i 5 μl.
Per risultati ottimali, diluire i campioni di DNA nel colorante di
caricamento 1X FlashGel® Loading Dye in modo tale che 5 μl di
campione contengano 5-10 ng di DNA per banda.
Istruzioni sulla corsa del gel
ATTENZIONE. Durante la manipolazione delle cassette
FlashGel® indossare guanti, camice da laboratorio e occhiali di
protezione.
1. Preparare i campioni. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9) per la
preparazione del campione consigliata.
2. Aprire la busta e togliere la cassetta.
NOTA. Se la casetta è umida, asciugarla con un panno asciutto.
NOTA. Fra il gel e la cassetta potrebbero essere presenti
delle tasche d’aria che non influenzeranno la migrazione della
banda.
3. Collocare la cassetta su una superficie piatta e tirare la linguetta
per rimuovere il sigillo bianco del pozzetto. Non togliere i sigilli
trasparenti che ricoprono i fori di sfiato laterali.
4. Lavare tutti i pozzetti del campione con acqua distillata o
deionizzata. Inclinare la cassetta e usare un panno privo di
pilucchi o un piccolo pezzo di carta assorbente per togliere il
liquido in eccesso. Non tamponare direttamente sui pozzetti.
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione non bagnare i pozzetti quando la cassetta è collegata
all’alimentazione ad alta tensione.
12
NOTA. Per risultati ottimali, lavare i pozzetti con AccuGENE®
Molecular Biology Water (Cat. n. 51200).
5. Collocare la cassetta sul dock e farla scorrere in posizione; la
cassetta dovrebbe scattare nel dock.
6. Caricare i campioni ed i marker. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9)
per la preparazione del campione e i marker consigliati.
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione non caricare i campioni mentre la cassetta è collegata
all’alimentazione ad alta tensione.
7. Collegare l’alimentazione a bassa tensione sul dock inserendo il
cavo nella presa sul retro del dock e poi collegare l’alimentazione.
Questa è l’alimentazione per la fonte luminosa.
8. Accendere la luce del dock premendo il pulsante arancione sulla
parte alta dell’unità.
NOTA. La luce si spegnerà automaticamente dopo 10 minuti.
Riavviare premendo il pulsante arancione.
9. Collegare i cavi dell’alta tensione all’alimentazione e impostare la
corrente alla tensione consigliata (tabella 1, pag. 8-9).
NOTA. Le correnti iniziali tipiche dovrebbero rientrare in un
intervallo di 20-25 mA per i gel di DNA. Far correre fino a quando
si ottiene la separazione desiderata per i frammenti di interesse.
Nelle condizioni descritte, i frammenti di DNA di 50 bp-100 bp
migreranno fuori dal gel in 7-8 minuti. Consultare la figura 1
(pagina 15) per risultati di separazione a vari tempi di corsa.
NOTA. L’esecuzione di più cassette in rapida successione
potrebbe richiedere una leggera regolazione delle condizioni di
corsa poiché le bande vanno più veloci quando il dock diventa più
caldo. Monitorare la separazione e ridurre la tensione e il tempo
della corsa se necessario.
NOTA. È normale una certa espressione di soluzione tampone
dai pozzetti.
13
ATTENZIONE. Manipolare le cassette solo dopo aver spento
la tensione e disinserito i cavi.
10. Far correre le cassette di DNA fino a quando si raggiunge la
separazione desiderata per i frammenti di interesse.
11. Spegnere la tensione e scollegare i cavi dall’alimentazione prima
di togliere le cassette.
12. Registrare i dati del gel utilizzando una fotocamera FlashGel®,
mediante fotografia Polaroid®, o mediante altri sistemi di cattura
dell’immagine. Vedere la figura 2 (pagina 16) per dettagli sulle
fotocamere tipiche.
Informazioni di riferimento
Tabella 2. Quantità di DNA visibile sulle cassette di DNA
FlashGel® in varie condizioni
Frammento di 1500
bp
1,6 – 3,2 ng
Frammento di 400 bp
Visualizzati in camera
oscura
0,39 – 0,78 ng
0,39 – 0,78 ng
Visualizzati con
fotocamera FlashGel®
0,10 – 0,20 ng
0,10 – 0,20 ng
FlashGel® Camera Photo
0,10 – 0,20 ng
0,10 – 0,20 ng
Visualizzati con Dark
Reader®
Transilluminatore
Dark Reader® Photo
0,05 – 0.01 ng
0,10 – 0,20 ng
0,10 – 0,20 ng
0,10 – 0,20 ng
Visualizzati con UV
0,39 – 0,78 ng
0,39 – 0,78 ng
UV Photo
0,39 – 0,78 ng
0,39 – 0,78 ng
Visualizzati in luce
ambiente
14
1,6 – 3,2 ng
Fig 1. Esempi di separazione a vari tempi di corsa a 275V su una
cassetta di DNA FlashGel® (1,2%, 12+1 fila singola di pozzetti)
2 minuti
4 minuti
8 minuti
6 minuti
10 minuti
Linee campione da sinistra a destra:
Linea 1. Marker per DNA FlashGel® 100/200/300/500/800/1250/2000/4000 bp
(5 μl carico, diluizione 1:5)
Linea 2. FlashGel® QuantLadder 100/250/400/500/1500 bp
(5 μl carico, diluizione 1:5)
Linea 3. Lonza Marker 50 bp – 2500 bp (3 μl di carico, diluizione 1:5)
Linea 4. Lonza Ladder 100 bp (3 μl di carico, diluizione 1:15 )
15
Fig 2. Rilevamento di frammenti di DNA su cassette di DNA
FlashGel®
•
•
•
•
•
Illuminare le cassette usando transilluminatori UV a luce azzurra,
come ad esempio il transilluminatore Dark Reader® .
Fotografare con fotocamera FlashGel® o con qualsiasi sistema
usato per i gel standard colorati con bromuro di etidio
Per il film Type 57 Polaroid® con transilluminatore UV, iniziare con
esposizioni di 1-2 secondi.
Per sistemi CCD, usare il filtro di bromuro di etidio presente nel
sistema.
Il marker di DNA FlashGel® (100 bp - 4 kb) viene caricato
nell'ultima linea a destra.
Le seguenti immagini presentano serie di diluizioni di frammenti di
400 bp e 1500 bp
Transilluminatore Dark Reader® con coperchio arancio, fotocamera CCD
con filtro EtBr, esposizione di 3 secondi
75
50
25
12,5 6,25 3,13 1,56 0,78 0,39 0,20 0,10 0,05 ng/linea
Transilluminatore UV, fotocamera Polaroid® con filtro EtBr, esposizione di 3
secondi
75
50
25 12,5 6,25 3,13 1,56 0,78 0,39 0,20 0,10 0,05 ng/linea
16
Fig. 3. Separazione di marker e frammenti di DNA su una
cassetta di DNA FlashGel® (2,2%, 16 + 1 doppia fila di pozzetti)
Linee del campione:
Linee 1, 7, 13: Marker FlashGel® 50 bp – 1 kb
(consigliato per cassette 2,2%)
Linee 2, 8, 14: Marker FlashGel® 100 bp – 3 kb
(consigliato per cassette a doppia fila
Linee 6 e 12: FlashGel® QuantLadder
Linee 3, 4, 5/9, 10, 11/15, 16, 17: carichi da 8 ng di frammenti di DNA
di 150 bp, 600 bp e 800 bp
17
Fig. 4. Miglioramento della separazione di grandi frammenti di DNA sul
sistema FlashGel®
2 – 4 kb
3 - 10 kb
Corse da 275 Volt
Corse da 50 Volt
6
6 min
7 min
9,5 min
40 min
2 – 4 kb
3 – 10 kb
Corse da 275 Volt Corse da 50 Volt
47 min 60 min 75 min
Dimensioni dei frammenti:
2000/2500/3000/4000 bp
7 min
9,5 min
50 min
75 min
Dimensioni dei frammenti:
3000/4000/5000/7000/10000 bp
18
Istruzioni per il sistema FlashGel® per RNA
Introduzione
Il sistema FlashGel® è indicato per la separazione rapida e l’analisi di
RNA, incluso:
• Verifica e analisi dell’RNA totale 0,5 kb – 9 kb
• Controllo della degradazione dell’RNA
• Controlli rapidi dell’RNA nativo
I frammenti separati con il sistema FlashGel® possono essere
fotografati con la fotocamera FlashGel® o altri sistemi standard di
documentazione.
Le cassette di RNA FlashGel® non sono consigliate per il recupero.
Informazioni importanti
Condizioni della corsa e risoluzione
Il sistema FlashGel® è progettato per separazioni rapide ad alta
tensione. Le cassette possono essere analizzate a tensioni più
basse per tempi più lunghi per migliorare la separazione dei
frammenti di peso molecolare più elevato. Monitorare la corsa e
ottimizzare le condizioni. I frammenti correranno più velocemente su
un dock caldo. Se necessario ridurre il tempo della corsa o
abbassare la tensione. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9) per le
condizioni di corsa consigliate.
Visualizzazione di bande sul dock FlashGel®
Le bande di RNA e del marker saranno visibili sul dock illuminato alla
tipica illuminazione di laboratorio. Il grado di visibilità può variare in
base all’intensità complessiva della luce nel laboratorio. Le bande si
possono visualizzare meglio osservandole direttamente sul dock in
uno spazio che riduca al minimo l’intensità della luce e il riflesso.
Le bande di RNA saranno visibili sul dock per i primi 3-4 minuti della
corsa, quindi scompariranno e riappariranno dopo un periodo di
continuazione post-corsa di > 10 minuti. Il marker di DNA FlashGel®
può essere utilizzato per monitorare la corsa dell’RNA.
Colorante di caricamento e marker
Il sistema FlashGel® per RNA è compatibile con i coloranti di
caricamento di formaldeide standard e con i marker di RNA. Il
colorante blu di bromofenolo non migra nelle cassette FlashGel® ;
19
tuttavia si possono usare i campioni contenenti blu di bromofenolo in
quanto la migrazione dei campioni non ne è influenzata. Per risultati
ottimali utilizzare soluzione tampone di campione di formaldeide
Lonza oppure colorante di caricamento FlashGel® Loading Dye (per
l’RNA nativo), e marker di RNA FlashGel®.
Preparazione del gel per la corsa
Per ottenere risultati ottimali, usare una pipetta di travaso o un
flacone da spruzzo per lavare i pozzetti con acqua priva di RNasi
prima di caricare i campioni o i marker. Questo assicurerà
un’adeguata umidità nei pozzetti. Lavare i pozzetti, quindi inclinare la
cassetta e usare un panno privo di pilucchi o un piccolo pezzo di
carta assorbente per eliminare l’eccesso di liquido dalla cassetta.
Non tamponare direttamente i pozzetti.
Livelli di sensibilità dell’RNA
Il sistema FlashGel® utilizza una colorazione esclusiva che è 5-20
volte più sensibile della colorazione di bromuro di etidio e rileverà
quantità di RNA di <10 ng per banda.
Per l’RNA denaturato, diluire i campioni con soluzione tampone di
caricamento di formaldeide in modo tale che un carico di 5 μl
contenga < 200 ng di RNA per banda.
Per l’RNA nativo, diluire i campioni in colorante di caricamento
FlashGel® Loading Dye in modo tale che un carico di 5 μl contenga
< 200 ng di RNA per banda.
Istruzioni sulla corsa del gel
ATTENZIONE. Durante la manipolazione delle cassette
FlashGel® indossare guanti, camice da laboratorio e occhiali di
protezione.
1. Preparare i campioni. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9) per la
preparazione consigliata del campione.
2. Aprire la busta e togliere la cassetta.
NOTA. Se la casetta è umida, asciugarla con un panno asciutto.
20
NOTA. Fra il gel e la cassetta potrebbero essere presenti delle
tasche d’aria che non influenzeranno la migrazione della banda.
3. Collocare la cassetta su una superficie piatta e tirare la linguetta
per rimuovere il sigillo bianco del pozzetto. Non togliere i sigilli
trasparenti che ricoprono i fori di sfiato laterali.
4. Lavare tutti i pozzetti del campione con acqua priva di RNasi.
Inclinare la cassetta e usare un panno privo di pilucchi o un
piccolo pezzo di carta assorbente per togliere il liquido in eccesso.
Non tamponare direttamente i pozzetti.
NOTA. Per risultati ottimali, lavare i pozzetti con AccuGENE®
Molecular Biology Water (Cat. #51200).
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione non bagnare i pozzetti quando la cassetta è collegata
all’alimentazione ad alta tensione.
5. Collocare la cassetta sul dock e farla scorrere in posizione; la
cassetta dovrebbe scattare nel dock.
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione non caricare i campioni mentre la cassetta è collegata
all’alimentazione ad alta tensione.
6. Caricare i campioni ed i marker. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9)
per la preparazione del campione e i marker consigliati.
ATTENZIONE. Usare la maschera FlashGel® per bloccare la
luce dalla seconda fila dei pozzetti quando vengono usate le
cassette di recupero a doppia fila.
7. Collegare l’alimentazione a bassa tensione sul dock inserendo il
cavo nella presa sul retro del dock e poi collegare l’alimentazione.
Questa è l’alimentazione per la fonte luminosa.
8. Accendere la luce del dock premendo il pulsante arancione sulla
parte alta dell’unità.
21
NOTA. La luce si spegnerà automaticamente dopo 10 minuti.
Riavviare premendo il pulsante arancione.
9. Collegare i cavi dell’alta tensione all’alimentazione e impostare la
corrente alla tensione consigliata (tabella 1, pag. 8-9).
NOTA. Le correnti di avvio tipiche dovrebbero essere di 25 - 30
mA. Far correre fino a quando si ottiene la separazione desiderata
per i frammenti di interesse.
NOTA. L’esecuzione di più cassette in rapida successione
potrebbe richiedere una leggera regolazione delle condizioni di
corsa poiché le bande vanno più veloci quando il dock diventa più
caldo. Monitorare la separazione e ridurre la tensione e il tempo
della corsa se necessario.
NOTA. È normale una certa espressione di soluzione tampone
dai pozzetti durante la corsa.
10. Far correre le cassette RNA per 8 minuti, quindi spegnere la
tensione e scollegare i cavi dall’alimentazione prima di togliere le
cassette.
ATTENZIONE. Manipolare le cassette solo dopo aver spento
la tensione e disinserito i cavi.
11. Togliere la cassetta e lasciarla a temperatura ambiente per >10
minuti o fino a quando i frammenti sono visibili all’intensità
desiderata. L’intensità massima viene raggiunta in circa 45 minuti.
®
12. Registrare i dati del gel utilizzando una fotocamera FlashGel , o
mediante fotografia Polaroid®, o con altri sistemi di cattura
dell’immagine. Fare riferimento alle figure 5 e 6 (pag. 23-24) per
immagini RNA.
22
Informazioni di riferimento
Fig. 5. Rilevamento di frammenti di RNA su cassetta di RNA
FlashGel®
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12 13
Corsa di una cassetta di 8 minuti a 225V; fotografata 20 minuti dopo
la corsa.
Linee del campione:
Linee 1, 6, 11: Marker di DNA (per visualizzazione durante la corsa)
Linee 2, 7, 12: Ladder di RNA di 100 ng
Linee 3, 8, 13: 100 ng di RNA totale di E. coli (Ambion)
Linee 4,9: ~100 ng di RNA totale di S. cervevisiae purificato con
RiboPure™ Kit di lievito (Ambion)
Linee 5, 10: 100 ng di RNA totale di timo di topo (Ambion)
23
Fig. 6. Rapido controllo di frammenti di RNA nativo su una
cassetta di RNA FlashGel® (1,2%, 12+1 fila singola)
1
2
3
4
Corsa della cassetta per 4 minuti a 225V; seguita da una
generazione dell'immagine immediata.
Linee del campione:
Linea 1: Marker Lonza, 50 ng
Linea 2: RNA totale di E. Coli, 50 ng
Linea 3: Marker Lonza, 250 ng
Linea 4: RNA totale di E. Coli, 250 ng
24
Istruzioni per il sistema di recupero FlashGel®
Introduzione
Il sistema di recupero FlashGel® è consigliato per la rapida
separazione e recupero di frammenti di DNA da 100 bp – 4 kb.
La separazione di frammenti di DNA può essere monitorata in tempo
reale e i frammenti possono essere recuperati sul banco del
laboratorio senza uso di illuminazione UV o necessità di escissione
della banda.
I frammenti separati con il sistema di recupero FlashGel® sono
compatibili con le applicazioni di biologia molecolare standard
(amplificazione PCR, legazione e clonazione, ecc.)
Informazioni importanti
Condizioni della corsa e risoluzione
Il sistema per recupero FlashGel® è progettato per separazioni e
recupero rapidi ad alta tensione. Le cassette possono essere
analizzate a tensioni più basse per tempi più lunghi per migliorare la
separazione dei frammenti più grandi. Monitorare la corsa e
ottimizzare le condizioni per il frammento di interesse. I frammenti
correranno più velocemente su un dock caldo. Se necessario
ridurre il tempo della corsa o abbassare la tensione. Non superare
un tempo di corsa totale di 14 minuti. Consultare la tabella 1 (pag. 89) per le condizioni di corsa consigliate.
Visualizzazione di bande sul dock FlashGel®
Le bande di DNA e del marker saranno visibili sul dock illuminato alla
tipica illuminazione di laboratorio. Il grado di visibilità può variare in
base all’intensità complessiva della luce nel laboratorio. Le bande si
possono visualizzare meglio osservandole direttamente sul dock in
uno spazio che riduca al minimo l’intensità della luce e il riflesso.
Per garantire un’idonea visibilità di un marker per il monitoraggio
della corsa, usare i marker per DNA FlashGel® oppure FlashGel®
QuantLadders. Consultare la tabella 2 (pag. 14) per informazioni
sulle concentrazioni di DNA visibili a varie condizioni.
Colorante di caricamento e marker
Il sistema FlashGel® è compatibile con i coloranti di caricamento di
gel e marker standard. Il colorante blu di bromofenolo non migra
25
nelle cassette FlashGel®; tuttavia si possono usare i campioni
contenenti blu di bromofenolo in quanto la migrazione dei campioni
non ne è influenzata. Per risultati ottimali, usare il colorante di
caricamento FlashGel® Loading Dye ed i marker FlashGel® o
FlashGel® QuantLadder.
Preparazione del gel per la corsa
Per ottenere risultati ottimali, usare una pipetta di travaso o un
flacone da spruzzo per lavare i pozzetti con acqua distillata o
deionizzata prima di caricare i campioni o i marker. Questo
assicurerà un’adeguata umidità nei pozzetti. Lavare i pozzetti, quindi
inclinare la cassetta e usare un panno privo di pilucchi o un piccolo
pezzo di carta assorbente per eliminare l’eccesso di liquido dalla
cassetta. Non tamponare direttamente i pozzetti.
Per risultati ottimali, diluire il campione di DNA nel colorante di
caricamento 1X FlashGel® Loading Dye in modo che il campione (12
μl di carico massimo) contenga la quantità consigliata di DNA per
banda.
Livelli di sensibilità del DNA
Il sistema FlashGel® utilizza una colorazione proprietaria che è 5-20
volte più sensibile della colorazione di bromuro di etidio. In generale,
usare concentrazioni di DNA per banda di 1/5 di quelle normalmente
usate per il rilevamento del bromuro di etidio.
Il livelli ottimali di carico del DNA sulle cassette di recupero FlashGel®
sono di 50-500 ng per banda. I livelli di DNA possono essere regolati
per fornire le migliori prestazioni per i frammenti di interesse. Elevati
carichi di DNA potrebbero non fornire un’adeguata risoluzione se il
frammento di interesse è di dimensioni relativamente vicine a quelle
di altri frammenti contaminanti.
Recupero del DNA
Per un’efficacia di recupero ottimale (soprattutto per frammenti di
DNA più grandi) aggiungere soluzione tampone di recupero
FlashGel® Recovery Buffer ai pozzetti di recupero prima di estrarre i
frammenti di DNA.
Per identificare condizioni ottimali per i frammenti recuperati utilizzare
il frammento di controllo FlashGel® Control Fragment fornito nella
confezione di recupero FlashGel® Recovery Starter Pack.
26
Risoluzione del DNA recuperato
Per una risoluzione ottimale del DNA recuperato, diluire il campione
da far scorrere sul gel successivo ad un rapporto minimo di 1:1 con
acqua (ad es.: 2 ul di DNA recuperato, 2 ul di acqua, 1 ul di colorante
di carico 5X FlashGel® Loading Dye).
Istruzioni per la corsa del gel
ATTENZIONE. Durante la manipolazione delle cassette
FlashGel® indossare guanti, camice da laboratorio e occhiali di
protezione.
1. Preparare i campioni. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9) per la
preparazione del campione consigliata.
2. Aprire la busta e togliere la cassetta.
NOTA. Se la casetta è umida, asciugarla con un panno asciutto.
NOTA. Fra il gel e la cassetta potrebbero essere presenti delle
tasche d’aria che non influenzeranno la migrazione della banda.
3. Collocare la cassetta su una superficie piatta e tirare la linguetta
per rimuovere il sigillo bianco del pozzetto. Non togliere i sigilli
trasparenti che ricoprono i fori di sfiato laterali.
4. Lavare entrambe le linee di pozzetti con acqua distillata o
deionizzata. Inclinare la cassetta e usare un panno privo di
pilucchi o un piccolo pezzo di carta assorbente per togliere il
liquido in eccesso. Non tamponare direttamente i pozzetti.
NOTA. Per risultati ottimali, lavare i pozzetti con AccuGENE®
Molecular Biology Water (Cat. #51200).
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione non bagnare i pozzetti quando la cassetta è collegata
all’alimentazione ad alta tensione.
5. Collocare la cassetta sul dock e farla scorrere in posizione; la
cassetta dovrebbe scattare nel dock. Far scorrere la maschera
27
FlashGel® Mask al suo posto sotto alla seconda fila di pozzetti per
ridurre al minimo la luce che passa attraverso i pozzetti ed
aumentare la visibilità mentre i campioni si separano.
ATTENZIONE. Per evitare un’esposizione accidentale all’alta
tensione non caricare i campioni mentre la cassetta è collegata
all’alimentazione ad alta tensione.
ATTENZIONE. Usare la maschera FlashGel® per bloccare la
luce dalla seconda fila dei pozzetti quando vengono usate le
cassette di recupero FlashGel®.
6. Caricare i campioni ed i marker. Consultare la tabella 1 (pag. 8-9)
per la preparazione del campione e i marker consigliati.
NOTA. Per monitorare il recupero utilizzare il frammento di
controllo FlashGel® Control Fragment.
7. Collegare l’alimentazione a bassa tensione sul dock inserendo il
cavo nella presa sul retro del dock e poi collegare l’alimentazione.
Questa è l’alimentazione per la fonte luminosa.
8. Accendere la luce del dock premendo il pulsante arancione sulla
parte alta dell’unità.
NOTA. La luce si spegnerà automaticamente dopo 10 minuti.
Riavviare premendo il pulsante arancione.
ATTENZIONE. Manipolare o toccare le cassette solo dopo
aver spento la tensione e disinserito i cavi.
9. Collegare i cavi dell’alta tensione all’alimentazione e impostare la
corrente alla tensione consigliata (tabella 1, pag. 8-9).
NOTA. Le correnti di avvio tipiche dovrebbero rientrare in un
intervallo di 20 -25 mA.
28
NOTA. È normale una certa espressione di soluzione tampone
dai pozzetti durante la corsa. Indossare guanti, camici e occhiali
di sicurezza durante la manipolazione.
10. Lasciare che la corsa proceda, monitorando la migrazione dei
campioni da recuperare. Immediatamente prima che i campioni
desiderati raggiungano i pozzetti di recupero (2° fila),
spegnere l’alimentazione e scollegare i cavi ad alta tensione.
Non togliere la cassetta dal dock.
ATTENZIONE. Manipolare o toccare le cassette solo dopo
aver spento la tensione e disinserito i cavi.
11. Eliminare per assorbimento il tampone in eccesso dai pozzetti di
recupero e aggiungere 20 μl/pozzetto di soluzione tampone di
recupero FlashGel® Recovery Buffer.
®
12. Togliere la maschera FlashGel , ricollegare i cavi di tensione e
accendere di nuovo l’alimentazione. Per osservare la migrazione
di banda del DNA usare gli occhiali di visualizzazione FlashGel® .
13. Far correre fino a quando la banda da recuperare è entrata nel
pozzetto di recupero, e il bordo frontale della banda si è spostato
sul bordo anteriore del pozzetto di recupero.
NOTA. Quando si recupera più di un frammento dal gel, iniziare a
recuperare innanzitutto il frammento più piccolo.
14.
Spegnere l’alimentazione, scollegare i cavi e quindi usare una
pipetta per rimuovere la soluzione tampone di recupero contente il
DNA.
ATTENZIONE. Durante la manipolazione delle cassette
FlashGel® indossare guanti, camice da laboratorio e occhiali di
protezione.
NOTA. la quantità recuperata non rappresenterà gli interi 20 μl
caricati nel pozzetto.
15.
Per il recupero di grandi quantità di DNA (>350 ng), potrebbe
essere necessario ripetere il ciclo di elettroforesi-recupero per
29
poter recuperare il massimo di materiale di DNA.
Se necessario, aggiungere altri 20 μl si soluzione tampone di
recupero FlashGel® Recovery Buffer ed avviare di nuovo la corsa
fino a quando il campione è arrivato al bordo anteriore del
pozzetto di recupero e quindi recuperarlo. Ripetere se necessario,
facendo sempre attenzione a spegnere l’alimentazione e a
scollegare i cavi prima di recuperare i campioni.
NOTA. La capacità tampone della cassetta di recupero FlashGel®
Recovery Cassette consentirà un supporto di ~12-14 minuti del
tempo totale di corsa a 275V. Fare attenzione nel recupero di più
frammenti o di frammenti eccezionalmente grandi per evitare un
eccessivo tempo di corsa.
16.
I recuperi di campioni possono essere valutati rapidamente
mediante il sistema standard FlashGel® per il DNA e il FlashGel®
QuantLadder.
Preparare un campione di DNA recuperato combinando volumi
uguali di DNA recuperato e acqua e quindi aggiungendo quantità
appropriate di colorante di caricamento 5X FlashGel® Loading
Dye. Il volume del campione di DNA per il controllo di recupero
dipende dalla quantità di DNA iniziale caricato sul gel di recupero.
Valutare la quantità di DNA nel campione recuperato comparando
rispetto alle bande nel FlashGel® QuantLadder (tabella 3, pag. 31;
Fig. 8, pag. 32).
NOTA. In base alla quantità di tempo di corsa usato per la fase di
recupero, la stessa cassetta FlashGel® potrà essere utilizzata per
controllare il campione recuperato. La cassetta sarà funzionale
fino a ~ 12-14 minuti del tempo di corsa totale a 275V.
30
Informazioni di riferimento
Tabella 3. Livelli di DNA FlashGel® QuantLadder
Frammento
Carico di 2,5 µl
Carico di 5,0 µl
1500 bp
15 ng
30 ng
800 bp
10,5 ng
21 ng
400 bp
7,5 ng
15 ng
250 bp
3,75 ng
7,5 ng
100 bp
1,5 ng
3 ng
Fig. 7. Immagini della cassetta di recupero FlashGel® prima e
dopo il recupero di un frammento di DNA di 1000 bp (carico di
300 ng)
31
Fig. 8. Recupero di frammenti di DNA di un intervallo di ampie
dimensioni su cassetta di DNA FlashGel®
1
2
3
4
5
6
7
8
I campioni (100 ng) di frammenti di DNA sono stati separati e
recuperati utilizzando il sistema di recupero FlashGel® Recovery
System . L’immagine precedente illustra l’analisi di aliquote di 3 μl di
DNA recuperato con una cassetta di DNA FlashGel® 1,2%.
Linee del campione:
Linea 1: FlashGel® DNA Marker 100-4000 bp
Linea 2: FlashGel® QuantLadder (2,5 µL)
Linea 3: frammento di DNA da 50 bp
Linea 4: frammento di DNA da 200 bp
Linea 5: frammento di DNA da 500 bp
Linea 6: frammento di DNA da 1000 bp
Linea 7: frammento di DNA da 2000 bp
Linea 8: frammento di DNA da 4000 bp
32
Informazioni per gli ordini
Sistema FlashGel®
Cat. N.
57025
Descrizione
FlashGel® Dock
Misura/formato
Una misura
57040
FlashGel® Camera
Una misura
57067
FlashGel® System
Comprende dock, fotocamera,
scatola di 9 cassette di DNA,
colorante di caricamento e marker
Sistema FlashGel® per DNA
Cat. N.
Descrizione
Misura/formato
®
57023
FlashGel DNA
Cassettes
agarosio 1,2%
formato 12+1 pozzetto a linea
singola
57029
FlashGel® DNA
Cassettes
agarosio 1,2%
formato 16+1 pozzetto a linea
doppia
57031
FlashGel® DNA
Cassettes
agarosio 2,2%
formato 12+1 pozzetto a linea
singola
57032
FlashGel® DNA
Cassettes
agarosio 2,2%
formato 16+1 pozzetto a linea
doppia
50462
FlashGel®
Loading Dye
5 fiale da 1 ml
concentrazione 5X
50473
FlashGel® DNA Marker
100 bp – 4 kb
500 μl Pronto per l’uso
Consigliato per cassette 1,2%
Dimensioni di banda:
100/200/300/500/800/1250/2000/4000 bp
57033
®
FlashGel DNA Marker
50 bp – 1,5 kb
500 μl Pronto per l’uso
Consigliato per cassette 2,2%
Dimensioni di banda:
50/100/150/200/300/500/800/1500 bp
33
Cat. N.
Descrizione
Misura/formato
57034
FlashGel® DNA Marker
100 bp – 3 kb
500 μl Pronto per l’uso
Consigliato per cassette a doppia
fila
Dimensioni di banda:
100/300/500/800/1500/3000 bp
®
50475
FlashGel
QuantLadder
57026
FlashGel® DNA Starter
Pack
250 μl Pronto per l’uso
Dimensioni di banda:
100/250/400/800/1500
Include: dock FlashGel®, scatola di 9
cassette di DNA 1,2%, agarosio
formato 12+1 pozzetto a linea
singola
1 ml FlashGel® Loading Dye e 150
μl FlashGel® DNA Marker
Sistema FlashGel® per RNA
Cat. N.
Descrizione
57027
FlashGel® RNA
Cassettes
Misura/formato
agarosio 1,2%
formato 12+1 pozzetto a linea singola
57028
FlashGel® RNA
Cassettes
agarosio 1,2%
formato 16+1 pozzetto a linea doppia
50571
Formaldehyde
Sample Buffer
Soluzione tampone di denaturazione
dell’RNA contenente blu di
bromofenolo e xilene cianolo, 5 x 1 ml.
50462
FlashGel® Loading
Dye
Soluzione tampone di RNA nativo
5 fiale da 1 ml
concentrazione 5X
50577
FlashGel® RNA
Marker
0,5 bp – 9 kb
50 µg (1 µg/ml)
51200
AccuGENE®
Molecular Biology
Water (DNase/RNase free)
Per il lavaggio dei pozzetti del
campione e diluizione dell’RNA
1L
57024
FlashGel® RNA
Starter Pack
Include: Scatola di 9 cassette di RNA
con agarosio 1,2%, formato 12+1
34
pozzetti a fila singola; soluzione
tampone di campione di formaldeide;
FlashGel® RNA Marker; e
AccuGENE® Molecular Biology Water.
Il dock viene venduto separatamente
Sistema FlashGel® per recupero
Cat. N.
57051
Descrizione
FlashGel® Recovery
Cassettes
Misura/formato
agarosio 1,2%
formato 8+1 doppia fila
57060
FlashGel® Recovery
Buffer
2 fiale da 500 ml
57050
FlashGel® Recovery
Kit
Include: Scatola di 9 cassette di
recupero con agarosio 1,2%,
formato 8 + 1 pozzetti a doppia fila;
FlashGel® Loading Dye; FlashGel®
Recovery Buffer; FlashGel®
QuantLadder; FlashGel® Control
Fragment; FlashGel® Visualization
Glasses; FlashGel® Mask. Il dock
viene venduto separatamente
Garanzia e responsabilità
Questo prodotto è stato fabbricato applicando gli standard più elevati per materiali,
mano d’opera e progettazione. Lonza Rockland, Inc. garantisce che il prodotto è stato
testato e sarà conforme o supererà le specifiche pubblicate. Questa garanzia è valida
solo se il prodotto è stato messo in funzione e conservato conformemente alle istruzioni
fornite.
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Se il prodotto presentasse dei difetti durante questo periodo, Lonza Rockland, Inc.,
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causati da corrosione di solventi, danni causati da una manipolazione non corretta o da
modifiche effettuate dall’utente, prestazioni non soddisfacenti quale risultato di
condizioni fuori dal controllo di Lonza Rockland, Inc. Lonza Rockland, Inc., in nessun
caso sarà responsabile di danni accidentali o derivati, inclusi non esaustivamente, perdita
di profitti, perdita di reddito, perdita di opportunità commerciali, perdita dell’utilizzo e
altri danni correlati causati in qualsiasi modo e qualsiasi danno che possa sorgere dall’uso
non corretto del prodotto.
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Informazioni sulla licenza e sul marchio
Alcuni componenti e tecnologie del sistema FlashGel® sono venduti con contratti di
licenza. La colorazione dell’acido nucleico in questo prodotto è fabbricata e venduta in
licenza da Molecular Probes, Inc.; la cassetta FlashGel® viene venduta in licenza da
Invitrogen IP Holdings, Inc. e il suo utilizzo è limitato esclusivamente in ambito di
ricerca o di controllo qualità e è coperta da brevetti registrati ed in corso di registrazione.
Dark Reader è un marchio registrato di Clare Chemical Research, Inc. La tecnologia
FlashGel® Dock contiene la tecnologia del transilluminatore Clare Chemical Research,
Inc. Dark Reader® ed è protetta dai brevetti statunitensi 6,198,107; 6,512,236; e
6,914,250. La tecnologia di elettroforesi è concessa in licenza dalla Temple University
ed è protetta da brevetto statunitense 6,905,585. Polaroid è un marchio di fabbrica di
Polaroid Corporation. RiboPure è un marchio registrato di Ambion, Inc. Tutti gli altri
marchi sono marchi di Lonza Group e delle sue associate.
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