Prof. Giovanni Raugei
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BIOLOGIA MOLECOLARE
•Struttura dei nucleotidi e degli acidi nucleici.
•Meccanismo della duplicazione del DNA
e del controllo della fedeltà della copia. Mutazioni
•Meccanismi di controllo della trascrizione e maturazione dell'mRNA
•Il meccanismo della traduzione: codice genetico. Targeting proteico.
•Interferenza a RNA
•Struttura della cromatina.
•Struttura dei genomi.
•Oncogeni.
•Struttura delle immunoglobuline e generazione della diversità anticorpale.
INGEGNERIA GENETICA (TECNOLOGIA DEL DNA RICOMBINANTE)
•cDNA, esperimento di clonaggio e vettori di espressone.
•Esempi di espressione di proteine ricombianti (biofarmaci, vaccini ricombinanti).
•Biofarmaci di seconda generazione e la mutagenesi in vitro.
•Anticorpi chimerici e umanizzati
•Animali e piante transgenici. Clonazione.
•La tecnica della PCR in diagnostica.
WATSON
ALBERTS
NMP ≅ 340Da (RNA)
dNMP ≅ 330Da (DNA)
Bp= base pair ≅ 660Da
1000bp ≅ 660kDa
Legame
fosfoesterico
Legame
N-glicosidico
Accoppiamenti tra basi azotate
Base adenina-timina
(due legami idrogeno)
Timina
Adenina
deossiribosio
deossiribosio
Base guanina-citosina
(tre legami idrogeno)
Citosina
deossiribosio
Guanina
deossiribosio
Il doppio
filamento
3’
5’
5’
3’
Pseudo-nodi: appaiamento fra sequenze che non sono contigue
RNA M1,
componente
dell’enzima RNasiP
Appaiamenti non canonici fra basi dell’RNA
NMP ≅ 340Da (RNA)
dNMP ≅ 330Da(DNA)
Bp= base pair ≅ 660Da
1000bp ≅ 660kDa
Confronto fra le forme A, B e Z
Forma A
Forma B
Forma Z
Senso dell’elica
Destrorsa
Destrorsa
Sinistrorsa
Diametro
26 Å
20 Å
18 Å
Coppie basi/giro
11
10.5
12
Distanza fra le basi
2.6 Å
3.4 Å
3.7 Å
Piegamento basi rispetto
alla normale all’asse
20°
6°
7°
Coefficiente di estinzione molare ε: Assorbanza (densità ottica) di una soluzione a concentrazione 1M
attraverso una cuvetta a cammino ottico unitario, ad una certa lunghezza d’onda.
veloce
Denaturazione
reversibile e
riassociazione
del DNA
lento
EFFETTO IPERCROMICO
Deossi-oligonucleotidi
sintetici
