Influenza aviare (H5N1) e influenza H1N1
Come proteggere me stesso, la mia famiglia e la collettività
5 ottobre 2009
Azienda Ospedaliera L.Sacco Milano
“Influenza suina:
caratterizzazione dei ceppi
circolanti in Italia ”
Paolo Cordioli
Istituto Zooprofilattico Sperimentale della Lombardia e dell’Emilia
Romagna“B.Ubertini”
Brescia
Influenza suina: infezione respiratoria acuta
sostenuta da un orthomyxovirus tipo A
Il virus influenzale è un patogeno respiratorio primario
I focolai sono caratterizzati dalla rapida diffusione di una
sintomatologia febbrile con difficoltà respiratorie, tosse,
diminuzione del consumo di alimento e perdita di peso
considerevole
Morbilità elevata, mortalità bassa recupero in 7-10 giorni
Maggiore frequenza nei mesi invernali
Non si hanno indicazioni di variazioni di virulenza a
seconda del ceppo interessato
Molto frequenti forme subcliniche o paucisintomatiche: Î
sindrome multifattoriale respiratoria con altri patogeni
Patogenesi
Il virus penetra per via inalatoria e replica nelle
cellule epiteliali dell’intero tratto respiratorio ma
soprattutto nei bronchi, bronchioli e alveoli polmonari
dove raggiunge titoli molto elevati >log 8.0 EID50/g
Sintomatologia clinica in presenza di alti titoli virali e
alte concentrazioni di citochine infiammatorie
(Van Reeth et al. 1998,2000,2002; Barbé et al. 2009)
Tale situazione si può riprodurre sperimentalmente
tramite inoculazione intra-tracheale con alte dosi
virali (>107.0 EID50),
Patogenesi
L’inoculazione per via endonasale o per aerosol
determina una forma subclinica o lieve e ridotti titoli
virali nel polmone (Van Reeth et al. 1998)
Il challange I.T. di animali immuni, per infezione o
vaccinazione, non causa sintomatologia (no virus
nei polmoni, no citochine)
La risposta sierologica è rapida (7-10 gg) ed
efficiente, anticorpi sono presenti sia nel siero che
negli essudati
Gli anticorpi sono neutralizzanti anti-HA (SN e HI),
ma anche anti-NA, -NP e -M (la cui capacità
protettiva non è stata mai studiata nel suino)
Lesioni
Polmonite virale, più colpiti i lobi apicali e
cardiaci
Heinen Vet science tomorrow2002
Origine dei virus influenzali in
America (Vincent et al. 2008)
H3N2
N
H1N1
Virus suini
circolanti negli
Stati Uniti (Vincent
et al. 2008)
H3N2
rH1N1
H1N2
Probabile diffusione interspecie
dei virus influenzali
Suino e Virus Influenzale
E’ sensibile ai virus aviari
Molti dei virus stabilizzati nella popolazione suina
sono di origine aviare
Sperimentalmente è sensibile a tutti i vari H (1-15)
che elimina per alcuni giorni e verso cui produce
anticorpi neutralizzanti e HI (solo verso quelli
suini) [Kida et al.1994]
Infezioni naturali del suino in campo con virus
influenzali vari come H1N7, H2N3, H4N6, H3N3,
H5N1, H5N2, H9N2, H7N7
Suino e Virus Influenzale
Infezioni sperimentali di suini condotte
all’IZSLER nel 2004-2007 con ceppi aviari
italiani H7N1 (HP e LP), H7N3 LP e H5N1
HP hanno causato per tutti i ceppi:
sieroconversione e scarsa eliminazione virale non
sufficiente a trasmettere il virus ad altri suini a
contatto
risposta sierologica positiva in Elisa NP-A e SN per i
ceppi omologhi
risposta sierologica negativa in HI anche per i ceppi
omologhi.
Patogenesi comparata dell’infezione nel
suino con virus H5N2 LP e H1N1 suino
(De Vleeschauwer et.al.2009)
Entrambi i virus replicano meglio nel polmone che
nelle prime vie respiratorie
Il virus aviare infetta un numero di cellule inferiore
a tutti i livelli dell’albero respiratorio, poche cellule
infette nella mucosa nasale e difficoltà a essere
eliminato per via aerea
Ridotte lesioni polmonari e sintomatologia clinica
Estrema variabilità individuale
Suino e Virus Influenzale
E’ sensibile ai virus umani
H1N1 presente dal 1918 a fine anni ’70 in Europa
e tuttora presente in America
H3N2 dal 1968 in Europa e dal 1997-98 in
America
Sia in America che in Europa sono presenti
riassortanti H1N2 human-like
La suscettibilità sia ai virus aviari che umani è
determinata dalla presenza a livello di apparato
respiratorio suino di recettori sia per virus
influenzali aviari ac.sialico 2,3-gal. che umani
ac.sialico 2,6-gal.
Suino e Virus Influenzale
E’ in grado di trasmettere virus influenzali
alle specie aviari
H3N2 ha causato infezione in tacchini (Yassin et al.
2007)
..e all’uomo..
Myers et al. 2007 hanno identificato in letteratura 50
casi documentati di infezione dell’uomo da parte di
virus influenzali suini in molti casi con isolamento e
caratterizzazione virale
19 casi negli Stati Uniti, 6 in Cecoslovacchia, 4 in
Olanda, 3 in Russia e Svizzera, 1 in Canada e
Hong Kong
H1N1umano ceppo California 04/2009
infezione sperimentale in suini (Brown et al.2009 )
6 gruppi di suini di 4-5 settimane (n.22)
Gruppo A 11 suini infettati i.n.
Gruppo B 3 suini di controllo
Gruppo C-F 8 suini posti a contatto a coppia in tempi
diversi
Sintomatologia clinica tipica
variazioni individuali
Febbre, tosse, letargia, inappetenza
Virus eliminato dal 1 g p.i. con picco a 3-5 gg
Suini infetti sono in grado di trasmettere il virus a suini a
contatto per almeno tre cicli
Suino e Virus Influenzale
Ricerca di anticorpi specifici per virus suini
in categorie a rischio (allevatori, veterinari
e addetti ai macelli)
Olsen et al. (2002) hanno rilevato anticorpi
per H1N1 in allevatori e addetti
all’allevamento
Myers et al. 2006 hanno evidenziato
anticorpi per H1N1, H1N2 e H3N2 in
allevatori, veterinari e in misura inferiore
addetti alle macellazioni
Densità di popolazione suina e ceppi influenzali isolati
all’IZSLER nel periodo 2005-2008
Isolamenti virus influenzali
2005-2008 IZSLER
Virus
N° isolati
H1N1
101 (45,5%)
H3N2
77 (34,7%)
H1N2
43 (19,4%)
H3N1
1 (0.4%)
TOTALE
222
Isolamenti virus influenzali 2005-2008
Reparto virologia IZSLER
Virus
N° isolati
UEP-MDCK
UEP
MDCK
H1N1
53 (46,1%)
24
5
24
H3N2
46 (41,6%)
27
17
2
H1N2
14 (12,2%)
6
3
5
H3N1
1 (0.9%)
1
NT
1 (0.9%)
1
TOTALE
115
Indagini effettuate per SIV su campioni
conferiti alla sezione di Brescia
Anno
Positivi RTPCR
44
% positivi
2005
Campioni
esaminati
956
2006
1060
56
5,3
2007
852
57
6,7
2008
821
85
10,4
4,6
H1
60
99
86
sw/It/242578/04
sw/It/53949/04
sw/It/65296/04
66568-7 04
55
sw/It/125746/05
188539
44795
80114
sw/It/37460/07
sw/It/290851/04
sw/It/204931-2/05
85 sw/It/45894-2/07
45894-2 07
sw/It/19154/06
39787
80
sw/It/39787/08
39787 08
308869-5
308869-7
61
308869-6
204931-2 05
sw/It/43145/08
58
43145
98 43145
196875
126348 5
78 126348 8
186798
126348 4
64
126348 7
138842
2929-2 05
270132-3
2929-6 05
233608-34 04
126348 3
sw/Sp/53207/04
256764
207871
10169 01
sw/It/10169/01
sw/It/258654/04
sw/It/110093/02
59
sw/It/227234/03
sw/It/90315/04
sw/It/4443/00
sw/IV/1455/99
sw/Sp/51915/03
72024-1
99 73567
308869-3
99 308869-4
14641
94608 1
67
126348 1
73 sw/It/4320/02
sw/It/207828/03
97
4230 02
207828 02
68
sw/It/1302/06
99 1302 06
308869-2
308869-1
97 11301
sw/It/9212/99
sw/It/1511/98
sw/It/9328/98
90
99 9328 98
sw/It/1390-5/95
sw/It/1589/98
sw/Ger/8533/91
sw/UK/195852/92
sw/CA/1482/99
sw/Fin/2899/82
sw/Fr/4203/85
A/California/04/2009
sw/Iowa/15/30 H1N1
56
20
99
lineage americano
H1N2
hu/Memphis/7/1980 H1N1
H1N2 Italiani
94
lineage euro-asiatico
sw/It/204931-2/05 H1N1
sw/It/37460/07 H1N1
sw/It/290851/04 H1N1
sw/It/125746/05 H1N1
sw/It/43145/08 H1N1
sw/It/39787/08 H1N1
sw/It/19154/06 H1N1
71
sw/It/45894-2/07 H1N1
86
sw/It/53949/04 H1N1
76
sw/It/242578/04 H1N1
70
sw/It/65296/04 H1N1
sw It 90729 09 H1N1
84
58
sw/Sp/53207/04 H1N1
54
sw It 67351 09 H1N1
sw/Sp/51915/03 H1N1
sw/It/10169/01 H1N1
sw/It/258654/04 H1N1
sw/It/1302/06 H1N1
sw/It/4320/02 H1N1
72
96 sw/It/207828/03 H1N1
94
sw/It/4443/00 H1N1
sw/It/90315/04 H1N1
sw/It/110093/02 H1N1
97
sw/It/227234/03 H1N1
56
sw/IV/1455/99 H1N1
sw/It/2064/99 H1N2
24
sw/It/1589/98 H1N1
sw/It/1390-5/95 H1N1
sw/It/9212/99 H1N1
sw/Ger/8533/91 H1N1
sw/UK/195852/92 H1N1
61
sw/It/1511/98 H1N1
sw/It/9328/98 H1N1
99
89
sw/CA/1482/99 H1N1
sw/Fin/2899/82 H1N1
sw/Fr/4203/85 H1N1
99
sw/Iowa/15/30 H1N1
hu/Memphis/7/1980 H1N1
sw/Scot/410440/94 H1N2
sw/Eng/690421/95 H1N2
99
80
sw/It/1081/00 H1N2
71
sw/It/18/00 H1N2
82
87
sw Gent 108 01 H1N2
sw/Gent/7625/99 H1N2
90
sw/CA/800/00 H1N2
61
sw/CA/2433/98 H1N2
sw/CA/790/97 H1N2
50
sw/It/5433/01 H1N1
sw/It/62/98 H1N2
sw/It/3592/99 H1N2
56
sw/It/233139/05 H1N2
83
19
sw/It/114347-1/06 H1N2
89
sw/It/50568/05 H1N2
sw It 198260 08 H1N2
70 sw It 70757 09 H1N2
94
sw It 59209-2 09 H1N2
sw It 81062 09 H1N2
99
sw It 81226 09 H1N2
57
H1 (HA1)
Italy 2001-09
IV/1455/99 like
H1N1
Reassortant strain
Italy 1995-99
Fin/2899/82 like
Italy 1998-03
20
Italy 2005-07
H1N2
Reassortant strain
ALBERO NA: sequenze di NA totale di ceppi H1N1
italiani e di riferimento del Lineage USA.
A/Sw/It/1492/97
A/Sw/1513-8/98
A/Sw/UK/195852/92
A/Sw/Bel/74/85
A/Sw/It/1424-4/95
A/Sw/It/1509-6/97
100
A/Sw/IV/1455/99
A/Sw/CA/1488/99
100
A/Sw/CA/1121/00
57
100 Sw/CA/1482/99
A/Sw/CA/1515/99
A/Sw/Lot/2979/82
69
A/sw/Fin/3616/84
98
A/sw/Sp/51915/03
A/Sw/It/65296/04
A/sw/Sp/53207/04
100
100 A/Sw/It/53949/04
A/Sw/It/66945/06
54
A/Sw/It/247578/04
53
A/California/04/2009
A/Sw/MN/00395/04
100 A/Sw/Korea/CN22/06
A/Sw/Korea/PZ72-1/06
A/Sw/IN/PU542/04A/Sw/MI/PU243/04
69
100
100
50
Lineaggio
Americano
90
Lineaggio Euro-asiatico
81
N1 (514 bp)
Italy 2001-2007
Fin/2899/82 like
Italy 2001-2004
IV-1455/99 like
10
sw/It/290851/04 H1N1
sw/It/65296/04 H1N1
sw/It/29313/06 H1N1
sw/It/242578/04 H1N1
sw/It/53949/04 H1N1
sw/Sp/52307/04 H1N1
sw/It/37460/07 H1N1
sw/It/19154/06 H1N1
sw/It/45894-2/07 H1N1
sw/It/125746/05 H1N1
sw/Fin/2899/82 H1N1
sw/It/204931-2/05 H1N1
sw/It/258654/04 H1N1
sw/It/112147/04 H1N1
sw/It/77048/04 H1N1
sw/It/306907-1/03 H1N1
sw/It/101069/01 H1N1
sw/Sp/51915/03 H1N1
sw/It/215990/03 H1N1
sw/It/4320/02 H1N1
sw/It/207828/02 H1N1
sw/It/1302/06 H1N1
sw/It/9328/98 H1N1
sw/It/1424-4/95 H1N1
sw/It/1509-6/97 H1N1
sw/CA/1482/99 H1N1
sw/CA/1515/99 H1N1
sw/Lot/2979/82 H1N1
sw/Fin/3616/84 H1N1
sw/It/1492/97 H1N1
sw/It/9212/99 H1N1
sw/It/1513-8/98 H1N1
sw/It/4443/00 H1N1
sw/It/90315/04 H1N1
sw/CA/1488/99 H1N1
sw/CA/1121/00 H1N1
sw/It/227234/03 H1N1
sw/It/110093/02 H1N1
sw/IV/1455/99 H1N1
sw/It/5433/01 H1N1
sw/Uk/195852/92 H1N1
sw/Belg/74/85 H1N1
Memphis/7/80 H1N1
H3 (722bp)
98
20
Eurasian swine H3N2 lineage (PC73–like)
sw/It/32242/06 H3N2
sw/It/301095/07 H3N2
sw/It/114347-2/06 H3N2
sw/It/50127/07 H3N2
99
sw/It/120032-fo/06 H3N2
sw/It/39158/07 H3N2
sw/It/65260-11/06 H3N2
sw/It/79604/06 H3N2
93
sw/It/10762/7 H3N2
sw/It/319388/07 H3N2
92
sw/It/58356/04 H3N2
sw/It/253025/03 H3N2
sw/It/30574/05 H3N2
90
sw/Sp/54008/04 H3N2
sw/It/268086-2/03 H3N2
sw/It/112141/04 H3N2
sw/It/2608/01 H3N2
99
sw/It/7680/01 H3N2
99
sw/It/1484/02 H3N2
sw/It/246340/04 H3N2
89
sw/It/297576/04 H3N2
99
sw/It/66945/06 H3N1
sw/Sp/39139/02 H3N2
sw/It/6189/99 H3N2
sw/Sp/33601/01 H3N2
85
sw/It/9264/98
H3N2
97
sw/It/600/99 H3N2
82
sw/It/568/98 H3N2
sw/Fin/510/94 H3N2
sw/HK/1197/02 H3N2
73
99
sw/It/1461/96 H3N2
sw/It/1477/96 H3N2
99
sw/It/1243/92 H3N2
99
sw/It/635/87 H3N2
sw/It/520/85
H3N2
99
sw/CA/3633/84 H3N1
A/Port Chalmers/1/73 H3N2
A/Philippines/2/82 H3N2
A/Beijing/32/92 H3N2
99
sw/Nebraska/209/98 H3N2
99
sw/Guangdong/4/03 H3N2
95
sw/Fin/127/99 H3N2
99
sw/HK/2405/98 H3N2
80
sw/It/10762/07 H3N2
sw It 91283 08 H3N2
sw It 20600-2 08 H3N2
93
sw
120014 08 H3N2
95 sw ItIt136775
08 H3N2
sw
It
254696
08 H3N2
95 69
sw It 117304 08 H3N2
sw/It/319388/07 H3N2
52
It 319388 08 H3N2
99 sw
sw It 153530 08 H3N2
sw/It/79604/05 H3N2
72
sw/It/120032/06 H3N2
sw It 301095 07 H3N2
60
sw It 301095 08 H3N2
93
99
sw/It/39158/07 H3N2
sw/It/114347-2/06 H3N2
83
sw/It/32242/06 H3N2
sw It 196875 08 N2
91
99
sw/It/253025/03
H3N2
99
sw/It/14021-45/05
81 sw/It/52401-35/04 H3N2 H3N2
78
sw/It/600/99 H3N2
97
sw/It/1510/98 H1N2
sw/It/9264/98
H3N2
93
99
sw/Sp/33601/01 H3N2
sw/It/6189/99 H3N2
sw/It/568/99 H3N2
sw/Sp/39139/02 H3N2
63
sw/Flanders/1/98
64
72 sw It 30153 09 H3N2
71 sw It 54381 09 H3N2
99
99 sw It 264657 08 H3N2
78
sw It 72483 09 H3N2
99
47
75
sw/Sp/54008/04 H3N2
sw It 243409 08 N2
sw/It/92726-46/04 H3N2
90 56 sw/It/2608/01 H3N2
99
sw/It/7680/01
H3N2
80 sw/It/1484/02 H3N2
59
sw/It/233608-36/04 H3N2
sw/It/261517-63/04 H3N2
91
sw/It/1461/96 N2
sw/It/636/87 H3N2
Udorn/1972 H3N2
95
A/sw/Granstedt/IDT3475/2004 H1N2
97
A/sw/Kitzen/IDT6142/2007 H1N2
50
sw/Gent/108/01 H1N2
sw/It/1081/00 H1N2
80
87
92 sw/It/18/00 H1N2
sw/Gent/7625/99
sw/It/2064/99 H1N2
99
99 sw/CA/790/97 H1N2
76
sw/CA/800/00 H1N2
sw/CA/2433/98 H1N2
99
sw/It/3592/99
H1N2
40
sw/1521/98 H1N2
53
81
sw/It/62/98
H3N2
87
sw/UK/119404/91
H3N2
sw/Scot/410440/94 H1N2
A/sw/Pingtung/92-2/2003 H1N2
54
A/Siena/4/1990 H3N2
A/Beij/32/92 H3N2
55
A/Siena/3/1995 H3N2
99
sw/Fin/127/99 H3N2
70
75
A/sw/Hong Kong/NS623/02 H1N2
99
99
A/sw/Hong Kong/1110/06 H1N2
A/sw/Hong Kong/294/09 H1N2
97
H3N2
99 A/Managua/2347.01/2007
A/Kentucky/UR07-0038/2008
H3N2
99
A/Taiwan/72106/2007
H3N2
92
A/Hong Kong/HKU77/2005 H3N2
A/Genoa/14/2003 H3N2
A Hong Kong CUHK20199 97 H3N2
sw It 81226 09 H1N2
13
99 sw It 81062 09 H1N2
91
70 sw It 59209-2 09 H1N2
sw It 70757 09 H1N2
63 sw/It/50922/05 H1N2
99
sw/It/626-2/06 H1N2
sw/It/233139-fo/05 H1N2
sw/It/114347-1/06 H1N2
99
Sw/It/198260/ 08 H1N2
63
N2 (791bp)
Italy 2007-08
Swine H3N2
Italy 2009
Human H3N2
20
Human H3N2
Italy 2003-09
Human like
Swine H1N2
Scot/410440/94
like
Conclusioni
Virus costantemente presenti negli allevamenti
Possibili ricombinazioni
H1N1 v è in grado di infettare sperimentalmente i suini e
naturalmente sia suini che tacchini
Non si conosce l’impatto dell’infezione da H1N1 v in
allevamenti già infetti dai comuni virus influenzali
Necessità di tipizzazione di un maggior numero di ceppi
circolanti negli allevamenti
Applicazione di norme di biosicurezza in caso di focolaio
predisposizione di tappetini o apposite vaschette con disinfettanti
all'entrata e all'uscita di ogni settore dell'azienda
limitazione il più possibile delle entrate di visitatori
utilizzo delle mascherine per tutto il personale a contatto con gli animali
misure igieniche personali (cambio indumenti, lavaggio delle mani,..)
Utilizzo di presidi immunizzanti efficaci
Grazie per l’attenzione !
