DNA - RNA Le unità fondamentali costituenti il DNA e l’ RNA sono i Nucleotidi. Nucleotide = Gruppo Fosforico + Zucchero Pentoso + Base Azotata. Esistono 4 basi azotate per il DNA e 4 per RNA Differenze • Desossiribosio (DNA) • Ribosio (RNA) • Timina (DNA) • Uracile (RNA) • DNA ha una struttura a doppia elica • RNA è formato da un filamento singolo NUCLEOTIDI: Sono nucleosidi a cui è legato 1 o + gruppi FOSFATO in posizione 3’ e/o 5’ DNA Il DNA è costituito da una doppia elica •Le due catene sono antiparallele e complementari •La La struttura è stabilizzata da legami H intracatena fra le coppie complementari p p possibili • Elica destrorsa: le basi sono rivolte all all’interno interno esponendo all’esterno solo i gruppi fosforici polari Le coppie di basi possono essere alternate lt t senza nessuna limitazione L’Acido Ribonucleico RNA • È costituito da un unico filamento e • da Ribonucleotidi • Al posto della Timina è presente l’Uracile l Uracile Esistono diversi tipi p di RNA Vi sono tre tipi di RNA comuni a tutti gli organismi cellulari: mRNA (RNA messaggero) contiene l'informazione per la sintesi delle proteine secondo il codice genetico; rRNA (RNA ribosomiale) entra nella struttura dei ribosomi dove avviene il processo di traduzione proteica tRNA (RNA transfer) traduzione nei ribosomi, permettendo la corretta traslazione della sequenza polinucleotica in sequenza polipeptidica In che modo il DNA / RNA influenza la Sintesi Proteica? • La struttura primaria di ogni proteina è una sequenza di amminoacidi 20 Amminoacidi biologicamente importanti • Il DNA è costituito da una sequenza lineare di Nucleotidi 4 differenti nucleotidi nel DNA /RNA Le informazioni per “produrre” una proteina sono portate dalla molecola di RNA in forma di codoni a tripletta. p Le triplette dettano la precisa sequenza lineare degli amminoacidi in un particolare catena polipeptidica. ⇒ CODICE ⇒ 3 Nucleotidi ⇒ 1 Amminoacido ⇔ 43= 64 combinazioni 3 Nucleotidi = 1 codone Anche se le combinazioni sono 64 gli a.a. sono 20: • Molti codoni sono ridondanti • 3 codoni sono di stop • L’unico codone che codifica la Met funge anche da starter. Trascrizione dell’ RNA Per la trascrizione dell’RNA, il DNA si apre nel punto di attacco dell’ RNA-polimerasi. •La trascrizione del filameto di RNA avviene usando un filamento di DNA come matrice secondo le regole di appaiamento delle basi dei nucleotidi. • Man mano che l’RNA-polimerasi si sposta lungo l molecola la l l di d DNA DN i legami l idrogeno d tra i due d filamenti di DNA si riformano separandosi dal pp trascritto. filamento di RNA appena La molecola di RNA è una copia complementare della sequenza nucleotidica presente nel fil filamento di DNA usato come stampo. Il processo di trascrizione consta di diverse fasi: 1. Legame polimerasi con il promotore Il promotore t ((promoter) t ) è un segmento t di DNA specifico ifi che viene riconosciuto dalla polimerasi 2. Svolgimento della doppia elica avviene ad opera di elicasi, enzimi delle cellule eucariote. 3. Sintesi della catena polinucleotidica dell dell’RNA RNA 4. Termine della trascrizione avviene per riconoscimento sul DNA di specifiche sequenze « sequenze di stop t » Le molecole di mRNA sono costituite da 1000-10000 nucleotidi e sono le copie di lavoro del DNA genetico per sintetizzare la proteina. L'mRNA eucariotico che è stato modificato e trasportato al citoplasma (detto a questo punto RNA maturo), può poi essere tradotto dal ribosoma. La relazione che esiste fra sequenza polinucleotidica e sequenza polipeptidica è chiamata CODICE ( (Nirenberg, g, GENETICO 1960) Sintesi Proteica La sintesi proteica avviene nei Ribosomi. Ogni ribosoma è costituito da 2 subunità. Ribosomi = rRNA + Proteine Le molecole L l l d mRNA RNA iniziano i i i sempre con un codone AUG. • Il filamento di mRNA si attacca alla subunità ribosomica più piccola • La prima molecola di tRNA che ha il codone complementare ad AUG si lega al codone AUG sulla molecola di mRNA • Tale T l molecola l l di tRNA RNA è legata l all’amminoacido fMet • La subunità ribosomica p più ggrande si lega con il tRNA nel sito P (Peptide) Una molecola di tRNA è costituita da circa 80 nucleotidi legati assieme in una singola catena. La catena termina sempre con la l tripletta l CCA. A tale l estremità à si lega l’amminoacido specifico del tRNA. Si possono stabilire dei legami idrogeno tra alcuni nucleotidi. I In alcuni l i punti ti d i dei nucleotidi l tidi spaiati i ti formano dei “bracci”. Il braccio destro ha il compito di legare il tRNA alla superficie del ribosoma. I tre nucleotidi in basso costituiscono l’anticodone e hanno un ruolo fondamentale nella sintesi proteica. Un secondo tRNA con il suo anticodone complementare al secondo codone dell dell’ mRNA si porta nel sito A (Amminoacido) e qui si lega all’mRNA. • Tra i due amminoacidi riuniti nel ribosoma si forma un legame peptidico • Il legame tra il primo tRNA e il suo amminoacido si spezza, il secondo tRNA si sposta dalla posizione A alla P •In A si posiziona un nuovo tRNA col suo amminoacido corrispondente • Il processo si ripete fino a che non si incontra un codone di termine e il polipeptide è completo • Il sito A è occupato da un fattore di rilascio che stimola la dissociazione delle due subunità Riassumendo Gene Strutturale Un Gene Strutturale: Gene la cui attività e funzione è codificare la struttura di una proteina. I un gene strutturale In l vii sono sequenze nucleotidiche codificanti dette esoni alternate a sequenze che non codificano per le proteine dette introni. Durante la trascrizione tutto il gene viene tradotto in RNA. In seguito infatti avviene l’eliminazione degli introni e lo splicing p degli esoni ottenendo il filamento di m-RNA che va dal nucleo al citoplasma, dove ci sono i ribosomi, ib i proteica. per l la sintesi i t i