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Regione Siciliana
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Azienda Ospedaliero Universitaria
"Policlinico - Vittorio Emanuele"
Catania
Protocollo
Settore; Provveditorato ed Economato
Gruppo .'Procedure Aperte
Tel. 095/3781721 Fax 095/3781727
Oggetto: richiesta di preventivo di spesa di materiale per il Laboratorio di Citogenetica
Spett.le Ditta: a chi di interesse
Si richiede, cortesemente, la formulazione di un preventivo di spesa, per la fornitura del
seguente materiale diagnostico necessario per il Laboratorio di Citogenetica delLU.O. Laboratori
Centralizzati dell'A.O.U. "Policlinico - Vittorio Emanuele".
In riferimento ai prodotti di seguito elencati si intende applicata la formula della equivalenza
che sarà valutata a giudizio insindacabile degli operatori di questa Azienda.
- VOCE 1. ENZIAMA TAO POLYMERASE
a)Enzima per l'amplificazione del DNA ad alta efficienza, Taq DNA polimerasi ricombinante con tecnologia "hot start"
complessata con anticorpo che blocca l'attività dell'enzima a temperatura ambiente, attività ripristinata dopo un ciclo di
denaturazione di POR, buffer di reazione senza Mg, MgC12 25 mM in provetta separata per l'ottimizzazione della
reazione, lunghezza DNA target sino a 5 Kb, efficienza anche su templati con contenuto in GC, U (5U/ul), dNTPs e
buffer inclusi, consumo semestrale 750 U (massime U/tubo 250U).
b) Enzima per l'amplificazione del DNA ad alta efficienza per l'amplificazione di frammenti di DNA fino a 30 Kb (long
Range), con le seguenti caratteristiche principali: formulazione Hot Start anticorpo mediata, elevata efficienza anche su
templati con alto contenuto in GC( >60%), dNTPs e buffer di reazione inclusi. Consumo semestrale N. (500 U)
(massime U/tubo 250U).
e) Enzima Taq-DNA Polymerase ricombinante provvisto di attività 3' 5' esonucleasica con elevata perfomance di
fedeltà, confezionato in vials . Il confezionamento deve includere buffer di reazione lOX, dNTPs, MgCh alla
concentrazione di 25 mM in vial separata. Il range di templati deve essere compreso almeno tra <I00bp a 10Kb
Consumo semestrale 2500 U (massime U/tubo 250U).
- VOCE 2. ESTRAZIONE DI ACIDI NUCLEICI DNA/ RNA E PURIFICAZIONE DEI PRODOTTI DI PCR E
DI SEQUENZA.
a) Kit per la preparazione rapida di DNA da sangue periferico (quantità fino a 200 mi)e da piccole quantità di cellule in
coltura (minimo da 10' a lO' cellule) con tecnologia spin column (membrana di Silice). Le colonnine devono essere
sterili. Deve essere possibile effettuare ad eccezione della lisi, tutti i passaggi a temperature ambiente. Deve essere
precisato che il kit abbia sistemi di protezione che riducano al minimo i rischi di contaminazione. Il kit deve essere in
possesso di regolare licenza (Boom). La casa distributrice deve assicurare tramite riferimenti bibliografici che i kit sono
utilizzabili per la procedura di QF-PCR. Il kit deve poter essere utilizzato anche con sistemi di estrazione automatica.
Consumo annuale 1000 test
b) Kit per la preparazione rapida di piccole quantità di DNA da sangue (1-100 mi di sangue), tessuto fresco o congelato
(<ìOmg di tessuto), cellule <10^), macchie di sangue (3 mm di diametro), campioni non di sangue (capelli, saliva,
sperma). Le colonnine devono essere sterili. Deve essere possibile effettuare ad eccezione della lisi, tutti i passaggi a
temperature ambiente. Deve essere precisato che il kit abbia sistemi di protezione che riducano al minimo i rischi di
contaminazione. Il kit deve essere in possesso di regolare licenza(Boom).
Consumo semestrale 200 test
c) Kit per Peliminazione dei dye terminator. Kit per l'eliminazione dei seguenti marcatori: BigDye terminator. Il kit
deve essere eseguibile in non più di 10 minuti per una maggiore processività. Il sistema deve essere basato su colonnine
pre-idratate per evitare errori manuali.
Consumo semestrale 3250 test
SEDE LEGALE - Via Santa Sofia, 78-95Ì23 Catania
C.F. e P.I. 04721290874
Regione Siciliana
Azienda Ospedaliero Universitaria
"Policlìnico - Vittorio Emanuele"
Catania
e) Sistema di purificazione dei prodotti di POR (da 80 bp fino a 4 Kb) mediante tecnica "silica based" e in fase liquida,
comprensivo di buffers, privi di reagenti organici, per rimuovere enzimi, primers, nucleotidi, sali e coloranti. Recupero
minimo 90% del campione e possibilità di eluizione in piccolo volume da 10 a 30 microlitri. Inoltre il kit deve avere la
possibilità di poter essere automatizzato. Consumo semestrale N.IOOO test
f) Kit per la purificazione dei prodotti da POR di grandi dimensioni. 11 kit di purificazione deve poter permettere una
purificazione di ampliconi da IO a 100 Kb. Recupero minimo 90 % del campione e possibilità di eluizione in piccolo
volume (circa 20 a 50 microlitri). Inoltre il kit deve avere la possibilità di poter essere automatizzato. Consumo
semestrale N. 150 test
g) kit per la preparazione di RNA totale da cellule/tessuti/ sangue, su colonna senza uso di fenolo (phenol-free), con
eliminazione della contaminazione di DNA genomico. Ideale per RT-PCR e RNA-Seq. Inoltre il kit deve avere la
possibilità di poter essere automatizzato. Consumo semestrale N. 50 test
h) Kit per la sintesi di cDNA. Il kit deve soddisfare le seguenti caratteristiche: preparazione veloce di cDNA, possedere
un sistema di eliminazione di artefatti, avere la possibilità di monitorare la sintesi di cDNA tramite controllo intemo,
sintetizzare cDNA per uso in real-time PCR Consumo semestrale N. 50 test
VOCE 3
Kit per la determinazione di mutazioni nel gene CFTR responsabile della Fibrosi Cistica in campioni pre e post natali
basato su PCR multiplex allele-specifiche ed elettroforesi capillare (tramite sequenziatore automatico ABIPRISM3130).
Il kit deve comprendere il più ampio numero di mutazioni possibili (almeno 60) con maggiore incidenza sul territorio
nazionale e regionale. Il kit deve inoltre rilevare le varianti politimine (5T/7T/9T) e nel caso 5T anche le TG associate.
Il kit deve essere provvisto di files di setting per l'ottimizzazione dell'interpretazione dei risultati sulla strumentazione
in uso dal laboratorio. La ditta deve inoltre fornire, per l'analisi, un marcatore fluorescente in Grange, insieme alla
matrice corrispondente, con frammenti nel range di 75-550 bp. Consumo semestrale 150 test.
VOCE 4
Kit per la determinazione delle microdelezioni del cromosoma Y mediante PCR fluorocromata, caratterizzato dalla
presenza di almeno 8 marcatori nelle regioni AZFa, AZFb e AZFc e ulteriori 21 marcatori per approfondimento (in
accordo con le attuali linee guida EAA ed EMQN), basato su PCR multiplex allele-specifiche ed elettroforesi capillare
(tramite sequenziatore automatico ABIPRISM3130). La ditta deve inoltre fornire, per l'analisi, un marcatore
fluorescente in Grange, insieme alla matrice corrispondente, con frammenti nel range di 75-550 bp. Il kit deve essere
certificato secondo le normative vigenti. Consumo semestrale 50 test.
In uno al preventivo di spesa, si chiede di indicare la percentuale di sconto che viene
applicata e di inviare copia a stralcio del listino prezzi. Si richiede altresì di trasmettere,
opportunamente compilata, la dichiarazione sostitutiva come da allegato facsimile.
Per ciascun prodotto offerto, inoltre, dovrà essere indicato il codice di repertorio ed il codice CND.
Data l'urgenza di approvvigionare il materiale oggetto delle presente si invita a riscontrare
con ogni massima cortese sollecitudine, presentando offerta, in busta chiusa, entro e non oltre il
giorno 24 Aprile 2017.
f
11 Dirigente del Settore
Proweditoraio jéH Economato
(Dott. Mafiri^ Grasso)
SEDE LEGALE - Via Santa Sofìa, 78-95123 Catania
C.F. e P.l. 04721290874
