Trascrizione 1 - sciunisannio.it

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Replicazione e trascrizione
 RNA Inizia sintesi ex-novo
 RNA prodotto si stacca dalla
doppia elica di DNA per liberare
nuovi siti (più cicli) un gran numero
di trascritti in breve tempo per
ciascuna unita trascrizionale
 dopo la trascrizione i filamenti di
DNA dietro si riassociano
 è meno precisa 1 errore ogni
10000 nucleotidi
 È estremamente regolato
Replicazione e trascrizione
 Flusso d’informazione
 processo mediante il quale
l’informazione della sequenza
nucleotidica viene trasferita dal
DNA all’RNA
 Fondamentali differenze tra
procarioti ed eucarioti
Maturazione
Del RNA
Reazione catalizzata dalla RNA polimerasi
La chimica della sintesi degli RNA è la stessa per tutti i tipi di RNA.
Dopo aver selezionato il corretto nucleotide trifosfato, l’enzima catalizza la formazione
del legame fosfodiesterico utilizzando ioni Mg2+ quali cofattori (Figura 5).
La reazione di allungamento dell’RNA in fase di sintesi è:
(RNA)n + rNTP → (RNA)n+1 + PPi
Nei batteri, l’enzima intero (oloenzima) è costituito dalle subunità α2ββ’σ.
La subunità σ è fondamentale perché aiuta la RNA polimerasi nella ricerca del sito di
inizio della trascrizione.
La sua dissociazione origina il nucleo dell’enzima, ovvero la RNA polimerasi α2ββ’
cataliticamente attiva.
TRASCRIZIONE
•
La trascrizione implica la sintesi di una catena di RNA, identica in sequenza ad
uno dei filamenti di DNA.
•
•
Viene sintetizzato in direzione 5’-3’ ed è complementare allo stampo
contrariamente alla sintesi del DNA, la sintesi dell’RNA può iniziare de novo.
La prima base aggiunta al 5′ è pppG oppure pppA
.
INIZIO
Trascrizione
•
(filamento codificante) o stampo
•
Filamento (non stampo ) simile all’RNA
Trascrizione
Trascrizione
Trascrizione




Enzima: RNA polimerasi
Il promotore
Il sito di inizio
Sequenza di
terminazione
Trascrizione
Unità di trascrizione (sequenza di DNA)
1) Inizia a livello del promotore (punto d’inizio +1)
2) Termina a livello del terminatore
3) Può codificare anche più di un gene
Trascrizione
Trascrizione
25 bp
Trascrizione




Riconoscimento stampo : la polimerasi
si lega al promotore e i filamenti stampo
di aprono.
L’inizio : sintesi dei primi legami
nucleotidici nell’RNA, possibili eventi
abortivi.
L’allungamento : l’enzima si sposta sul
DNA e determina la crescita della catena
di RNA , l’enzima spostandosi svolge il
duplex.
La terminazione : riconoscimento del
punto che non codifica per alcuna base,
terminano i legami fosfodiesterici e il
complesso trascrizionale libera lo
stampo.
RNA polimerasi
RNA polimerasi
Subuni
t
β'
β
α
Size
Gene
Function
160 kDa
155 kDa
40 kDa
rpoC
rpoB
rpoA
s
70 kDa
(general)
rpoD
form the catalytic center.
form the catalytic center.
enzyme assembly; also
binds UP sequence in the
promoter
confers specificity for
promoter; binds to -10 and
-35 sites in the promoter
RNA polimerasi
RNA polimerasi
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