A questo punto, abbiamo deciso di procedere in un modo

GRUPPO DI LAVORO NEUROPSICOFARMACOLOGIA
Scheda attività di ricerca
Nome Gruppo di ricerca
NEUROFARBA - 6
Università/Istituto
Università degli Studi di Firenze/Dipartimento di
Neuroscienze, Psicologia, Area del Farmaco e Salute del
Bambino – NEUROFARBA – Sezione di Farmacologia e
Tossicologia.
Prof.ssa Felicita Pedata - Prof. Ordinario
Dott.ssa Anna Maria Pugliese, MD - Ricercatore
Dott.ssa Alessia Melani – Assegnista
Dott.ssa Elisabetta Coppi - Assegnista
Dott.ssa Giovanna Maraula – Dottoranda
Dott.ssa Lucrezia Cellai – Dottoranda
La linea di ricerca di Felicita Pedata e del suo gruppo verte
sullo studio del ruolo di mediatori purinergici, adenosina e
ATP, in condizioni fisiologiche e in modelli animali di
malattie neurodegenerative nel sistema nervoso centrale.
Negli ultimi anni le ricerche hanno fondamentalmente
riguardato lo studio dei meccanismi patogenetici e la
possibile identificazione di farmaci protettivi nell’ischemia
cerebrale. In particolare sono stati studiati gli effetti e le
modalità d’azione di farmaci attivi sui recettori A2A di
adenosina e P2 per ATP in modelli in vivo di ischemia
focale permanente e transiente ottenuta nel ratto
mediante occlusione dell’arteria cerebrale media e in
modelli in vitro di deprivazione di ossigeno e glucosio in
fettine di ippocampo di ratto e in colture cellulari. Le
metodologie utilizzate sono state di tipo biochimico,
istologico ed elettrofisiologico. Tali studi hanno fornito
l’informazione che farmaci purinergici sono protettivi
nelle fasi precoci dopo ischemia cerebrale in quanto
riducono meccanismi di eccitotossicità. Inoltre approcci
farmacologici rilevanti sono quelli che possono essere
attuati con farmaci purinergici anche in una fase più
tardiva dello stroke per limitare eventi infiammatori che
sono causa di un danno ischemico secondario e ostacolanti
i fisiologici processi endogeni neuro genetici
In vivo
Della microdialisi cerebrale.
Di ischemia cerebrale focale permanente e transitoria nel
ratto (occlusione dell’arteria cerebrale media mediante
filamento).
Componenti del gruppo
Breve riassunto attività di ricerca
Modelli animali
Di ischemia cerebrale globale nel ratto (legamento
bilaterale dell’arteria carotide comune).
Modelli cellulari
Principali tecniche utilizzate
In vitro
Fettine cerebrali di ratto e/o topo isolate in acuto come
modello di trasmissione sinaptica in condizione fisiologiche
o simil-ischemiche (oxygen-glucose deprivation, OGD).
Allestimento e mantenimento di colture primarie di
oligodendrociti e di cellule mesenchimali staminali umane
(hMSC). Mantenimento di colture di cellule CHO.
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Tecnica chirurgica di occlusione dell’arteria cerebrale
media permanente o transitoria nel ratto;
Tecnica chirurgica di occlusione bilaterale delle arterie
carotidi comuni nel ratto;
Tecnica di perfusione transcardiaca;
Tecnica della microdialisi verticale nel ratto e nel topo;
Tecniche di HPLC per la valutazione di neuromediatori
(adenosina, glutammato, aspartato, GABA, taurina);
Tecniche di luminescenza per la determinazione di
ATP;
Tecniche di frazionamento cellulare e isolamento delle
vescicole sinaptiche;
Tecniche di valutazione comportamentali in roditori
(deficit motori e neurologici);
Tecniche di valutazione comportamentali della
cognizione;
Tecniche
di
registrazioni
elettrofisiologiche
extracellulari da fettine cerebrali di ratto e/o topo
isolate in acuto.
Tecniche di registrazioni elettrofisiologiche in patchclamp da cellule isolate;
Tecniche di istochimica per la valutazione di danno
neuronale con propidio ioduro, cresyl violetto,
ematossilina eosina, TTC;
Tecniche di valutazione della proliferazione cellulare
mediante marcatura con 5-bromo-2'-deossiuridina ;
Tecniche di immunoistochimica e immunocitochimica
per la visualizzazione di neuroni maturi e immaturi e di
cellule microgliali, astrogliali, oligodendrociti a vari
stadi di maturazione e di proteine MAPK (p38, ERK 1/2
e JNK), di recettori A 2A adenosinici;
Tecniche di Western blotting;
Tecniche di immunofluorescenza;
Allestimento e mantenimento di cellule in coltura:
colture primarie di neuroni, glia, oligodendrociti,
mesenchimali staminali umane e CHO.
Coinvolgimento del gruppo in -Corso di Farmacologia per la Laurea Magistrale in Biologia
attività didattiche nell’ambito (Prof. Pedata);
neuropsicofarmacologico
-Corso di Neuropsicofarmacologia per la Laurea Magistrale
in Biologia (Prof. Pedata);
-Corso di Farmacologia Cellulare per la Laurea Magistrale
in Biologia (Dr. Pugliese);
-Dottorato Internazionale In Area Del Farmaco e
Trattamenti Innovativi (Dr. Pugliese);
-Dottorato di Neuroscienze (Prof. Pedata);
-Scuola di Specializzazione in Tossicologia (Prof. Pedata)