Biol. Mar. Mediterr. (2009), 16 (1): 268-269 V. Grandi, R. Simonini, G. Massamba N’Siala, D. Prevedelli Dipartimento di Biologia Animale, Università di Modena e Reggio Emilia Via Campi, 213 D - 41100 Modena, Italia. [email protected] RICOSTRUZIONE TRIDIMENSIONALE DELLA MUSCOLATURA DI OPHRYOTROCHA ADHERENS (POLYCHAETA: DORVILLEIDAE) THREE-DIMENSIONAL RECONSTRUCTION OF THE MUSCOLATURE OF OPHRYOTROCHA ADHERENS (POLYCHAETA: DORVILLEIDAE) Abstract - The F-actin muscular subset of Ophryotrocha adherens was labelled with phalloidin and the architecture of the muscular system was three-dimensionally reconstructed by means of Confocal Laser Scanning Microscopy (cLSM). The pattern of musculature resembles that of other dorvilleids and Ophryotrocha species recently described. Key-words: fluorescence microscopy, muscular system. Introduzione - Il genere Ophryotrocha comprende specie di policheti tra le più frequenti negli habitat portuali (Simonini et al., 2009). Recentemente, esemplari di O. adherens e O. diadema, specie ermafrodite simultanee, sono state rinvenute per la prima volta nel Mediterraneo Occidentale. In questo studio è stata analizzata la struttura tridimensionale della muscolatura di esemplari di laboratorio di O. adherens originari di Porto Empedocle (AG, Sicilia), tramite microscopio a scansione laser confocale (cLSM). Materiali e metodi - Dieci organismi sono stati anestetizzati con MgCl2 al 7%, fissati con una soluzione contenente paraformaldeide al 4% e saccarosio al 12% e preincubati in una soluzione di preincubazione (Triton 4%, BSA 0,25%, in PBS NaN3 0,1M 0,05%). Infine, la falloidina è stata utilizzata come fluoroclomo (Filippova et al., 2006). I vetrini sono stati preparati utilizzando come montante il DABCO, e sono stati successivamente osservati al cLSM. Risultati - Il sistema muscolare di Ophryotrocha adherens è costituito da numerosi elementi (Fig. 1A,B,C). Nella parte anteriore del corpo è molto evidente la muscolatura faringea. I muscoli longitudinali della parete del corpo si allungano anteriormente fino al bulbo faringeo, assottigliandosi progressivamente fino al margine tra metastomio e prostomio. Quest’ultimo ospita numerosi elementi muscolari con differente orientamento. Sul lato dorsale si trovano due fasci muscolari trasversali (PStm1, PStm2), posto sul confine tra metastomio e prostomio (Fig. 1A). A livello della porzione distale del prostomio, sia dorsalmente sia ventralmente, si trovano i punti di attacco dei muscoli alla cuticola. A livello della muscolatura trasversale del prostomio si inseriscono tre fasci muscolari longitudinali dorsali: un fascio interno (iDLM), uno medio (mDLM) e uno esterno (oDLM); inoltre è visibile una coppia di muscoli dorsali longitudinali crociati (cDLM) che si incrociano l’uno con l’altro (Fig. 1A). Sul lato ventrale sono visibili due fasci ventrali laterali (sVLM) e due fasci longitudinali diagonali ventrali (1dVLM e 2dVLM) . Questi fasci si allungano dorsalmente, verso l’estremità anteriore del prostomio, dove si ramificano dando origine ai siti di attacco. I 1dVLM e 2dVLM del lato sinistro e destro del corpo si incrociano a livello della parte mediale del prostomio. La muscolatura longitudinale è ben sviluppata in posizione dorsale, ventrale e ventromediale (Fig. 1B,C). Dorsalmente possono essere identificati, a partire dall’esterno, i muscoli traversali (tm) e diagonali (dm), e più internamente i muscoli longitudinali dorsali (DLM). I Ricostruzione tridimensionale della muscolatura di O. adherens 269 fasci DLM decorrono parallelamente lungo tutto il corpo. Dorsalmente rispetto al cordone nervoso ventrale, giace un fascio muscolare longitudinale ventromediale (mVLM) (Fig. 1C). Il lato ventrale della parete del corpo presenta i muscoli longitudinali ventrali (VLM), sviluppati quanto i DLM. La muscolatura parapodiale (pmc) è costituita da numerosi elementi organizzati in un complesso simile a quello osservato in altri dorvilleidi (Fig. 1C) (Filippova et al., 2006; Bergter et al., 2008). Fig. 1 - Muscolatura di O. adherens. Barra = 100 mm. A. Visione dorsale dei muscoli del prostomio. B. Visione dorsale del corpo. C. Visione ventrale del corpo e del complesso parapodiale. Musculature of O. adherens. Scale bar = 100 m m. A. Dorsal view of the prostomial muscles. B. Dorsal view of the trunk. C. Ventral view of the trunk and parapodial muscle complex. Conclusioni – L’organizzazione strutturale di base della muscolatura dei policheti è caratterizzata dalla presenza di uno strato esterno di fibre trasversali ed uno interno di fasci longitudinali che decorrono lungo tutto il corpo dell’animale (Filippova et al., 2006; Purschke e Müller, 2006). Questo schema è presente anche in Ophryotrocha diadema (Bergter et al., 2008), O. labronica e nella specie considerata, O. adherens. Le maggiori differenze nella muscolatura di O. adherens, O. diadema e O. labronica si riscontrano a livello del capo e della parete del corpo. Ulteriori studi sul sistema muscolare di queste specie potranno contribuire alla comprensione delle relazioni esistenti tra struttura muscolare, stile di vita e pattern evolutivi dei policheti. Bibliografia BERGTER A., BRUBACHER J.L., PAULULAT A. (2008) - Muscle formation during embryogenesis of the polychaetes Ophryotrocha diadema (Dorvilleidae) - new insights into annelid muscle patterns. Front. Zool., 5: 1-18. FILIPPOVA A., PURSCHKE G., TZETLIN A.B., MÜLLER M.C.M. (2006) - Three-dimensional reconstruction of the F-actin musculature of Dorvillea kastjani (Dorvilleidae, Polychaeta) by means of phalloidin-labelling and cLSM. Sci. Mar., 70: 293-300. PURSCHKE G., MULLER M.C.M. (2006) - Evolution of body wall musculature. Integr. Comp. Biol., 46 (4): 497-507. SIMONINI R., GRANDI V., MASSAMBA N’SIALA G., PREVEDELLI D. (2008) - Distribution of the genus Ophryotrocha (Polychaeta) in Italy: new reports and comments on the biogeography of Mediterranean species. Vie et Milieu, in press.